RESUMO
Clitoria guianensis and Ouratea spectabilis, found in the Brazilian Cerrado, are used in folk medicine, despite the few chemical and biological studies reported in the literature. The present study aims to investigate the toxicity and effect of extracts from both species on the microcrustacean Artemia salina, and to determine the chemical composition of the hexane extract of O. spectabilis leaves and the EtOAc fraction of C. guianensis leaves. Kaempferitrin, a flavonoid isolated from of the EtOAc fraction of C. guianensis leaves, was identified by chemical analysis. Analysis of the hexane extract of O. spectabilis leaves using gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) suggested the presence of twenty-five known substances. The Hex, EtOAc, and EtOH crude extracts of C. guianensis leaves exhibited high and moderate toxicity against Artemia salina, with median lethal dose values (LD50) of 43.7, 25.4, and 233.4 mg.L−1, respectively. The acetone extract of O. spectabilis leaves showed moderate toxicity against Artemia salina with an LD50 value of 115.13 mg.L−1.
Assuntos
Artemia , Folhas de Planta , Clitoria/toxicidade , Clitoria/química , Ochnaceae/toxicidade , Ochnaceae/químicaRESUMO
La diabetes mellitus afecta a muchas personas alrededor del mundo, por lo que la comunidad científica está interesada en la búsqueda de nuevas drogas de origen sintético o natural para el tratamiento de la misma. En el presente trabajo se utilizaron cuatro plantas empleadas tradicionalmente en el tratamiento empírico de la diabetes y se realizó la síntesis total de los productos naturales α- yß- pentagaloilglucosa, ácido elágico y sus análogos. Las plantas estudiadas provienen de los géneros: Ouratea polyantha Engl. (Ochnaceae), Capraria biflora L. (Schrophulariaceae), Cassia fruticosa Mill. (Fabaceae) y Ruellia tuberosa L. (Acanthaceae). De la planta O. polyantha Engl., se aisló por HSCCC, e identificó por técnicas espectroscópicas el flavonoide rutina (OpC-4), la biflavona agathisflavona (OpD-5, OpB-M1), el ácido 4-hidroxibenzóico (OpD-10) y un nuevo megastigmano identificado como (6R,9S)-6'-(4''-hidroxibenzoil)-roseósido (OpD-9). Adicionalmente, se obtuvieron fracciones enriquecidas en lupeol y ß-sitosterol (OpBHex-FrCHCl3), agathisflavona (OpA, OpG) y rutina (OpA, OpC, OpG, OpH) las cuales fueron identificadas por CCF y HPLC comparando con muestras auténticas. Se evaluó el contenido de flavonoides totales como % de rutina en las fracciones OpC, OpG y OpH, por ensayos colorimétricos con AlCl3, obteniendo valores de: 7,08 ± 0,04; 31,9 ± 1,0; y 12,4 ± 0,3 %, respectivamente. De la planta C. fruticosa Mill., se aisló e identificó, por cromatografía flash y técnicas espectroscópicas el ester esteriodal ß-sitosterol palmitatoâ¢1/2â¢H2O (CfRS-3) y los flavonoides glicosilados kaempferol 3-O-rutinósido (nicotiflorin, CfH-1) y kaempferol 3-O-(2''-ramnosil)rutinósido (clitorin, CfH-2). Adicionalmente, se obtuvieron fracciones enriquecidas ß-sitosterol (CfB), y en los flavonoides nicotiflorin y clitorin (CfF, CfYY). De la planta C. biflora L., se aisló e identificó el glicosido manitol (CbE), el cual fue purificado por múltiples procesos de recristalización (CbM-2) y caracterizado por sus propiedades físicas y por la obtención de su derivado semisintético hexaacetilmanitol (CbM-2Ac). Adicionalmente, se obtuvieron fracciones enriquecidas en ß-sitosterol (CbI-FrCHCl3), azúcares (CbG, CbO), porfirinas tipo feoforbido-a (CbK y CbL) y terpenos aromáticos (CbK, CbF, CbN, CbP). De la planta R. tuberosa L., se obtuvieron fracciones enriquecidas en lupeol, betulina y ß-sitosterol (RtB, RtR-1, RtR-K), azúcares (RtI, RtR-G) polifenoles (RtJ, RtQac, RtSac, RtR-Mac, RtR-Nac) y terpenos aromáticos (RtQorg, RtSorg, RtR-Morg, RtR-Norg). En RtR-K se cuantificó por densitometría óptica el contenido porcentual de: lupeol 37,3 ± 0,8; ß-sitosterol 15,6 ± 0,6 y betulina (4,3 ± 0,3) % respectivamente. Los flavonoides aislados agathisflavona, nicotiflorin y clitorin mostraron inhibición significativa sobre el sistema enzimático G-6-Pasa microsomal cuyos valores fueron 63, 60 y 46 % respectivamente. Por otra parte, las fracciones terpenoidal (RtR-K) y porfirínicas (CbK y CbL) presentaron una inhibición moderada sobre la G-6-Pasa con 45, 25 y 27% respectivamente. Entre los productos sintetizados, los anómeros α- y ß-pentaacilglucosa (PAG, PBG y PGG-Bn) no presentaron actividad biológica significativa (<10%), lo cual indica claramente que el grupo galoilo es fundamental para la actividad biológica asociada a los taninos hidrolizables α-PGG y ß-PGG. A concentraciones finales de 50 µM, estos compuestos presentaron un porcentaje de inhibición de 77 y 79 % respectivamente con una significancia estadística importante (p<0,00006). Por otra parte, el ácido elágico (AE) sintetizado presentó un porcentaje de inhibición de 63% cuyo IC50 fue 76,50 µM, su derivado acetilado (AAcE) mostro un IC50 73,5 µM, mientras que, el derivado alquilico (AMeE) fue inactivo frente a la G-6-Pasa. Adicionalmente, AE y AAcE no mostraron actividad inhibitoria de la absorción intestinal de glucosa.
Assuntos
Humanos , Cassia/química , Acanthaceae/química , Ochnaceae/química , Diabetes Mellitus , Cromatografia , Etnobotânica , Compostos FitoquímicosRESUMO
Chromatographic fractionation of the organic extract from leaves of Ouratea multiflora afforded the flavone dimers heveaflavone, amentoflavone-7'',4''''-dimethyl eter, podocarpusflavone-A and amentoflavone. Their structures were elucidated from spectral data, including 2D-NMR experiments of the natural substances. Biological activities of all isolates were evaluated, using antimicrobial assay against Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, cytotoxicity assay against mouse lymphoma (L5178) and KB cell lines, TLC screening for acetylcholinesterase inhibitors and antioxidant activity measured by DPPH test.
O fracionamento cromatográfico do extrato orgânico das folhas de Ouratea multiflora forneceu os flavonóides diméricos, heveaflavona, 7'',4''''-dimetilamentoflavona, podocarpusflavona-A e amentoflavona. Suas estruturas foram elucidadas com base nos dados espectrais, incluindo experimentos bidimensionais de RMN, das substâncias naturais. A atividade antibiótica de todos os isolados foi avaliada, usando-se as bacterias Gram-positivas Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis. Teste de citotoxicidade nas linhagens de linfoma de ratos (L5178) e KB também foram conduzidos para avaliar os extratos e os flavonóides isolados. a triagem biológica para a avaliação de atividade antioxidante e inibidora de acetil colinesterase foram conduzidas pela técnica da bioautografia com DPPH e teste pelo teste de Ellman respectivamente.