Niveles de MMP-3 y MMP-8 en pacientes con periodontitis crónica antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico / MMP-3 and MMP-8 levels in patients with chronic periodontitis before and after nonsurgical periodontal therapy

En la periodontitis crónica (PC) se desencadenan procesos inmunoinflamatorios, donde se liberan metaloproteinasas de la matriz (MMPs), enzimas involucradas en la degradación de la matriz extracelular, las cuales pueden ser detectadas en el fluido gingival crevicular (FGC). El propósito del estudio fue determinar los niveles de MMP-3 y MMP-8 en FGC, antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico (TPNQ) para evaluar actividad de la enfermedad y respuesta terapéutica. Once pacientes con periodontitis crónica y 11 controles sanos fueron seleccionados. Se evaluaron los parámetros clínicos: índice gingival, índice de placa, profundidad al sondaje y pérdida de inserción; en todos los dientes de cada individuo y en seis sitios por diente. Muestras de FGC fueron tomadas de un diente por cuadrante, con profundidad de saco ≥ 4mm y pérdida de inserción ≥ 5 mm, los niveles de MMP-3 y MMP-8 fueron determinados por ELISA. Diferencias estadísticamente significativas fueron observadas entre los parámetros clínicos del grupo control y los pacientes con PC antes del tratamiento, registrándose posterior al TPNQ disminución significativa de todos los índices. Las concentraciones iniciales de MMP-3 y 8 en el grupo con PC fueron significativamente mayores a las obtenidas luego del TPNQ y en el grupo control, sin observar correlación entre parámetros clínicos y niveles de MMPs. La disminución significativa de los valores de MMP-3 y 8 en FGC de los pacientes con PC, posterior al TPNQ, indican la participación importante de estas enzimas en la degradación del tejido, y la efectividad del tratamiento periodontal para su control.

Immune-inflammatory processes are trigged in chronic periodontitis (CP), where matrix metalloproteinases (MMPs) are released and involved in the degradation of the extracellular matrix components that can be detected in the gingival crevicular fluid (GCF). The purpose of the study was to determine the levels of MMP-3 and MMP-8 in GCF, before and after nonsurgical periodontal treatment (NSPT), to evaluate disease activity and therapy response. Eleven patients with PC and eleven healthy controls were selected. Clinical measurements to evaluate gingival index (GI), plaque index (PI), probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL) were made in all the teeth of each individual and in six sites per tooth. GCF samples were taken from one tooth per quadrant, with a pocket depth ≥ 4 mm and a clinical attachment loss ≥ 5 mm, and the levels of MMP-3 and MMP-8 measured using an ELISA test. Statistically significant differences in clinical parameters were observed (p < 0.05) between patients with CP and control groups before the periodontal treatment, with significant decrease in all indexes after the NSPT. The initial concentrations of MMP-3 and MMP-8 were significantly higher than those obtained after the NSPT and in the control group, without observing a correlation between the clinical parameters and the levels of MMPs. Increased levels of MMP-3 and MMP-8 in the GCF of patients with PC declined significantly after NSPT, and the difference between the levels in healthy individuals and patients, suggests the important participation of these MMPs in tissue destruction in PC disease.

Análisis de MMPs en fluidos orales en el diagnóstico complementario de las enfermedades periodontales / Oral-fluid MMP analysis in the complementary diagnosis of periodontal diseases

La periodontitis constituye la infección bacteriana más prevalente a nivel mundial y representa un factor de riesgo para diversas patologías sistémicas. El estado de inflamación y destrucción periodontal se manifiestan a través de la presencia de biomarcadores en el suero y fluidos orales, tales como el fluido gingival crevicular (FGC), saliva y enjuague oral. Enzimas como las metaloproteinasas de matriz (MMP) y mieloperoxidasa, constituyen biomarcadores potenciales para ensayos moleculares complementarios a la clínica de uso en el sillón dental. A continuación se presenta una revisión de la literatura respecto de la aplicación potencial del análisis de metaloproteinasas de matriz extracelular (MMPs) en el diagnóstico complementario de las enfermedades periodontales. Se ha demostrado que los niveles de MMP-9, -13 y particularmente de MMP-8, se asocian con el grado de inflamación periodontal, y pueden diferenciar entre sujetos sanos, con gingivitis, periodontitis y peri-implantitis, mientras que la mejoría de los parámetros clínicos en respuesta al tratamiento periodontal se asocia con la reducción de la activación y niveles de estas enzimas en FGC, como así también en el suero. Se concluye que la determinación, particularmente de MMP-8 en fluidos orales presenta un elevado potencial como complemento de los métodos clínicos tradicionales para identificar a los pacientes con periodontitis o en riesgo de desarrollar la enfermedad, monitorear fases del tratamiento y mejoría de signos periodontales e incluso evaluar el estado de inflamación sistémica.

Periodontal disease is the most common bacterial infection worldwide and it can contribute to enhance the risk for the development of several systemic diseases. The status of periodontal inflammation and destruction can be reflected in biomarker measurement in serum and oral fluids, like gingival crevicular fluid (GCF), saliva and mouth-rinse. Some enzymes, such as matrix metalloproteinases (MMPs) and myeloperoxidase are potential candidates for chair-side point-of-care oral fluid assays. This review is focused on the utility of matrix metalloproteinase (MMP) analysis in oral fluid as a complementary diagnostic method to chronic periodontitis. Levels of MMP-9,-13 and specially of MMP-8, reflect oral inflammatory status and discriminate among healthy, gingivitis, periodontitis and periimplantitis individuals, whereas MMP levels and activation in GCF and serum are in line with the improvement of clinical parameters in response to periodontal treatment. As a conclusion, MMP-8 assessment in GCF could represent a helpful adjunctive method to traditional diagnostics to identify periodontitis or patients at risk to develop the disease, monitor treatment phases, improvement of periodontal signs and even screen the systemic inflammation status.

Niveles extracelulares de glutamato y aspartato en el fluido gingival en la periodontitis / Extracellular glutamate and aspartate levels in the gingival crevicular fluid of periodontitis patients

El objetivo de este trabajo fue comparar los niveles extracelulares de glutamato y aspartato en el fluido del surco gingival (GCF) de personas adultas, en la periodontitis crónica localizada inducida por placa (PCIP) y la gingivitis inducida por placa (GIP). La enfermedad periodontal produce cambios inflamatorios en los tejidos de sostén de las piezas dentales afectadas. El análisis químico del GCF, con diferentes métodos de colección y análisis, ha sido usado para determinar la presencia de algunos elementos inflamatorios que aparecen en la enfermedad periodontal, tales como diversas enzimas, aminoácidos, etc.Las muestras del GCF se tomaron con la técnica de microdiálisis en las zonas dentales con PCIP con una profundidad del surco > 3 mm; pérdida de soporte > 2mm y en las zonas dentales con GIP en el mismo paciente (n=10) Total de muestras: 100. Para medir el glutamato y aspartato en el GCF se usó la técnica de electroforesis capilar acoplada a laser con detección inducida por fluorescencia (CZE-LIFD). Los resultados mostraron que en los dientes con PCIP el glutamato disminuyó (p<0.05) y el aspartato aumentó (p< 0.02) en comparación con los dientes con GIP.

The objective of this work was to compare glutamate and aspartate levels in periodontal chronic localized disease (PCIP) and dental zones with gingivitis (GIP) in the gingival crevicular fluid (GCF). Periodontal inflammation produces histological changes, increase of blood irrigation and also increase of subgingival fluid. GCF was recognized as an inflammatory exudes derived from the periodontal tissue. Different methods to collect and analyze GCF samples had been used to identify some substances in the GCF, such as the proteinglycans metabolite, to be a possible marker of active periodontal disease. A combination of microdialysis in situ in dental zones with PCIP (probing depth > 3 mm; attachment level > 2 mm) and dental zones with GIP (n=10), total samples: 100, and capillary zone electrophoresis coupled to a laser induced fluorescence detection (CZE-LIFD) was used to measure extracellular concentrations of amino acids: glutamate and aspartate in the GCF in adult patients The results showed that glutamate decrease (p<0.05) and aspartate increase (p<0.02) in PCIP disease zones compared with dental zones with GIP. We observed chemical in vivo evidence that differentiate the GIP zones and PCIP zones.

Role of protease-activated receptor-2 in inflammation, and its possible implications as a putative mediator of periodontitis

Proteinase-activated receptor-2 (PAR2) belongs to a novel subfamily of G-protein-coupled receptors with seven-transmembrane domains. This receptor is widely distributed throughout the body and seems to be importantly involved in inflammatory processes. PAR2 can be activated by serine proteases such as trypsin, mast cell tryptase, and bacterial proteases, such as gingipain produced by Porphyromonas gingivalis. This review describes the current stage of knowledge of the possible mechanisms that link PAR2 activation with periodontal disease, and proposes future therapeutic strategies to modulate the host response in the treatment of periodontitis.

Enzimas proteolíticas relacionadas con la enfermedad periodontal inflamatoria / Proteolytic enzymes related to the periodontal disease

: La enfermedad periodontal inflamatoria ocasiona la destrucción de los tejidos que protegen y soportan al diente; es por eso de gran importancia el papel que pueden desempeñar las enzimas que sean capaces de degradar la matriz del tejido conectivo, como las enzimas proteolíticas. Existen evidencias de que las metaloproteinasas de la matriz, las proteasas leucocitarias y las bacterianas, pueden participar en la etiopatogenia de esta enfermedad. Su acción es regulada en los tejidos, por la presencia de inhibidores específicos, de manera que un desbalance proteasas-inhibidores a favor de los primeros, conduciría a la destrucción de las proteínas de la matriz del tejido conectivo. A su vez, en la actividad proteolítica influyen diferentes factores, que de manera global, inducen un fenotipo degradativo o formativo, y que por lo tanto, podrían estar involucrados en la etiopatogenia de la enfermedad periodontal inflamatoria

Periodontopatias: aspectos bioquímicos da doença periodontal inflamatória / Periodontal diseases: biochemical aspects of inflammatory periodontal disease

Neste trabalho, estudamos a concentraçäo das enzimas: protease, desidrogenase lática, fosfatase alcalina, transaminase glutâmico-oxaloacético (GOT), transaminase glutâmico-pirúvico (GPT) e creatina fosfotransferase (CPK) em extratos teciduais de gengivas obtidas de pacientes com diferentes graus de doença periodontal inflamatória. Também realizamos o estudo do perfil proteico dos extratos teciduais através de eletroforese em gel de poliacrilamida em pH 8,6, pH 4,0 e contendo SDS. Para este propósito, selecionamos 81 pacientes de sexo masculino, com idade variando entre 14 e 51 anos, previamente classificados de acordo com os índices: gengival de Loe e Silness e de Ramfjord, além do exame radiográfico da área em estudo. Os pacientes foram divididos em sete grupos, distribuídos da seguinte maneira: Normal 10, Gengivite I 12, Gengivite II 12, Gengivite III 11, Periodontite I 10, Periodontite II 15 e Periodontite III 11. A análise dos nossos estudos mostraram os seguintes resultados: - A concentraçäo da protease é maior no grupo da periodontite grau I. A média da concentraçäo da enzima no grupo da gengivite é menor que no grupo normal. A média da concentraçäo da enzima no grupo da periodontite é ligeiramente superior à média no grupo normal. - A concentraçäo da desidrogenase lática é maior no grupo da gengivite grau II. A concentraçäo da enzima em UE/g de tecido é maior que o grupo normal na gengivite II e III. A média da concentraçäo da enzima no grupo da gengivite é maior do que o valor do grupo normal. A média no grupo da periodontite é inferior à média no grupo normal. - A concentraçäo da fosfatase alcalina em UE/mg de proteína apresentou valores maiores que o grupo normal nos grupos da gengivite II e III e periodontite I, II e III. A concentraçäo da fosfatase alcalina em UE/g de tecido apresentou valores maiores que o grupo normal, nos grupos da gengivite III e periodontite II e III. A média da concentraçäo da fosfatase alcalina foi crescente na seguinte ordem: normal, gengivite e periodontite...