RESUMO
ABSTRACT INTRODUCTION: Chronic rhinosinusitis with nasal polyps is a multifactorial disease entity with an unclear pathogenesis. Contradictory data exist in the literature on the potential implication of viral elements in adult patients with chronic rhinosinusitis. OBJECTIVE: To compare the prevalence of human herpes viruses (1-6) and Human Papilloma Virus in adult patients with chronic rhinosinusitis with nasal polyps and healthy controls. METHODS: Viral DNA presence was evaluated by real-time polymerase chain reaction application to nasal polyps specimens from 91 chronic rhinosinusitis with nasal polyps patients and nasal turbinate mucosa from 38 healthy controls. RESULTS: Epstein-Barr virus positivity was higher in nasal polyps (24/91; 26.4%) versus controls (4/38; 10.5%), but the difference did not reach significance (p = 0.06). Human herpes virus-6 positivity was lower in nasal polyps (13/91; 14.29%) versus controls (10/38; 26.32%,p = 0.13). In chronic rhinosinusitis with nasal polyps group, 1 sample was herpes simplex virus-1-positive (1/91; 1.1%), and another was cytomegalovirus-positive (1/91; 1.1%), versus none in controls. No sample was positive for herpes simplex virus-2, varicella-zoster virus, high-risk-human papilloma viruses (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59) and low-risk-human papilloma viruses (6, 11). CONCLUSION: Differences in Epstein-Barr virus and human herpes virus-6 positivity among patients with chronic rhinosinusitis with nasal polyps and healthy controls are not statistically significant, weakening the likelihood of their implication in chronic rhinosinusitis with nasal polyps pathogenesis.
RESUMO INTRODUÇÃO: A rinossinusite crônica com pólipos é uma doença multifatorial de etiopatogênese ainda não definida. Existem dados contraditórios na literatura sobre a implicação potencial de elementos virais na etiologia de pólipos nasossinusais. OBJETIVO: Comparar a prevalência de herpes vírus humanos (1-6) e papiloma vírus humano em pacientes adultos com rinossinusite crônica com pólipos nasais (CRwNP) e controles saudáveis. MÉTODO: A presença de DNA viral foi avaliada por PCR em tempo real, em amostras de pólipos nasais de 91 pacientes com CRwNP e na mucosa das conchas nasais de 38 controles saudáveis. RESULTADOS: A positividade do EBV foi maior nos pólipos nasais (24/91; 26,4%) do que nos controles (4/38; 10,5%), mas a diferença não foi significante (p = 0,06). O HHV-6 apresentou positividade menor nos pólipos nasais (13/91; 14,29%) do que os controles (10/38; 26,32%), (p = 0,13). No grupo CRwNP, uma amostra foi positiva para o vírus herpes simples (HSV-1) (1/91; 1,1%), e uma para citomegalovírus (CMV) (1/91; 1,1%); e nenhuma amostra foi positiva no grupo controle. Não houve amostra positiva para HSV-2, VZV, HR-HPV (16,18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59) e LR-HPV (6,11). CONCLUSÃO: Diferenças de positividade do EBV e HHV-6 entre pacientes com CRwNP e controles saudáveis não são estatisticamente significantes, enfraquecendo a probabilidade de sua implicação na patogênese da CRwNP.
Assuntos
Adolescente , Adulto , Idoso , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Adulto Jovem , Herpesviridae/isolamento & purificação , Mucosa Nasal/virologia , Pólipos Nasais/virologia , Papillomaviridae/isolamento & purificação , Rinite/virologia , Sinusite/virologia , Estudos de Casos e Controles , Doença Crônica , Estudos Transversais , DNA Viral/isolamento & purificação , Herpesviridae/classificação , Herpesviridae/genética , Estudos Prospectivos , Papillomaviridae/classificação , Papillomaviridae/genética , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo RealRESUMO
Background: The most used test for the diagnosis of viral respiratory infection is the detection of viral antigens by direct immunofluorescence (DFA), in samples taken by nasopharyngeal swab (NPS) or aspirate (NPA). It would be desirable to have a less uncomfortable technique to obtain a sample from the patient, but of equal performance. Aim: To evaluate the diagnostic agreement between nasal swab (NS) and nasopharyngeal swab (NPS) in the detection of respiratory viruses by DFA and compare the degree of discomfort of both techniques in pediatric patients. Methodology: Cross-sectional study in children who consulted to a pediatric emergency service with respiratory symptoms. Two samples (NPS and NS) per child were collected. The concordance between the two was determined by Kappa (K) coefficient and the degree of discomfort by a visual pain scale. Results: We obtained 112 samples from 56 children, one by each technique. 82.1% were concordant, K = 0.61 (CI95%, 0.39-0.83) for the detection of any virus, and K = 0.69 (CI 95%, 0.46- 0.92) and K = 0.76 (CI 95%, 0.51-1) for syncytial respiratory virus and influenza A detection, respectively. The degree of discomfort was significantly lower for the NS. Conclusion: There is considerable agreement in the detection of respiratory viruses by DFA between samples obtained by NS and NPS, but not enough to recommend a change in the sampling method in this population.
Introducción: El examen más utilizado para el diagnóstico de infecciones respiratorias virales es la detección de antígenos virales por inmunofluorescencia directa (IFD) en muestras tomadas por hisopado nasofaríngeo (HNF) o aspirado (ANF). Sería deseable contar con una técnica de toma de muestra menos molesta para el paciente pero de igual rendimiento que las mencionadas. Objetivo: Evaluar la concordancia diagnóstica entre hisopado nasal (HN) e HNF en la detección de virus respiratorios por IFD y comparar el grado de molestia de ambas técnicas en pacientes pediátricos. Métodos: Estudio transversal en niños que consultaron en una urgencia pediátrica por síntomas respiratorios agudos. Se recolectaron dos muestras (por HNF y HN) por cada niño para detección viral mediante IFD. Se determinó la concordancia entre ambas mediante coeficiente Kappa (K) y se analizó el grado de molestia que causa la toma de muestra con escala visual. Resultados: Se obtuvo 112 muestras en 56 niños, una por cada técnica. La concordancia entre ellas fue de 82,1%, con un K = 0,61 (IC95% 0,39-0,83) para la detección de cualquier virus, K = 0,69 (IC 95% 0,46- 0,92) para virus respiratorio sincicial y K = 0,76 (IC 95% 0,51-1) para influenza A. El grado de molestia fue significativamente menor para el HN. Conclusiones: Existe una concordancia considerable en la detección de virus respiratorios mediante IFD en muestras tomadas por HNF como HN, pero insuficiente como para recomendar un cambio de metodología de la toma de muestra en esta población.
Assuntos
Adolescente , Criança , Pré-Escolar , Feminino , Humanos , Lactente , Recém-Nascido , Masculino , Mucosa Nasal/virologia , Nasofaringe/virologia , Infecções Respiratórias/diagnóstico , Estudos Transversais , Técnica Direta de Fluorescência para Anticorpo , Infecções Respiratórias/virologia , Sensibilidade e Especificidade , Manejo de EspécimesRESUMO
Mutant viral strains deleted in non-essential genes represent useful tools to study the function of specific gene products in the biology of the virus. We herein describe an investigation on the phenotype of a bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) recombinant deleted in the gene encoding the enzyme thymidine kinase (TK) in rabbits, with special emphasis to neuroinvasiveness and the ability to establish and reactivate latent infection. Rabbits inoculated with the parental virus (SV-507/99) (n=18) at a low titer (10(5.5)TCID50) shed virus in nasal secretions in titers up to 10(4.5)TCID50 for up to 12 days (average: 9.8 days [5-12]) and 5/ 16 developed neurological disease and were euthanized in extremis. Rabbits inoculated with the recombinant BoHV-5TKΔ at a high dose (10(7.1)TCID50) also shed virus in nasal secretions, yet to lower titers (maximum: 10(2.3)TCID50) and for a shorter period (average: 6.6 days [2-11]) and remained healthy. PCR examination of brain sections of inoculated rabbits at day 6 post-infection (pi) revealed a widespread distribution of the parental virus, whereas DNA of the recombinant BoHV-5TKΔ-was detected only in the trigeminal ganglia [TG] and olfactory bulbs [OB]. Nevertheless, during latent infection (52pi), DNA of the recombinant virus was detected in the TGs, OBs and also in other areas of the brain, demonstrating the ability of the virus to invade the brain. Dexamethasone (Dx) administration at day 65 pi was followed by virus reactivation and shedding by 5/8 rabbits inoculated with the parental strain (mean duration of 4.2 days [1 - 9]) and by none of seven rabbits inoculated with the recombinant virus. Again, PCR examination at day 30 post-Dx treatment revealed the presence of latent DNA in the TGs, OBs and in other areas of the brain of both groups. Taken together, these results confirm that the recombinant BoHV-5TKΔ is highly attenuated for rabbits. It shows a reduced ability to replicate in the nose but retains the ability...
Cepas virais mutantes defectivas em genes não essenciais se constituem em ferramentas úteis para o estudo da função de proteínas virais na biologia dos vírus. Este estudo relata uma investigação do fenótipo, em coelhos, de uma cepa recombinante do herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) defectiva na enzima timidina quinase (TK), com ênfase para a neuroinvasividade e capacidade de estabelecer e reativar a infecção latente. Coelhos inoculados com o vírus parental (SV-507/99, n=18) em baixo título (10(5,5)TCID50) excretaram o vírus nas secreções nasais em títulos de até 10(4,5)TCID50/ mL por até 12 dias (média: 9,8 dias [5-12]) e 5/16 desenvolveram doença neurológica e morreram ou foram eutanasiados in extremis. Em contraste, coelhos inoculados com o recombinante BoHV-5TKΔ em alto título (10(7,1)TCID50) excretaram o vírus em títulos inferiores (máximo 10(2,3)TCID50/ mL), por um período menor (média: 6,6 days [2-11]) e permaneceram saudáveis. A realização de PCR em seções do encéfalo no dia 6 pós-infecção (pi) revelou uma ampla distribuição do DNA do vírus parental, enquanto o DNA do vírus recombinante foi detectado apenas nos gânglios trigêmeos [TGs] e nos bulbos olfatórios [OBs]. Não obstante, durante a infecção latente (52pi), o DNA do vírus recombinante foi detectado nos TGs, OBs e em outros locais do encéfalo, demonstrando que o vírus recombinante mantém a neuroinvasividade. Tratamento com dexamethasona (Dx) no dia 65 pi resultou em reativação e excreção viral por 5/8 dos coelhos inoculados com o vírus parental (duração média de 4,2 dias [1-9]) e por nenhum dos sete coelhos inoculados com o vírus recombinante. No entanto, PCR realizado no dia 30 pós-Dx revelou a presença de DNA latente do BoHV-5TKΔ nos TGs, OBs e em outras áreas do encéfalo. Esses resultados confirmam que o recombinante BoHV-5TKΔ é altamente atenuado para coelhos. A sua capacidade de replicação na mucosa nasal é reduzida, mas mantém a capacidade de invadir o encéfalo e estabelecer infecção...