Evaluation of target mRNA cleavage by Aurorakinase B specific siRNA in prostate and hepatic cancer cells and its therapeutic potential in mouse models of liver cancer.

The anti proliferative potential of siRNA26, targeted to Aurora kinase B, in prostate cancer cells is known from a previous study from our laboratory. Here we first show that siRNA26 cleaves at the same position of the target mRNA in the prostate cancer and hepatocellular carcinoma cell lines, PC3 and HepG2 respectively. Aurorakinase B specific siRNA, but not a control siRNA, inhibited PC3 and HepG2 cell proliferation and cell migration. These effects correlated to RNA silencing of Aurorakinase B in both the cell lines. Intra-tumoral administration of HiPerfect complexed siRNA26 inhibited the growth of HepG2 xenografts in SCID mice. In an orthotopic setting, intravenous administration of HiPerfect encapsulated siRNA26 appeared to reduce the severity of multifocal lesions.

Quimioembolização transarterial hepática: modelo experimental de tumor em ratos / Transarterial hepatic chemoembolization: an experimental model in rats

OBJETIVO: Estabelecer um modelo de tumor no fígado de ratos para estudo do comportamento tumoral e avaliar o uso da quimiembolização transarterial. MÉTODOS: Utilizou-se oitenta e oito ratos Wistar, fêmeas, adultos, pesando entre 175- 284 g . Realizado incisão abdominal de 3 cm e implantou-se o carcinossarcoma de Walker 256 no lóbulo esquerdo do fígado. Dividiu-se em três grupos que receberam respectivamente 100x 10 , 200x 10 e 300x 10 células tumorais, avaliado a pega do tumor e a sobrevida. Em outro grupo de experimento com 39 animais inoculados com tumor de Walker foi avaliado a sobrevida dos animais após infusão do 5-Flourouracil (5-FU) por via intra-peritoneal e intra-arterial. RESULTADOS: O implante do carcinossarcoma de Walker no fígado de ratos apresentou desenvolvimento de 100 por cento, teve um crescimento rápido e desenvolvimento de metástases tardiamente, levando os animais ao óbito entre o sétimo e décimo quinto dia. A quimiembolização transarterial é possível de ser realizada experimentalmente. O uso do 5-FU aumentou a sobrevida em comparação ao grupo controle. CONCLUSAO: O modelo de implante do tumor de Walker no fígado de ratos é eficiente, de fácil reprodutibilidade, e sobrevida média de 9,96±0.3 dias. A quimioterapia transarterial hepática pode ser realizada experimentalmente para avaliar diversas drogas.

Tratamento percutâneo sob orientaçäo ultra-sonográfica, dos tumores hepáticos: experimento em modelo animal / Percutaneous treatment, under ultrasound guidance, of hepatic tumors: an experiment in animal model

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar e comparar a segurança e a efetividade da hipertermia por radiofrequencia e da injeçäo percutânea de álcool intramural na destruiçäo tumoral em coelhas com carcicoma VX2 implantado no fígado. Foram implantadas percutneamente, células de carcicoma VX2 no fígado de 37 coelhas New Zealand brancas. Os tumores foram tratados percutaneamente, sob orientaçäo ultra-sonográfica , com hipertermia por radiofrequencia (n=11) e com injeçäo intramural de álcool (n=14). O grupo controle recebeu injeçäo intramural de 0,5ml de soro fisiológico (n=12). O efeito das duas técnicas foi avaliado pelas medidas de crescimento tumoral, tempo de sobrevida e exame histopatológico post-mortem dos espécimes. As coelhas tratadas com radiofrequência apresentaram média de crescimento tumoral de 449,80 por cento/dia, e o tempo de sobrevida pós-tratamento foi em média 15 dias. As coelhas tratadas com álcool tiveram média de crescimento tumoral de 214,62 por cento/dia e tempo de sobrevida de 13 dias pós-tratamento. O grupo controle apresentou média de crescimento tumoral de 258,27 por cento/dia e viveu, em média, 9 dias pós-tratamento (com soro fisiológico). Metástases pulmonares causaram significativo estresse dos animais e foram a causa da morte de 31 (83,78 por cento dos pacientes) coelhas. Estudo histopatológico dos animais tratados demonstrou necrose tumoral e infarto do parênquima hepático peritumoral. Areas tumorais viáveis e metástases foram identificadas no exame post-mortem. Concluíu-se que a hiperternia por radiofrequencia e a injeçäo intratumoral de álcool säo métodos seguros para a destruiçäo tumoral no modelo animal. As coelhas tratadas apresentaram maior tempo de sobrevida que as do grupo controle, mas sem significância estatística. Näo houve diferença significativano crescimento tumoral entre os grupos. O exame anatopatológico demonstrou o efeito letal da radiofrequencia e do álcool no tumor e tecido hepático peritumoral. A incapacidade de obter-se completo controle local e sistêmico do carcicoma VX2 demonstra a agressividade desse tumor e näo necessariamentea ineficácia dos métodos testados.

Bioterapia del hepatoma de Novikoff con DNA politimidílico / Biotherapy of Novikoff's hepatoma with thymidilic DNA

Con el propósito de investigar una nueva forma de bioterapia nosotros exploramos el tratamiento del hepatoma de Novikoff con DNA que sintetiza RNA mensajero (mRNA). Para trasmitir permanentemente esta información en las células de hepatoma de Novikoff, se decidió usar DNA politimidílico (DNA poli T). La extracción de DNA poli T y de mRNA de hígado y de bazo de ratas normales o inmunizadas con células de hepatoma de Novikoff no viables se llevó a cabo por medio de cromatografía de afinidad con una columna de celulosa-ácido oliodenílico y de celulosa-ácido oligotimidílico, respectivamente. Las células de hepatoma de Novikoff viables fueron inoculadas intraperitonealmente en roedores machos Sprague Dawley, después de haber sido incubadas 30 minutos a 37 ºC con: a) solución salina, b) solución salina con 100 µgde mRNA de hígado normal de rata, c) 100 µg de mRNA de bazo normal de rata, d) 100 µg de mRNA de bazo de ratas inmunizadas con células no viables de hepatoma de Novikoff, e) 100 µg de DNA poli T de hígado normal de rata y f) 100 µg de DNA poli T de bazo normal de rata. La supervivencia de las ratas se evaluó hasta 200 días después de la inoculación de las células tumorales. El análisis de varianza mostró una supervivencia más larga, estadísticamente significativa, de las ratas inoculadas con células de hepatoma de Novikoff tratadas con DNA poli T bazo normal de rata. Estos resultados sugieren que la administración de DNA poli T podría ser usada como poligenoterapia del cáncer y que su efectividad podría ser mayor en las células neoplásicas en suspensión y probablemente la incorporación del DNA poli T en el material genética sería más fácil. Es aconsejable la administración de estas macromoléculas, como una forma de poligenoterapia en neoplasias experimentales, para evaluar su posible utilización en el ser humano