RESUMO
Hypoxia-ischemia (HI) occurring in immature brains stimulates the expression of tissue-type plasminogen activator (tPA). Neuroserpin is a selected inhibitor of tPA in the central nerves system. However, the role that neuroserpin plays and the possible mechanisms involved during neonatal HI are poorly defined. In this study, an oxygen-glucose deprivation and reoxygenation (OGD/R) model was generated with cultured rat cortical neurons mimicking neonatal HI injury ex vivo, and an acute neuronal excitatory injury was induced by exposure to a high concentration of N-methyl-D-aspartic acid (NMDA). Cells received either neuroserpin or MK-801, an antagonist of the NMDA receptor, during OGD/R, and were incubated with or without neuroserpin after NMDA exposure. Cell viability and morphology were detected by a Cell Counting Kit-8 and immunohistochemical staining, respectively. TPA expression and activity were also assessed. We found that MK-801 alleviated injuries induced by OGD/R, suggesting an excitatory damage involvement. Neuroserpin provided a dose-dependent neuroprotective effect in both OGD/R and acute excitatory injuries by inhibiting the activity of tPA, without affecting neuronal tPA expression. Neuroserpin protected neurons against OGD/R even after a delayed administration of 3h. Collectively, our data indicate that neuroserpin protects neurons against OGD/R. mainly by inhibiting tPA-mediated acute neuronal excitotoxicity.
Assuntos
Animais , Feminino , Gravidez , Ratos , Hipóxia-Isquemia Encefálica/tratamento farmacológico , Neuropeptídeos/uso terapêutico , Fármacos Neuroprotetores/uso terapêutico , Serpinas/uso terapêutico , Ativador de Plasminogênio Tecidual/antagonistas & inibidores , Animais Recém-Nascidos , Sobrevivência Celular , Maleato de Dizocilpina/farmacologia , Hipóxia-Isquemia Encefálica/etiologia , Imuno-Histoquímica , N-Metilaspartato , Neurônios/efeitos dos fármacos , Neurônios/patologia , Ratos Sprague-Dawley , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase ReversaRESUMO
Objetivos: apresentar dados de revisão sobre os aspectos clínicos e fisiopatológicos das crises convulsivas neonatais associadas à hipóxia, as celulares e moleculares envolvidas neste processo e as evidências experimentais e clínicas da possível utilização terapêutica do neuropetídeo NAP nesta condição. Fontes de dados: para captação dos artigos utilizou-se a base de dados PubMed, inserindo os termos NAP, neonatal seizures e perinatal hypoxia. O critério de seleção de artigos foi a especificidade a partir do ano de 1990. Além disso, foram utilizados também artigos clássicos de anos anteriores. que se aplicavam ao propósito desta revisão. Síntese de dados: o risco de apresentar crises convulsivas está aumentado no período neonatal. Existem dificuldades no diagnóstico das crises, eficácia limitada do tratamento e potenciais efeitos adversos, dos anticonvulsivantes utilizados correntemente, no desenvolvimento cerebral dos recém-nascidos. Frente à urgência de novas estratégias para o tratamento das complicações resultantes de crises convulsivas neonatais associadas à hipóxia, peptídeo NAP torna-se um forte candidato, considerando sua ação neuroprotetora em diversos modelos animais em ensaios clínicos. Com estudos adicionais, o peptídeo NAP poderá ser empregado como novo agente terapêutico para prevenção da hipóxia cerebral e das sequelas das crises convulsivas em recém-nascidos. Conclusões: apesar dos indícios positivos da aplicação do peptídeo NAP em modelos animais de neuropatologias e de su sucesso preliminar em ensaios clínicos, são necessários pesquisas adicionais a fim de entender particularidades desse composto, tais como mecanismo de ação e viabilidade clínica para o tratatamento das crises convulsivas neonatais.