Anticuerpos anti-estreptavidina: Confusión diagnóstica por interferencia bioquímica / Anti-estreptavidin antibodies. Diagnostic confusion by biochemical interference

Se presenta el caso de una paciente que, durante los estudios por búsqueda de fertilidad y posterior embarazo, mostraba un perfil tiroideo alterado con niveles elevados de T4 libre y TSH normal. Luego de descartar un adenoma tirotropo y ante la ausencia de sintomatología clínica de hipertiroidismo, se investigó la posibilidad de interferencias analíticas en los inmunoensayos utilizados para la medición de las hormonas. Se han descrito interferencias causadas por anticuerpos heterófilos, macro TSH, anticuerpos anti-tiroideos, biotina, y en menor medida anticuerpos anti-estreptavidina y anti-rutenio. Los análisis de la paciente se realizaron en autoanalizador cuya plataforma emplea el sistema estreptavidina-biotina que es muy susceptible a varios interferentes. Un algoritmo propuesto incluye una serie de pruebas simples de realizar e interpretar que permiten detectar o descartar la presencia de interferentes. De acuerdo al mismo, se efectuó la comparación con una plataforma analítica diferente (que no utiliza el sistema estreptavidina-biotina), diluciones seriadas, precipitación con polietilenglicol 6000 y tratamiento con micropartículas recubiertas con estreptavidina. Los resultados obtenidos confirmaron la presencia de anticuerpos anti-estreptavidina en el suero de la paciente. Ante discordancias entre las manifestaciones clínicas y los resultados de laboratorio, se debe investigar la posibilidad de interferencias metodológicas para evitar el riesgo iatrogénico potencial que implica una interpretación bioquímica errónea.

We present the case of a patient who, during studies for fertility and subsequent pregnancy, showed an altered thyroid profile with elevated levels of free T4 and normal TSH. After ruling out a thyrotropic adenoma and in the absence of clinical symptoms of hyperthyroidism, the possibility of analytical interference in the immunoassays used to measure hormones was investigated. Interferences caused by heterophile antibodies, macro TSH, anti-thyroid antibodies, biotin, and to a lesser extent anti-streptavidin and anti-ruthenium antibodies have been described. The analysis of the patient was carried out in a self-analyzer whose platform uses the streptavidin-biotin system that is very susceptible to several interferents. A proposed algorithm includes a series of simple tests to perform and interpret that allow detecting or ruling out the presence of interferents. Accordingly, a comparison was made with a different analytical platform (which does not use the streptavidin-biotin system), serial dilutions, precipitation with polyethylene glycol 6000 and treatment with microparticles coated with streptavidin. Results obtained confirmed the presence of anti-streptavidin antibodies in the patient's serum. In the case of disagreements between clinical manifestations and laboratory results, the possibility of methodological interferences should be investigated in order to avoid the potential iatrogenic risk involved in an erroneous biochemical interpretation.

Macroadenomas näo-funcionantes da hipófise: estudo imuno-histoquímico / Functionless pituitary macroadenomas: immunohistochemical study

Cinqüenta e nove adenomas hipofisários, do tipo nao-funcionante, foram analisados pelo método imuno-histoquímico. Os tumores foram estudados através da técnica da peroxidase - avidina - biotina (ABC) e pesquisados os seguintes hormônios, com anticorpos primários específicos: prolactina (PRL), hormônio do crescimento (HS), corticotrofina (ACTH), gonadotrofinas (HCG) e tireotrofina (TSH). Trinta e oito tumores nao reagiram a nenhum anticorpo, 8 tumores apresentaram imunorreaçao positiva à prolactina, 5 tumores eram imunorreativos ao HS, 6 eram imunorreativos ao ACTH, e 10 tumores eram imunorreativos às gonadrotofinas, sendo que 5 ao LH e 5 ao FSH. Dos tumores que apresentaram imunorreatividade ao hormônio do crescimento e à prolactina houve manifestaçao clínica em apenas um, cujo paciente evoluiu com altas taxas de prolactina sangüínea.

Monoclonal antibodies specific for the free alpha subunit of glycoprotein hormones and their use in the development of a sensitive immunofluorometric assay

Glicoprotein hormone free alpha subunit has been used as a marker for some pituitary tumors and to study the reactivity of glycoprotein hormone-producing cells under different circunstances. We describe a highly sensitive ans specific immunofluorometric assau for the measurement of serum free alpha subunit levels. The assay is based on a monoclonal antibody, specific for free alpha subunit, bound to microtiter plates. As tracer antibody we employed an europium-labelled free/complexed alpha subunit specific monoclonal antibody. Using overnight incubation and 50µl samples, the least detectable dose was of the order of 4 ng/1. Cross-reactivity with LH, TSH, FSH, and hCG was 6.5, 1.2, 4.3 and 1.1 percent, repectively. Normal adult males showed values ranging from 120 to 790ng/l, not different from normal adult premenopausal females (88 to 604 ng/l). In post-menopausal females, serum concentrations were significantly highler, ranging from 341 to 407 ng/l. In 56 patients with untreated pituitary tumors (18 "non-secreting", 25 GH-producing and 13 prolactin-producing tumors), 10 showed high values, 3 of them from the first group, 3 from the second and 4 from the third. We conclude that this highly sensitive assay can be a valualbe tool for the diagnosis and follow-up of selected patients with pituatary tumors and in other circumstances in which the glycoprotein hormone-producing cells of the pituitary require evaluation

Prolactinoma: hallazgos clínicos, radiológicos, inmunohistoquímicos y hormonales / Prolactinoma: clinical, radiologic, inmunohistochemical and hormonal findings

Se estudiaron 32 pacientes con el diagnóstico de prolactinoma, durante el período de abril de 1986 a julio de 1987. El diagnóstico se fundamenta en estudios clínicos, radiológicos, inmunohistoquímicos y hormonales. Predominó el sexo femenino y la edad más afectada se encontró en la tercera y cuarta décadas de la vida; los síntomas y signos más frecuentes fueron: cefalea, galactorrea, trastornos menstruales, disfunción sexual y obesidad. En el estudio radiológico simple de cráneo la alteración más frecuente fue el aumento del diámetro de la silla turca; el 55,0%de los enfermos del sexo femenino y el 12,5%del masculino presentaron este estudio normal. Los macroadenomas fueron más frecuentes en los hombres y los microadenomas en las mujeres. La media de prolactina fue superior a los 100 ng/mL y sus valores fueron mayores para los pacientes con macroadenomas y para los del sexo masculino

Imuno-histoquímica hipofisária: metodologia e aplicaçäo / Immunohistochemistry of the pituitary gland: methodology and use

Os autores estudaram a aplicaçäo do método da peroxidase-antiperoxidase para detectar hormônio de crescimento (GH), prolactina (PRL) e corticotrofina (ACTH) em cortes de tecidos normais e de pituitária adenomatosa utilizando anticorpos de radioimunoensaio (RIA). Quatro glândulas pituitárias normais obtidas em autópsia e 21 adenomas pituitárias normais obtidos durante cirurgia de pacientes com acromegalia (16), hiperprolactinemia (2) e doença de Cushing (3) foram estudados. Anti-soros obtidos de carneiros imunizados com preparaçöes altamente purificadas de GH humano, prolactina ovina e ACTH porcino. Reatividades cruzadas de anti-GH com PRL, anti-PRL com GH e anti-ACTH 1-39 com ACTH 1-24 e ACTH 18-39 no RIA foram: 0,6%, 0,03%, 3,1% e 5,7% respectivamente. Detecçäo de cada hormônio foi bem sucedida em todos os cortes estudados de tecido pituitário normal. Melhores colaboraçöes foram obtidas usando diluiçöes primárias do anti-soro mais baixas que aquela rotineiramente empregadas em RIA. Anti-GH mostrou näo ter reatividade cruzada significante com PRL em cortes de tecido pituitário. Anti-PRL, contudo, mostrou alguma reatividade cruzada com GH, mas isto pôde ser evitado por absorçäo prévia do anti-soro com GH. Nenhuma diferença na coloraçäo pôde ser detectada fosse usado ou näo o anti-ACTH depois da imuno-absorçäo com ACTH 1-24. Todos os adenomas pituitários de pacientes acromegálicos mostraram células imunorreativas para GH, porém poucos adenomas tiveram todas ou mesmo a maioria das células positivas para GH. Todos os adenomas obtidos de pacientes com hiperprolactinemia e doença de Cushing coraram-se com anti-soro contra PRL e ACTH, respectivamente. Estes resultados validam o uso dos anti-soros mencionados na imuno-histoquímica da pituitária