Application of capillary electrophoresis to the simultaneous determination and stability study of four extensively used penicillin derivatives

The applicability of capillary electrophoresis for the analysis of four extensively used penicillin derivatives (benzylpenicillin, ampicillin, amoxicillin, oxacilllin) has been studied. Because of structural similarities, the electrophoretic behavior of these derivatives is very similar; consequently an efficient separation using the conventional capillary zone electrophoresis is hard to be achieved. Their simultaneous separation was solved by using micellar electrokinetic capillary chromatography, the separation being based on the differential partition of the analytes between the micellar and aqueous phase. Using a buffer solution containing 25 mM sodium tetraborate and 100 mM sodium dodecyl sulfate as surfactant, at a pH of 9.3, applying a voltage of + 25 kV at a temperature of 25 °C, we achieved the simultaneous separation of the studied penicillin derivatives in less then 5 minutes. The separation conditions were optimized and the analytical performance of the method was evaluated in terms of precision, linearity, limit of detection, and quantification. Also, a simple capillary zone electrophoresis method was applied to study the stability of the studied penicillin derivatives in water at different temperatures, using ciprofloxacin hydrochloride as internal standard. It was observed that the extent of the hydrolysis of penicillins in water is highly dependent on the time and also temperature.

Estudou-se a aplicabilidade de electroforese capilar para a análise de quatro derivados de penicilina (benzilpenicilina, ampicilina, amoxicilina, oxacilina) amplamente utilizados. Em razão das semelhanças estruturais, o comportamento electroforético destes derivados é muito semelhante e, por conseguinte, a separação eficaz utilizando a electroforese capilar de zona convencional é difícil de ser efetuada. A separação simultânea foi realizada por cromatografia capilar electrocinética micelar, que se baseia na partição diferencial entre os analitos na fase micelar e aquosa. Utilizando-se solução tampão contendo 25 mM de tetraborato de sódio e 100 mM de dodecil sulfato de sódio, como agente tensioativo, com pH de 9,3, voltagem de +25 kV, à temperatura de 25 °C, obteve-se a separação simultânea das penicilinas estudadas em menos de 5 minutos. As condições de separação foram otimizadas e o desempenho do método analítico foi avaliado em termos de precisão, linearidade, limite de detecção e de quantificação. Além disso, aplicou-se método de electroforese capilar de zona simples para estudar a estabilidade de penicilinas em água a diferentes temperaturas, utilizando cloridrato de ciprofloxacino como padrão interno. Estabeleceu-se que o grau de hidrólise de penicilinas em água é altamente dependente do tempo e também da temperatura.

Penicillium species present in Uruguayan salami / Especies de Penicillium presentes en salamines uruguayos

The surface coverage of certain dry fermented sausages such as Italian salami by some species of Penicillium provides their characteristic flavor and other beneficial properties. One of them is the protective effect by means of a uniform film of white mold against undesirable microorganisms. The aim of this work was to identify and to isolate the fungal species present in mature Italian type of salami and to evaluate if it is possible to obtain some of them as starters. In addition, the effects of temperature (14 °C and 25 °C), water activity (a w) (0.90, 0.95 and 0.995) and 2.5 % sodium chloride (NaCl) on fungal growth were determined. Similarly, the proteolytic and lipolytic activity and the ability to produce toxic secondary metabolites were evaluated in order to characterize some possible starter strain. All species found belong to the genus Penicillium, including a performing starter as Penicillium nalgiovense and some potentially toxicogenic species. All the strains showed a higher growth rate at 25 °C. The production of extracellular proteases and lipases was significantly higher at 25 °C than at 14 °C with and without sodium chloride. Only Penicillium expansum produced patulin. On the other hand, Penicillium griseofulvum was the only species that produced ciclopiazonic acid but none of the strains produced penicillin. The species present on salami, Penicillium nalgiovense, Penicillium minioluteum, Penicillium brevicompactum and Penicillium puberulum were unable to produce any of the evaluated toxins. These findings suggest that some fungal isolates from the surface of salami such as P. nalgiovense are potentially useful as starters in sausage manufacture.

La cobertura de la superficie de los embutidos fermentados secos -como el salamín tipo italiano- por algunas especies de Penicillium les proporciona un sabor característico y otras propiedades beneficiosas. Una de ellas es el efecto de protección contra microorganismos indeseables, al formarse una película blanca uniforme de mohos. El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar los hongos filamentosos encontrados en la superficie de salamines tipo italiano y evaluar la posibilidad de obtener especies para utilizarse como cultivos iniciadores. Se determinó el efecto de la temperatura, la actividad de agua y del cloruro de sodio sobre el crecimiento fúngico. La actividad proteolítica y lipolítica y la capacidad de producir metabolitos secundarios tóxicos fueron evaluadas con el fin de caracterizar algunos posibles cultivos iniciadores. Todas las cepas fúngicas aisladas e identificadas correspondieron a especies del género Penicillium, algunas benéficas, como Penicillium nalgiovense, y otras potencialmente toxicogénicas. Estas cepas tuvieron diferentes tasas de crecimiento en respuesta a las diferentes condiciones de cultivo. Todas las cepas mostraron mayor crecimiento a 25 °C. La producción de proteasas y lipasas extracelulares fue significativamente mayor a 25 °C que a 14 °C. Penicillium expansum fue la única especie que produjo patulina y Penicillium griseofulvum fue la única que produjo ácido ciclopiazónico. Ninguna de las especies produjo penicilina. Penicillium nalgiovense, Penicillium minioluteum, Penicillium brevicompactum y Penicillium puberulum no produjeron ninguna de las toxinas evaluadas. Estos resultados sugieren que algunos aislamientos fúngicos, como P. nalgiovense, son potencialmente útiles como cultivos iniciadores en la fabricación de estos productos.

Comparación de la biodisponibilidad de un producto test conteniendo sultamicilia comprimidos de 375 mg de liberación inmediata de laboratorios Genven (Leti, S. A. V.) contra la sultamicilina de referencia (unasyn ®) tabletas de 375 mg de laboratorios Pfizer, luego de administrar una dosis única en voluntarios sanos / Comparison of the bioavailability of a test product containing sultamicillin tablets of 375 mg immediate release laboratorios Genven (Leti, SAV) against sultamicillin reference (Unasyn ®) 375 mg tablets of Pfizer, after single dose administration in healthy volunteers

El objetivo del estudio es evaluar la biodisponibilidad comparada entre dos formulaciones de liberación inmediata de Sultamicilina 375 mg, luego de una administración única, en un mismo grupo de voluntarios sanos. El estudio se realizó en 12 voluntarios sanos de ambos sexos. Los voluntarios recibieron de acuerdo al esquema asignado por la aleatorización y en dos períodos, una dosis única por vía oral de un comprimido de una formulación conteniendo 375 mg de Sultamicilina de Laboratorios Genven (Leti, S.A.V.), o una tableta del producto de referencia Unasyn®, de Laboratorios Pfizer. La administración se realizó en ayuno de 10 horas de duración y se mantuvo por dos horas después de suministrado el fármaco. Entre ambos períodos se realizó un lavado de tres días. Los voluntarios que recibieron el producto test en el primer período recibieron el producto de referencia y viceversa. Durante cada período del estudio se obtuvieron doce muestras de sangre: antes de la dosis (tiempo cero), a los 20, 40, 60, 80, 100, 120, 150, 180, 240, 300 y 360 minutos. Para ampicilina las variables farmacocinéticas fueron: formulación test Cmax 2.488.52+/-730.65 ng/mL y para ampicilina referencia 2.392,78+/-931,12 ng/mL; para las AUC0-6 fueron de 169.495,82+/-57506,34 ng/mL/h para la formulación test y de 178.688,42+/-85.534,02 ng/mL/h para la formulación de referencia, para la AUC0-∞ los valores resultante fueron 171.230+/-57.601,31 ng/mL/h para la formulación test y de 179.553,73+/-85.966 ng/mL/h para la formulación de referencia. Para el sulbactam las variables farmacocinéticas fueron: formulación test, Cmax: 2.176,66+/-711,57 ng/mL y para la referencia 2.097,70+/-486,17 ng/mL; las AUC0-6 fueron de 175.924,62+/-45.652,94 ng/mL/h para la formulación test y de 186.342,94+/-47.001,80 ng/mL/h para la formulación de referencia, para la AUC0-∞ los valores resultantes...

Objective: Evaluated the comparative bioavailability of two formulations of immediate release 375 mg Sultamicillin after a single administration in the same group of healthy volunteers.Methods: The study was conducted in 12 healthy volunteers of both sexes. The volunteers were assigned according to the randomization scheme and two periods, a single oral dose of one tablet of a formulation containing 375 mg of Sultamicillin Genven (Leti, S.A.V.) Laboratories, or the reference product Unasyn®, Pfizer Laboratories. The administration was carried out in fast of 10 hours and continued for two hours after administeringthe drug. Between the two periods was a washout period of three days. Volunteers who received the test product in the first period will receive the reference product and vice versa. During each period of twelve samples were obtained from blood: pre-dose (time zero) 20, 40, 60, 80, 100, 120, 150, 180, 240, 300 and 360 minutes.Results: For ampicillin pharmacokinetic parameters were Cmax test formulation � 2.488.52+/-730.65 ng/mLand referenceformulation 2.392,78+/-931.12 ng/mL; for AUC0-6 were 169.495,82+/-57.506,34 ng/mL/h for the test formulation and � 178.688,42+/-85.534,02 ng/mL/hfor the reference formulation,for the AUC0-∞ the resulting values were 171.230+/-57.601,31 ng/mL/h for the test formulation and 179.553,73+/-85.966 ng/mL/h for the reference formulation.For sulbactam pharmacokinetic parameters were: Cmax: test 2.176,66+/-711.57 ng/mL and reference 2.097,70+/-486.17 ng/mL; the AUC0-6 were 175.924,62+/-45.652,94 ng/mL/h for the test formulation and 186.342.94+/-47.001,80 ng/mL/h for the reference formulation, for the AUC0-∞ the resultingvalues were 176.900.54+/-45.843,65 ng/mL/hto formulationtest and 187.399,88+/-47.487,22 ng/mL/h for the reference formulation...

Implementation of a penicillin allergy skin test / Implementação de um teste cutâneo de alergia à penicilina

The penicillin allergy skin testing is the only accurate and reliable test for penicillin hypersensitivity mediated by IgE. It is useful for identifying patients with doubtful history of allergy. Positive test for major and minor determinants presents a positive predictive value of 50 percent and negative predictive value of 99 percent. In Brazil, the Ministry of Health suggests a protocol for in house made reagents, since they are not commercially available. As the referred protocol does not mention some important details about the test procedures, we propose in the present work to implement them, critically evaluating each step in order to allow the protocol establishment at any health service, with quality and safety.

O teste cutâneo para alergia imediata a penicilina é o único teste validado internacionalmente, sendo que sua grande utilidade reside na avaliação de pacientes com história positiva de alergia a penicilina. O teste positivo para determinantes principais e secundários da penicilina apresenta um valor preditivo positivo de 50 por cento e valor preditivo negativo de 99 por cento. Em nosso meio, o Ministério de Saúde disponibiliza um protocolo para o preparo dos reagentes, uma vez que os mesmos não estão disponíveis comercialmente. Como o referido protocolo não apresenta maiores detalhes sobre o cuidado relativo às etapas de preparo das soluções, bem como faltam algumas considerações no que tange a realização do teste, propusemo-nos no presente trabalho operacionalizar o teste, avaliando de forma crítica e minuciosa cada etapa, de forma que outros profissionais possam reproduzi-lo de maneira mais segura e eficaz.

Estudio de plasmidos en cepas de neisseria meningitidis con sensibilidad disminuida a la penicilina / Study of plasmid in neisseria cepas meningitidis with sensibility reduced to penicillin

Durante los años 1990, 1991, 1992 se encontraron en el laboratorio Nacional de Referencia de Neisseria meningitidis, 8 cepas procedentes de enfermos con sensibilidad intermedia a la penicilina (CMi 0.3 y 0.6 ug/ml); las mismas se clasificaron como B4: P1-15 y en todas se llevó a cabo la determinación de actividad betalactamasa por el método iodométrico y la búsqueda de plásmidos que pudieran ser responsables de dicha resistencia. Los resultados obtenidos con ambos métodos fueron negativos.

Inibidores bacterianos no leite tipo "B" comercializado no município de Säo Paulo, SP (Brasil) / Bacterial inhibitors in B-type milk sold in the municipality of Säo Paulo, SP (Brazil)

No leite tipo "B", comercializado no município de Säo Paulo, SP (Brasil), foram pesquisadas a presença de inibidores bacterianos (penicilina, água oxigenada, formol e cloro). As amostras de leite utilizadas foram provenientes das quatro marcas de maior consumo pela populaçäo, coletadas no período de 14 de julho de 1982 a 20 de março de 1983. Foi constatada alta prevalência de inibidores bacterianos (4,70%). A incidência de resíduos de penicilina e de inibidores näo identificados foi de 0,7% e de 3,40%, respectivamente. Houve uma baixa proporçäo de amostras com água oxigenada e formol e ausência de cloro

Hallazgo de penicilina y otras drogas antibacterianas en leche destinada a consumo / Finding of penicillin and other antibacterial drugs in the milk destined to consumption

Utilizando el método de inhibición del Bacillus stearothermophilus var. calidolactis, se estudió la presencia de antisépticos y antibióticos (especialmente penicilina) en leche destinada a consumo. De las 150 muestras de leche pasteurizadas o esterilizadas, 5 fueron positivas (una de ellas conteniendo penicilina), 1 dudosa y 144 negativas. Los autores consideran a la aplicación de antibióticos intramamarios para el tratamiento de las Mastitis Bovinas, la fuente más importante de contaminación de la leche con dichos fármacos. Se discuten los riesgos para la salud pública

Aflatoxina e inibidores bacterianos no leite tipo "B" comercializado em Säo Paulo: levantamento das quatro marcas de maior consumo / Aflatoxin and bacterial inhibitors in type \"B\" milk sold in Säo Paulo: survey on the 4 most marks consumed commercial

No leite tipo "B" comercializado em Säo Paulo foram pesquisados a presença de aflatoxina Ml e de inibidores bacterianos (Penicilina, água oxigenada, formol e cloro). As amostras de leite utilizadas foram provenientes das quatro marcas de maior consumo pela populaçäo de Säo Paulo. O trabalho constituiu-se em um estudo longitudinal, com amostragem probabiolística, dividido em dois períodos iguais de 140 dias com 224 amostras analisadas. No primeiro período, de 14 de junho a 31 de outubro de 1982, foram pesquisados todos os contaminantes propostos. No segundo período, de 01 de novembro de 1982 a 30 de março de 1983, a aflatoxina näo foi pesquisada, pois, como sofre influência sazonal, há maior possibilidade de ser encontrada nos meses de temperaturas mais baixas. A aflatoxina, embora em baixos níveis e em pequena proporçäo (1,8%), fez-se presente nas quatro marcas. Foi constatada alta prevalência de inibidores bacterianos. No primeiro e no segundo período a porporçäo foi de 4,95% e 4,50% respectivamente. No primeiro período a incidência de resíduos de penicilina e de inibidores näo identificados foi de 0,9% e de 3,6% respectivamente. No segundo foi de 0,45% e de 3,15%. Houve baixa proporçäo de amostras com água oxigenada e formol, e ausência de cloro. De acordo com os resultados, concluiu-se que há necessidade de estabelecimento de limites de tolerância para a aflatoxina no leite, ausentes na nossa legislaçäo; e pela necessidade da atuaçäo da saúde pública através da inspeçäo, e através de amplos programas educativos junto aos produtores e industrias