Planejamento de fármacos anti-T. cruzi: Síntese de compostos nitrofurânicos, avaliação da atividade biológica in vitro e estudos de relações estrutura-atividade / Design of anti-T. cruzi compounds: Synthesis of 5-nitrofuran derivatives, in vitro biological activity and study of structure-activity relationships

A doença de Chagas afeta cerca de 6 a 7 millhões de pessoas no mundo, principalmente América Latina. A busca de alternativas terapêuticas para esta enfermidade tem grande relevância para a sociedade, já que as opções atuais são limitadas, sendo disponível apenas o benznidazol (BZD) e nifurtimox. Os derivados nitroheterocíclicos são considerados compostos bioativos com número crescente de estudos na comunidade científica contra seu agente etiológico, o Trypanosoma cruzi. Neste sentido, o presente trabalho tem por objetivo a identificação de derivados do 5-nitrofurano com atividade frente a diferentes cepas do T. cruzi, assim como estudar possíveis modo de ação desta classe de compostos. Esta investigação envolve estudos computacionais com o propósito de construir modelos quantitativos de relações estrutura-atividade (QSAR multivariado) que possam auxiliar na previsão de novas estruturas com perfil farmacológico otimizado. No presente trabalho foram realizadas as etapas de planejamento, síntese e identificação de 36 compostos com resultados satisfatórios quanto à identificação estrutural, pureza e rendimento, que foi da ordem de 70%. A determinação da atividade anti-T. cruzi in vitro dos compostos obtidos foi realizada frente às cepas Silvio X10 cl1, Y, Bug 2149 cl10 e Colombiana na forma epimastigota do parasito. A maioria dos compostos analisados apresentou maior capacidade de inibição de crescimento do parasito, comparado ao BZD: Silvio X10 cl1 - IC50 = 29,16 ±2,90 µM, Y - IC50 = 40,40 ±3,37µM, Bug 2149 cl10 - IC50 = 30,63 ±3,21 µM, Colombiana - IC50 = 47,91 ±4,96 µM. O composto mais ativo (BSF-35) apresentou os seguintes valores: Silvio X10 cl1 - IC50 = 3,17 ±0,32 µM, Y - IC50 = 1,17 ±0,12 µM, Bug 2149 cl10 - IC50 = 1,81 ±0,18 µM e Colombiana - IC50 = 3,06 ±0,23 µM. Foram realizados cálculos de propriedades moleculares das estruturas tridimensionais dos compostos, seguido pela análise exploratória de dados por análise de agrupamentos hierárquicos (HCA) e análise de componentes principais (PCA), possibilitando o reconhecimento de padrões do conjunto. Considerando esta análise prévia, foram obtidos modelos QSAR com abordagem multivariada, aplicando algorítmo OPS e método de regressão por quadrados mínimos parciais, PLS. Os melhores modelos gerados foram obtidos considerando os compostos benzenos substituídos para as quatro cepas estudadas. Os descritores que mais influenciaram na análise foram o ClogP (coeficiente de partição) e cargas CHELPG. Considerando as informações obtidas, foram planejados e sintetizados quatro novos compostos com objetivo de obter compostos mais ativos e validar os modelos QSAR. Estes compostos apresentaram alta atividade frente a forma epimastigota das quatro cepas estudadas. Os compostos mais ativos foram avaliados quanto a citotoxicidade frente células LLC-MK2 e apresentaram seletividade até 25 vezes superior ao BZD. Estudos in vitro frente a forma amastigota da cepa Y em células U2OS foram realizados com metodologia fenotípica de análise de alto conteúdo (HCA') e os compostos apresentaram atividade até 64 vezes superior ao BZD e com seletividade de até 50 vezes superior a este fármaco. Quanto à determinação da atividade dos compostos frente às enzimas tripanotiona redutase (TcTR) e glutationa redutase (GR), os compostos analisados não apresentaram atividade relevante, indicando não ser este o mecanismo desta classe de compostos. Com finalidade de explorar outro possível mecanismo de ação dos compostos 5-nitrofurânicos, foi realizada a análise de potencial de redução da membrana mitocondrial, porém a morte parasitária não foi atribuída à despolarização da membrana em estudos simultâneos com iodeto de propídio

Chagas disease affects approximately 6-7 millions people worldwide, especially Latin America. The search for therapeutic alternatives for this disease is of great relevance to society, as current options are limited and there are only two available drugs: benznidazole (BZD) and nifurtimox. The nitroheterocyclic derivatives are considered bioactive compounds with increasing number of studies in the scientific community against its etiologic agent, Trypanosoma cruzi. In this sense, this work aims to identify derivatives of 5-nitrofuran with activity against different strains of T. cruzi, and to study possible mode of action of this compounds. This research involves computational studies to obtain models of quantitative structure-activity relationships (QSAR multivariate) that can help predict new structures with optimized pharmacological profile. In this work were carried out the design, synthesis and identification of 36 compounds with satisfactory results regarding the structural identification, purity and yield (approximately 70%). The determination of anti-T. cruzi activity in vitro of the compounds obtained was carried out with Silvio X10 cl1, Y, Bug 2149 CL10 and Colombiana strains of epimastigote form of the parasite. Most of the compounds examined showed greater capacity of growth inhibition of the parasite compared to the BZD (Silvio X10 CL1 - IC 50 = 29.16 ± 2.90 µM, Y - IC50 = 40.40 ± 3,37µM, 2149 CL10 Bug - IC 50 = 30.63 ± 3.21 µM, Colombiana - IC 50 = 47.91 ± 4.96 µM). The most active compound (BSF-35) showed the following values: Silvio X10 cl1 - IC 50 = 3.17 ± 0.32 uM, Y - IC 50 = 1.17 ± 0.12 µM, Bug 2149 CL10 - IC50 = 1, 81 ± 0.18 µM and Colombiana - IC 50 = 3.06 ± 0.23 µM. Calculations were performed for the molecular properties of three-dimensional structures of the compounds, followed by exploratory data analysis by hierarchical cluster analysis (HCA) and principal component analysis (PCA), allowing the recognition of the set. Considering this preliminary analysis were obtained QSAR models with multivariate approach, using OPS algorithm and regression method of partial least squares, PLS. The best generated models were obtained considering the benzyl substituted compounds for the four strains. The descriptors that most influenced the analysis were ClogP (partition coefficient) and CHELPG charges. Considering the information obtained, four new compounds were designed and synthesized to obtain more active compounds and validate QSAR models. These compounds showed high activity against epimastigote form of the four strains studied. The most active compounds were evaluated for cytotoxicity against LLC-MK2 cells and the compounds selectivity values were up to 25 times higher than BZD. In vitro studies against amastigote form of the Y strain in U2OS cells were performed with phenotypic method of high content analysis (HCA') and the compounds showed activity to 64 times higher than BZD and selectivity of up to 50 times. The activity of the compounds against trypanothione reductase enzymes (TcTR) and glutathione reductase (GR) showed no significant activity, indicating that this is not the mechanism of this class of compounds. In order to exploit another possible mechanism of action of 5-nitrofuran derivatives, analysis reduction of mitochondrial membrane potential was held, however the cell death was not attributed to membrane depolarization in simultaneous studies with propidium iodide

Chromatographic detection of nitrofurans in foods of animal origin / Detecção cromatográfica de nitrofuranos em alimentos de origem animal

Nitrofurans are antibacterials banned in livestock by different countries due to its relationship with the production of carcinogenic metabolites. Several studies have been conducted to find the best methodology to identify these residues. Te objectives of this review work were to show the risk of nitrofuran metabolites (furazolidone; nitrofurazone; nitrofurantoin, furaltadone and nifursol); to explain the application of liquid chromatography and mass spectrometry to determine the presence of these residues in foods of animal origin; and, finally, to report some methodologies that were recently used in different foods of animal origin.(AU)

Nitrofuranos são antibacterianos proibidos na criação de animais por diferentes países devido a sua relação com a produção de metabolitos carcinogênicos. Vários trabalhos de pesquisa têm sido desenvolvidos para encontrar a melhor metodologia que possa identificar esses resíduos. O presente trabalho de revisão teve como objetivos mostrar o risco dos metabolitos dos nitrofuranos (furazolidona, nitrofurazona, nitrofurantoina, furaltadona e nifursol); explicar a aplicação da cromatografia líquida e da espectrometria de massas para determinar a presença desses resíduos em alimentos de origem animal; e, finalmente, relatar algumas metodologias usadas recentemente em alimentos de origem animal.(AU)

Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for determination of the furaltadone etabolite, 3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone (AMOZ) in animal tissues / 生物医学与环境科学（英文）

<p><b>OBJECTIVE</b>To determine 3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone (AMOZ) residues released from protein bound AMOZ in animal tissues.</p><p><b>METHODS</b>Polyclonal and monoclonal antibodies were produced in this study. A rapid, sensitive, and specific competitive direct enzyme-linked immunosorbent assay (cdELISA) was developed.</p><p><b>RESULTS</b>Rabbit polyclonal antibodies were used in the optimized cdELISA method, and exhibited negligible cross-reactivity with other compounds structurally related to AMOZ. The IC(50) of the polyclonal antibody was 0.16 ng/mL. The method limit of detection in four different types of animal and fish tissues was less than 0.06 μg/kg. Recoveries ranged from 80% to 120% for fortified samples with the coefficient of variation values less than 15%. The results of the cdELISA method were in good agreement with the results from an established liquid chromatography-tandem mass spectrometry confirmatory method used for AMOZ residues.</p><p><b>CONCLUSION</b>The cdELISA method developed in the present study is a convenient practical tool for screening large numbers of animal and fish tissue samples for the the detection of released protein bound AMOZ residues.</p>

[Clinical, epidemiologic and bacteriological characteristics of urinary tract infections due to staphylococcus saprophyticus in the central part of Tunisia]

We assess the clinical, epidemiologic and bacteriological aspects of urinary tract infections due to S. saprophyticus through a sample collected in the central part of Tunisia. Retrospective study, related to 92 strains of S. saprophyticus, isolated among positive urinary specimens in 2006. Considered data were: sex, age, original departments, symptoms, type of urinary tract infection, diagnosis date and susceptibility of strains to antibiotics. Patients are young women in 98% [average age: 31.5 years] with cystitis in 99%. They are outpatients in 90%. S. saprophyticus represents 2.8% of all uropathogens; it is the first cocci with positive Gram [28.2%]. Any seasonal variation is noticed. S. saprophyticus has shown higher susceptibility to antibiotics than other staphylococci; cotrimoxazole, fluoroquinolons and nitrofurans represent the best treatment. S. saprophyticus is responsible of cystitis in young women. There is no seasonal variation in our area. This community staphylococci is very susceptible to antibiotics

Toxicidade de fármacos nitrofurânicos / Toxicity of nitrofuran drugs

Durante o planejamento estrutural de novos fármacos, é possível prever a influência de grupamentos específicos na atividade farmacológica. Entre estes, encontra-se o grupo nitro, que possui potencial atividade antimicrobiana, estando presente em diversos fármacos como o metronidazol, nitrofural, furazolidona, oxamniquina, cloranfenicol, entre outros. Também, a introdução do grupo nitro na molécula pode alterar as propriedades físico-químicas e eletrônicas da substância, estando presente em fármacos de outras classes terapêuticas como anti-úlcera, ansiolítico, antiinflamatório. Entretanto, restrições têm sido apontadas para o planejamento de novos fármacos contendo este grupo, devido à toxicidade relacionada. Este estudo trata-se da revisão sobre a toxicidadede compostos nitrofurânicos, bem como os possíveis mecanismos e a utilização do método de latenciação na diminuição desta toxicidade.

Antibacterianos de acción sistémica, parte II: otros grupos de antibióticos / Systemic antibacterial drugs, part II: other groups of antibiotics

Se presenta la segunda parte de una revisión bibliográfica sobre los antibacterianos de acción sistémica, la cual incluye grupos de antibióticos tan importantes como aminociclitoles, aminoglucósidos, diaminopirimidinas, estreptograminas, fosfomicinas, fusidanos, glicopéptidos, lincosamidas, macrólidos, nitrofuranos, nitroimidazoles, polipéptios, quinolonas y rifamicinas

Relacoes quantitativas entre a estrutura quimica e a atividade antimicrobiana de analogos a nifuroxazida / Quantitative relationships between chemical struture and antimicrobial activity of nifuroxazide analogues

Com o objetivo de estudar as relacoes quantitativas entre a estrutura quimica e a atividade antimicrobiana de analogos a nifuroxazida (5-nitro-2-furfurilideno 4-hidroxi benzidrazida), prepararam-se quatorze 5-nitro-2-furfurilideno benzidrazidas 'X ind.3','X ind.4','X ind.5'-substituidas em que 'X ind.3' e 'X ind.5' = H e 'X ind.4' = 'NO ind.2',Br,Cl,H,'CH ind.3','OCH ind.3',OH,'NH ind.2',CO'CH ind.3',O'C ind.2H ind.5','CF ind.3',N('CH ind.3)ind.2','SO ind.2NH ind.2' e 'X ind.3','X ind.4','X ind.5' = O'CH ind.3'. Nove entre os quatorze compostos obtidos ainda nao estao descritos na literatura. Os compostos obtidos foram identificados e/ou caracterizados por seus espectros de I.V.,'RMN POT.1'H e RMN 'ANT.POT.13C', e seus graus de pureza determinados pelas respectivas analises elementares de C, H e N e pelos intervalos de fusao. Determinaram-se os valores de frequencia de absorcao do grupo carbonila na regiao do I.V., em DMSO, como medida de sua polaridade. Este parametro foi utilizado como medida do efeito eletronico dos grupos substituintes estudados. Determinou-se tambem o coeficiente de particao de cinco compostos atraves do metodo de Shake-flask, utilizando-se para particao, o sistema 1-octanol/tampao fosfato, obtendo-se excelentes correlacoes entre os valores experimentais e calculados. Determinou-se a concentracao minima inibitoria, MIC, dos compostos obtidos frente a cepa ATCC 25923 de S.aureus, utilizando-se o Log1/Mol como medida da potencia antimicrobiana. O estudo das relacoes quantitativas entre a estrutura quimica e a atividade antimicrobiana, QSAR, foi realizada atraves da aplicacao do metodo stepwise aos valores de Log1/Mol em funcao de parametros estruturais, experimentais e de literatura, relacionados com os efeitos hidrofobico, eletronico e de polarizabilidade dos grupos substituintes

Comportamento da parasitemia avaliada pelo método de Strout modificado em chagásicos agudos em tratamento / Changes in parasitemia evaluated using the modified Strout method in patients with acute Chagas' disease under treatment

Em 18 pacientes com doença de Chagas aguda foi semiquantificada a parasitemia, pelo método de Strout modificado, antes e durante o tratamento. Antes da terapêutica a parasitemia variou entre 1 e 104 tripanossomos, e após o nício do tratamento a parasitemia foi lida repetidamente com um intervalo, na maioria dos casos, entre dois e cinco dias, até a negativaçäo. A dose inicial dos medicamentos foi de 10 a 15 mg/kg/dia de Nifurtimox para sete pacientes, e 10 a 20 mg/kg%dia Benzonidazol para onze indivíduos. Após início do tratamento com Nifurtimox um paciente ficou o mínimo de cinco e dois o máximo de 23 dias com parasitemia enquanto com o Benzonidazol um paciente peraneceu o máximo de 15 dias com parasitemia patente. O Benzonidazol baixou a parasitemia mais rapidamente que o Nifurtimox

Efecto de quinonas y nitrofuranos sobre Trypanosoma mega y Crithidia fasciculata / Effect of quinones and nitrofurans on Trypanosoma mega and Crithidia fasciculata

La valoración in vitro de tripanocidas activos sobre Trypanosoma cruzi es el primer paso para el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos contra la enfermedad de Chagas. Para verificar si una información equivalente puede lograrse con organismos no patógenos, se estudió la acción de varios tripanocidas de t. cruzi sobre T. mega y Crithidia fasciculada. Las drogas se ensayaron sobre el crecimiento de los protozoarios que se midió por la turbiedad de la suspensión celular en medio de cultivo líquido. Una serie de quinonas, incluyendo quinonas lipofílicas, lapachonas, quinina-iminas, benzoquinonas, un quinol (miconidina) y nitrofuranos (nifurtimox y análogos derivados del grupo (5-nitro-2-furfurilideno)-amino (grupo NF) inhibieron el crecimiento de los organismos, especialmente el de T. mega, con I50 menores de 5 micronM, para los compuestos mas activos. La sensibilidad de T. mega fue similar a la de T. cruzi y significativamente mayor que la de C. fasciculata. El cultivo de muestras de T. mega, preincubados con las mismas drogas,d emostró efectos irreversibles con los NF-derivados del pirazol, imidazol, indazol y benzimidazol pero no con el nifurtimox. En iguales condiciones, C. fasciculata fue afectada solamente por la ß-lapachona y una naftoquinona-imina. Estos resultados califican a T. mega como un modelo adecuado para el ensayo inicial de quimioterápicos anti-chagásicos, como lo son C. fasciculata y T. brucei para los tripanosomas africanos

Enfermedad de las aletas de Rhamdia sapo: aislamiento de los agentes etiológicos e infección experimental / Fins disease of Rhamdia sapo: isolation of pathogenic organisms and experimental infection

Durante la cría intensiva de juveniles de Rhamdia sapo (bagre negro) se desarrolló una epizootia comparable con la enfermedad de las aletas. Se aisló Aeromonas Hydrophila y Pseudomonas aeruginosa. La enfermedad fue controlada con baños diarios de 1 ppm de Furanace. Luego se reprodujo experimentalmente la enfermedad, concluyendo que la misma es la resultante de la itneracción de condiciones desfavorables del medio ambiente (disminución del oxígeno disuelto, aumento de los sólidos en suspensión), el estado del huésped y la presencia de las bacterias citadas

Inhibición de la glutation reductasa por nifurtimox y otros derivados del 5-nitrofurano / Glutathione reductase inhibition by nifurtimox and related nitrofurans

Derivados del 5-nitrofurano portadores de heterociclos nitrogenados insaturados inhibieron la GR de hígado, corazón y riñoz de rata, con mayor eficiencia que portadores de hetereciclos saturados o de grupos de estructura acíclica , como el nifurtimox, la nitrofurazona y el ácido 5 nitro-2-furoico. La inhibición muestra cinética acompetitiva respecto a los sustratos NADPH y GSSG y no implica un ciclo redox del grupo nitro o diversión de electrones al oxígeno, con formación de oxi-radicales. Ell 2-nitroimidazol y su derivado el benznidazolm el 5-nitroindol y el cloranfenicol (derivado del nitrobencilo), no inhibieron la GR. La GP, enzima asociada fisiológicamente a la GR para la desintoxicación de hidroperóxidos no fue inhibida por los nitrofuranos activos sobre la GR, cuando la disponibilidad de GSH fue suficiente para la actividad de la GP. Cuando la actividad de la GR fue limitante de la concentración de GSH, la actividad GP del sistema fue inhibida

Nifuroxazida en el tratamiento de la diarrea aguda bacteriana en niños: 50 casos / Nifuroxazide for a treatment of acute bacteria diarrhea in children: 50 cases

Se reportan los resultados clínicos, terapéuticos y bacteriológicos en 50 niños de un mes a 12 años de edad tratados con Nifuroxazida para su diarrea aguda de origen bacteriano comprobado. La curación bacteriológica fue el 100 por ciento para 21 pacientes portadores de E. Coli entero patógena, en un lapso de 3 días despúes de iniciado el tratamiento. La mejoría clínica se inició al tercer día en todos los casos y sólo 4 pacientes tuvieron deposiciones anormales, aunque menos fecuentes al sétimo día. De 14 pacientes, portadores de Shigella, el 100 por ciento negativizó su cultivo al tercer día. La mejoría tuvieron deposiciones anormales, aunque menos frecuentes al sétimo día. El 8 pacientes en quienes se cultivó el Campilobacter fetus jejuni, sólo en uno se obtuvo buen resultado al tercer día. El resto requirío de 7 días de tratamiento para lograr la cura bacteriológica. En estos pacientes se utilizó el doble de la dosis recomendada para la edad. Hubo mejoría clínica desde el tercer día y sólo uno mantuvo sintomatología diarreica al sétimo día. De los 7 pacientes con Klebsiella, sólo uno negatizó su coprocultivo en el sétimo día, en el resto fue necesario utilizar antibióticos para negativizarlo. Se discute si la Klebsiella es entero patógena y causante de la diarrea. La tolerancia a la droga fue excelente, no se presentaron casos de lesiones cutáneas y por el contrario, sintomatología previa como anorexia, vómitos y dolor abdominal mejoraron con el avance del tratamiento. Se concluye que la nifuroxazida es un producto eficaz, seguro y muy bien tolerado para el tratamiento de la enfermedad diarreica aguda de origen bacteriano.

Nifuroxazida como tratamiento para la diarrea bacteriana en pacientes pediátricos / Nifuroxazide in the treatment of bacterial diarrhea in pediatric patient

Para comprobar la eficacia clínica de nifuroxazida para el tratamiento de la diarrea ocasionada por bacterias, se estudiaron 40 niños; 14 varones y 26 mujeres, con edades entre 25 días y 13 años. A todos los pacientes se les realizó estudio clínico completo y valoración mediante coprocultivo. Las bacterias aisladas en mayor proporción fueron Escherichia, Salmonella y Shigella. El medicamento se administró a razón de 440 mg en menores de seis meses, de seis meses a seis años 660 mg y mayores de seis años 880 mg en forma de suspensión por vía bucal. Las manifestaciones clínicas desaparecieron en las primeras 24 horas en el 50% de los casos y se redujeron las evacuaciones de ocho a dos como promedio. En el 60% de los pacientes estudiados los signos y síntomas desaparecieron en su totalidad, al cuarto día de tratamiento, y no se presentaron efectos indeseables