Detección y cuantificación de células plasmáticas (plasmocitos) en granulomas periapicales inducidos experimentalmente en ratas / Detection and quantification of plasma cells in experimentally induced rat periapical granulomas

Objetivo: En los granulomas periapicales, los plasmocitos (PL) participan activamente mediante la liberación de inmunoglobulinas. El propósito de este ensayo fue identificar y contar el número de PL en diferentes períodos de tiempo en lesiones periapicales experimentales en ratas. Materiales y métodos: Mediante la exposición al medio oral de la pulpa de los primeros molares inferiores izquierdos, se indujeron granulomas periapicales en ratas a las que previamente se les suministró anestesia. La pulpa de los primeros molares inferiores derechos no fue expuesta, y estos dientes se utilizaron como control. Los animales fueron eutanasiados a los 10, 30 y 60 días de la exposición. Los maxilares inferiores fueron removidos, y los primeros molares, junto con los tejidos circundantes, se procesaron para su estudio histológico. Se obtuvieron secciones semiseriadas, posteriormente coloreadas con verde de metilo-pironina (VMP). Cada tres secciones, las tres siguientes fueron coloreadas con hematoxilina y eosina (H-E). Los controles también fueron coloreados con H-E. Resultados: Todos los especímenes experimentales coloreados con H-E revelaron la presencia de granulomas periapicales. Luego de la exposición pulpar, el número de PL que reaccionó positivamente al VMP se incrementó de manera progresiva desde el día 10 hasta los días 30 y 60. A pesar de que a los 60 días el número de PL fue ligeramente menor que a los 30 días, no hubo diferencias estadísticamente significativas entre estos dos períodos. Los especímenes del grupo control coloreados con H-E mostraron que los tejidos periapicales se encontraban dentro de los parámetros normales en todos los períodos de observación. Conclusiones: Los resultados de este estudio revelaron que el número de plasmocitos VMP positivos se incrementa progresivamente en función del tiempo transcurrido pero se estabiliza al finalizar el experimento. También sugieren que el empleo de la coloración de VMP es un procedimiento adecuado para la identificación y la cuantificación de plasmocitos en los granulomas periapicales inducidos experimentalmente en ratas (AU)

Aim: Plasma cells (PL) release immunoglobulin in periapical lesions. The purpose of this assay was to identify and count the number of plasmocytes observed in periapical lesions in rats. Materials and methods: By exposing the pulp of the lower left first molars to the oral environment, periapical granulomas were induced in rats previously anesthetized. The pulp of right mandibular first molars was not exposed and these teeth were used as negative controls. The animals were euthanized at 10, 30 and 60 days after pup exposure. The mandibles were removed and specimens of the molar teeth along with the surrounding tissues were prepared for histology. Semi serial sections of the left first molar were stained with methyl green pyronine (MGP). Every three sections, the following three sections were stained with hematoxilyn and eosin (H-E). Negative control samples were stained with H-E. Results: All the H-E stained experimental samples revealed the presence of periapical granulomas. After pulp exposure, the number of PL increased from day 10 to 30 and 60. In the 60-day samples the number of PL was slightly less than that of the 30-day samples, with no statistically significant difference. The H-E stained control samples showed normal periapical tissues in all observation periods. Conclusions: The results of this study revealed that the number of VMP positive PL, increased progressively with time but it was stabilized at the end of the experiment. In addition, the results suggest that the use of VMP stain is a suitable procedure for the identification and counting of PL in experimentally induced periapical granulomas in rats (AU)

IgG4-related Hashimoto’s thyroiditis – A new variant of a well known disease / Tireoidite de Hashimoto associada a IgG4 – Uma nova variante de uma doença bem conhecida

Hashimoto’s thyroiditis (HT) has been characterized for many years as a well-defined clinicopathologic entity, but is now considered a heterogeneous disease. IgG4-related HT is a new subtype characterized by thyroid inflammation rich in IgG4-positive plasma cells and marked fibrosis. It may be part of the systemic IgG4-related disease. We report a case of a 56-year-old Portuguese man who presented with a one-month history of progressive neck swelling and dysphagia. Laboratory testing revealed increased inflammatory parameters, subclinical hypothyroidism and very high levels of thyroid autoantibodies. Cervical ultrasound (US) demonstrated an enlarged and heterogeneous thyroid gland and two hypoechoic nodules. US-guided fine needle aspiration cytology was consistent with lymphocytic thyroiditis. The patient was submitted to total thyroidectomy and microscopic examination identified typical findings of HT, marked fibrosis limited within the thyroid capsule and lymphoplasmacytic infiltration, with >50 IgG4-positive plasma cells per high-power field and an IgG4/IgG ratio of >40%. After surgery, serum IgG4 concentration was high-normal. Symptoms relief and reduction in laboratory inflammatory parameters were noticed. Thyroid function is controlled with levothyroxine. To our knowledge we report the first case of IgG4-related HT in a non-Asian patient. We also perform a review of the literature regarding IgG4-related disease and IgG4-related HT. Our case highlights this new variant of the well known HT, and helps physicians in recognizing its main clinical features, allowing for proper diagnosis and treatment.

A tireoidite de Hashimoto (TH) foi caracterizada durante muitos anos como uma entidade clinicopatológica bem definida, mas é atualmente considerada uma patologia heterogênea. A TH associada a IgG4 apresenta-se como um novo subtipo, sendo caracterizada por inflamação da tireoide com numerosos plasmócitos IgG4-positivos e fibrose extensa. É possível que pertença ao espectro da doença sistêmica associada a IgG4. Relatamos o caso de um homem português de 56 anos que se apresentou com aumento progressivo do volume cervical e disfagia, com um mês de evolução. A avaliação laboratorial revelou elevação dos parâmetros inflamatórios, hipotireoidismo subclínico e níveis muito elevados de autoanticorpos tireoidianos. Por ultrassonografia cervical demonstrou-se tireoide aumentada, heterogênea, com dois nódulos hipoecoicos. Foi realizada citologia aspirativa com agulha fina guiada por ultrassom, compatível com tireoidite linfocítica. O doente foi submetido à tireoidectomia total e o exame histológico revelou achados típicos de TH, extensa fibrose localizada dentro da cápsula tireoidiana e infiltrado linfoplasmocitário, com >50 plasmócitos IgG4-positivos por campo de grande ampliação e uma relação IgG4/IgG >40%. Após cirurgia, a concentração sérica de IgG4 encontrava-se no limite superior do normal. Ocorreu melhoria sintomática e redução dos parâmetros inflamatórios. A função tireoidiana foi controlada com levotiroxina. Relatamos o primeiro caso de TH associada a IgG4 num indivíduo não asiático. Além disso, realizamos uma revisão da literatura sobre doença associada a IgG4 e TH associada a IgG4. Este caso destaca uma nova variante da TH e permite aos médicos reconhecerem suas principais características clínicas, proporcionando diagnóstico e tratamento adequados.

Immunohistochemical evaluation of CD25+ cell expression in the progression of periodontal disease

It was assessed the immunohistochemical profile of CD25+ cells in cases of chronic gingivitis (CG) and chronic periodontitis (CP). Immunohistochemistry was carried out using streptoavidin-biotin complex and anti-CD25 antibody in 17 cases of CG and 25 cases of CP. Sixteen cases (94.1%) of CG were immunopositive. CD25 was focally expressed in 50% of the sample and diffusely expressed in 25%. The stained cells were localized not only beneath the epithelium, but also far from it. In relation to the cellular density quantification of CD25+ cells, score ++ was the most common. Concerning CP, all cases were immunopositive. CD25+ cells were expressed in focal or diffuse pattern either close or far from the epithelium. Diffuse distribution of positive cells throughout the connective tissue was seen in 60% of the cases and 32% showed focal or diffuse cellular pattern. Sixteen cases (64%) received score +++. It was identified that CD25+ cells are present in either a focal or a diffuse pattern in connective tissue. Significant differences in the density of cellular immunostaining between CG and CP were found. The greatest density was observed in CP cases, which suggests that the infiltrate of lymphocytes show a higher degree of cellular activation in periodontitis compared with gingivitis.

Foi avaliado o perfil imunohistoquímico das células CD25+ em casos de gengivite (CG) e periodontite crônica (CP). A imunohistoquímica foi realizada utilizando o complexo de streptoavidina-biotina e o anticorpo anti-CD25 em 17 casos de CG e 25 casos de CP. 16 casos (94.1%) de CG foram imunopositivos. O CD25 foi expresso focalmente em 50% da amostra e difusamente em 25% dos casos. As células imunomarcadas estavam localizadas não apenas no epitélio, mas também por todo o tecido conjuntivo. Em relação à quantificação da densidade celular de células CD25+, o escore ++ foi o mais comum. Em relação a CP, todos os casos foram imunopositivos. As células CD25+ foram expressas em padrão ora focal ora difuso, tanto no epitélio como no conjuntivo. A distribuição difusa das células positivas apenas no tecido conjuntivo foi observada em 60% dos casos, e 32% dos casos exibiram padrão celular ora focal ora difuso. 16 casos (64%) foram considerados como escore +++. Identificamos que as células CD25+ estão presentes em padrão ora focal ora difuso no tecido conjuntivo. Diferenças significantes na densidade da imunomarcação celular entre CG and CP foram encontradas. A maior densidade celular foi observada na periodontite, sugerindo que o infiltrado de linfócitos mostrou um maior grau de ativação celular na periodontite comparada à gengivite.

Aplicación de la nefelometría laser en inmunología y microbiología / Laser nefelometry immunology and microbiology

Objetivo: evaluar la utilidad de la nefelometría láser en los estudios inmunológicos y microbiológicos. Material y métodos: se realizaron cuantificaciones de diversas proteínas plasmáticas: IgG, IgA, IgM, C3 y C4 por nefelometría laser utilizando como controles los estándares proporcionados por una casa comercial. Para su análisis los datos se transformaron a escalas logarítmicas y se calcularon ecuaciones de regresión lineal. Para la evaluación microbiológica se realizaron concentraciones bacterianas decimales hasta 10 a la 6 de E. coli en caldo de Hinto-Muller. Todas las concentraciones se leyeron cada 5 o 10 minuto durante 70 minutos para determinar la cinética de crecimiento. También se midió inhibición de amikacina sobre E. coli. Resultados: las ecuaciones calculadas empíricamente mostraron una buena reproducibilidad y una vigencia aproximada de seis meses para las proteínas plasmáticas. Así mismo la nefelometría mostró que permite realizar un cálculo rápido de la concentración mínima inhibitoria de crecimiento bacteriano

Respuesta inmune humoral de glándulas salivales menores en pacientes con parotiditis crónica recurrente / Humoral immunity response of minor salival glands in patients with chronic recurrent parotiditis

La parotiditis crónica recurrente inespecífica, es una enfermedad que afecta las glándulas parótidas de niños prepúberes, siendo de carácter inflamatorio. A pesar de ser la segunda enfermedad parotídea de mayor prevalencia en niños, no se sabe con certeza su etiología, y su tratamiento sigue siendo sólo paliativo. Dentro de las posibles etilogías que se proponen se encuentran algunas enfermedades de carácter inmune, es por esto que se investigó, si existían variaciones en la cantidad de inmunoglobulina G y M presente en las glándulas de estos niños. Para esto se tomó biopsias de glándulas salivales de labio inferior de niños enfermos y se sometieron a tinción inmunohistoquímica policlonal para IgG e IgM. Se realizó el conteo de los plasmocitos que presentaban IgG y M, comparándose con glándulas salivales menores sanas, sometidas a la misma tinción. Los resultados obtenidos permiten descartar, como causante de la enfermedad, respuestas anormales del sistema humoral, ya que la presencia de IgM e IgG no presentó diferencias significativas entre glándulas de pacientes enfermos y sanos