Prevalencia de Porphyromonas gingivalis en fluido gingival y su relación con la periodontitis / Prevalence of Porphyromonas gingivalis in gingival fluid and its relationship with periodontitis

Introducción: la periodontitis es una enfermedad infecciosa multifactorial asociada a un biofilm de microorganismos patógenos. Objetivo: el objetivo del trabajo fue establecer la prevalencia de Porphyromonas gingivalis en pacientes con periodontitis y relacionarla con la severidad de la enfermedad. Material y métodos: participaron 45 pacientes, sistémicamente saludables, con edades entre 35 y 65 años. El grado de periodontitis se definió según los criterios de Papapanou y colaboradores. Como grupo control, se incluyeron 20 sujetos de ambos sexos sin periodontitis y sin enfermedades sistémicas. Se tomaron muestras de fluido gingival en dos sitios más profundos. Porphyromonas gingivalis se detectó por PCR (reacción en cadena de la polimerasa). Resultados: la frecuencia relativa de periodontitis fue de 13.3% grado I, 46.7% grado II y 40% grado III. El sexo masculino presentó periodontitis grado III 72.2% y grado II 52.3%. El grado I se registró con mayor frecuencia en el sexo femenino, 66.7%. La prevalencia de Porphyromonas gingivalis en la población con periodontitis fue de 44.4%. Se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas entre los grados de severidad de periodontitis y la presencia de Porphyromonas gingivalis (p = 0.0002, α = 5%). Conclusión: la periodontitis predominó en el sexo masculino. La prevalencia de Porphyromonas gingivalis en la población con periodontitis crónica fue de 44.4% y su presencia está relacionada con la severidad (AU)

Introduction: periodontitis is a multifactorial infectious disease associated with a biofilm of pathogenic microorganisms. Objective: the objective of the work was to establish the prevalence of Porphyromonas gingivalis in patients with periodontitis and relate it to the severity of the disease. Material and methods: 45 systemically healthy patients, aged between 35 and 65 years old, participated. The degree of periodontitis was defined according to the criteria of Papapanou et al. As a control group, 20 patients of both sexes without periodontitis and without systemic diseases were included. Gingival fluid samples were taken from two deeper sites. Porphyromonas gingivalis was detected by PCR (polymerase chain reaction). Results: the relative frequency of periodontitis was 13.3% grade I, 46.7% grade II and 40% grade III. The male sex presented periodontitis grade III 72.2% and grade II 52.3%. Grade I was recorded more frequently in the female sex, 66.7%. The prevalence of Porphyromonas gingivalis in the population with periodontitis was 44.4%. Statistically significant differences were obtained between the degrees of severity of periodontitis and the presence of Porphyromonas gingivalis (p = 0.0002, α = 5%). Conclusion: periodontitis predominated in males. The prevalence of Porphyromonas gingivalis in the population with chronic periodontitis was 44.4% and its presence is related to severity (AU)

Prevalencia de Porphyromonas gingivalis en un grupo de pacientes con aparatología fija de ortodoncia / Prevalence of Porphyromonas gingivalis in a group of patients with fixed orthodontic appliances

Introducción: existen diversos patógenos que pueden afectar no sólo la salud periodontal, sino también la salud general de los pacientes. Objetivo: determinar la Porphyromonas gingivalis (PG) en el primer molar superior derecho de adolescentes, de entre 12 y 18 años, con al menos un mes de tratamiento de ortodoncia con aparatología fija. Material y métodos: se realizó un estudio observacional, descriptivo, transversal de casos en un grupo de 26 adolescentes con tratamiento de ortodoncia, compuesto de brackets metálicos, tubos o bandas, arcos NiTi termoactivos, módulos, cadenas o ligaduras; sin importar sexo, edad, tiempo de tratamiento o maloclusión. Se formaron dos pares de grupos 1 y 2 (15 mujeres y 11 hombres), A y B (13 mujeres y 13 hom- bres) comparando los resultados obtenidos entre los grupos. Resulta- dos: dentro del grupo 1 y 2 la detección molecular de microorganismos arroja que 80% fueron positivas a la PG, 58.33% presenta maloclusión y en promedio 89% de las pacientes son positivas a PG. La detección molecular del grupo A y B indica que 54.54% fueron positivos a PG, mientras que 83.3% presenta maloclusión y en promedio 47% son positivos a PG. Conclusión: la explicación de los eventos moleculares que se desencadenan en la cavidad oral y los sistemas afectados por PG contribuyen a la prevención de complicaciones al tener una mejor comprensión de los fenómenos infecciosos (AU)

Introduction: there are various pathogens that can affect not only periodontal health, but also the general health of patients. Objective: to determine Porphyromonas gingivalis (PG) in the upper right first molar of adolescents, between 12 and 18 years old, with at least one month of orthodontic treatment with fixed appliances. Material and methods: a cross-sectional descriptive observational study of cases was carried out in a group of 26 adolescents with orthodontic treatment, consisting of metal brackets, tubes or bands, thermoactive NiTi archwires, modules, chains or ligatures; regardless of sex, age, treatment time or malocclusion. Two pairs of groups 1 and 2 (15 women and 11 men), A and B (13 women and 13 men) were formed, comparing the results obtained between the groups. Results: within group 1 and 2, the molecular detection of microorganisms shows that 80% were positive for PG, 58.33% presented malocclusion and an average of 89% of patients were positive for PG. The molecular detection of group A and B indicates that 54.54% were positive for PG while 83.3% presented malocclusion and on average 47% were positive for PG. Conclusion: the explanation of the molecular events that are triggered in the oral cavity and the systems affected by PG contribute to the prevention of complications by having a better understanding of the infectious phenomena (AU)

Prevalencia de Prevotella spp y Porphyromona spp en periodontitis crónica / Prevalence of Prevotella spp and Porphyromona spp in chronic periodontitis

Las enfermedades del periodonto tienen una etiopatogenia compleja y puede considerarse multifactorial. El factor etiológico esencial en la patología inflamatoria periodontal es la biopelícula dental y cuando el desequilibrio entre el huésped y los microorganismos cambia la complejidad de la flora. Ciertas bacterias como Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella loescheii, Fusobacterium nucleatum, Tannerrella forsythia, Campylobacter rectus, Eikenella corrodens y Treponema spp., han sido comúnmente relacionadas con la periodontitis crónica y son consideradas como indicadores de riesgo para la progresión de dicha enfermedad. El objetivo de este trabajo fue establecer la prevalencia de Prevotella spp y Porphyromona spp en los distintos estadios de periodontitis crónicas. Material y métodos: Se estudiaron 48 pacientes sistémicamente saludables con diagnóstico de periodontitis crónica. Se completó el consentimiento informado, se realizó historia clínica y examen periodontal. El estado periodontal se clasificó en distintos grados de severidad: leve, moderada y severa. Se tomaron muestras de dos sitios con mayor profundidad de sondaje con conos de papel absorbente estériles y se transportaron en un medio prerreducido. Para el aislamiento de Prevotella spp se utilizó agar Brucella más sangre ovina al 5%, hemina, vitamina K al que se agregaron vancomicina y kanamicina; Porphyromonas sp se aisló en el mismo medio con el agregado de bacitracina y colistina. Se sembraron 10 µl de muestra entera y las placas fueron incubadas en jarras de anaerobiosis por 5 a 7 días a 37ºC. Resultados: los distintos grados de periodontitis correspondieron a un 17% periodontits leve, 57% moderada y 26% severa. En el total de pacientes se determinó la presencia de Prevotella spp en el 54% de los casos y un 12,5% de Porphyromona spp. Conclusión: De los pacientes estudiados con periodontits crónica, un 52% correspondió al sexo masculino, un 57% de los casos correspondieron a periodontitis moderada. Se aisló Prevotella sp en todos los estadios de periodontitis crónica y Porphyromonas sp sólo en periodontitis severas (AU)

Periodontal diseases have a complex etiopathogenesis and can be considered multifactorial. The essential etiological factor in periodontal inflammatory pathology is the dental biofilm and when the imbalance between the host and the microorganisms changes the complexity of the flora. Certain bacteria such as Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Prevotella loescheii, Fusobacterium nucleatum, Tannerrella forsythia, Campylobacter rectus, Eikenella corrodens and Treponema spp., Have been commonly related to chronic periodontitis and are considered as risk indicators for the progression of said disease. The objective of this work was to establish the prevalence of Prevotella spp and Porphyromonas spp in the different stages of chronic periodontitis. Forty eight systemically healthy patients diagnosed with chronic periodontitis were studied. Informed consent was completed, a medical history and periodontal examination was carried out. The periodontal state was classified into different degrees of severity: mild, moderate and severe. Samples were taken from two sites with greater depth of probing with sterile absorbent paper cones and transported in a prereduced medium. For the isolation of Prevotella spp, Brucella agar plus 5% sheep blood, hemin, vitamin K to which vancomycin and kanamycin were added. For Porphyromonas spp, the same medium was used and bacitracin and colistin were added. 10 µl of the whole sample was seeded and the plates were incubated in anaerobic jars for 5 to 7 days at 37 ° C. Different degrees of periodontitis corresponded to 17% mild periodontitis, 57% moderate and 26% severe. In the total number of patients, the presence of Prevotella spp was determined in 54% of the cases and 12.5% of Porphyromona spp. Of the patients studied with chronic periodontitis, 52% corresponded to the male sex, 57% of the cases corresponded to moderate periodontitis. Prevotella spp was isolated in all stages of chronic periodontitis and Porphyromonas sp only in severe periodontitis (AU)

Clinical and microbiological evaluation of non-surgical periodontal therapy in obese and non-obese individuals with periodontitis: a 9-month prospective longitudinal study

Abstract Objective Obesity is a chronic disease that negatively affects an individual's general and oral health. The present study aimed to compare the clinical and microbiological effects of non-surgical periodontal therapy with the full mouth disinfection (FMD) protocol on obese and non-obese individuals at 9 months post-therapy. Methodology This clinical study was first submitted and approved by the Ethics Committee. Fifty-five obese patients and 39 non-obese patients with periodontitis were evaluated. The full-mouth periodontal clinical parameters, clinical attachment level (CAL), probing depth (PD), gingival index (GI), and plaque index (PI), were monitored at baseline, 3, 6, and 9 months after periodontal treatment with full mouth disinfection (FMD) protocol. The mean count of Tannerella forsythia , Porphyromonas gingivalis , Treponema Denticola , and Aggregatibacter actinomycetemcomitans was determined by quantitative polymerase chain reaction on subgingival biofilm samples. Demographic data were assessed by Chi-square test. For clinical and microbiological parameters, two-factor repeated-measures ANOVA was used. Results In both groups, periodontal therapy using the one-stage full-mouth disinfection protocol significantly improved CAL, PD, GI, and PI (p<0.05). Obese and non-obese patients equally responded to non-surgical periodontal therapy (p>0.05). Microbial count found no major differences (p>0.05) between obese and non-obese individuals who had undergone non-surgical periodontal therapy. Conclusions Obesity did not affect the clinical and microbiological outcomes of non-surgical periodontal therapy.

Microbiological study of the subgingival biofilm in HIV+/HAART patients at a specialized dental service / Estudio microbiológico del biofilm subgingival de pacientes VIH+ bajo TARGA en un servicio dental especializado

ABSTRACT The aim of this study was to describe the microbiological profile of HIV patients under highly active antiretroviral treatment (HAART). This crosssectional study comprised 32 HIV patients with periodontal disease (PD) who had been under HAART for more than 6 months. Information about the patients' medical history was obtained from clinical records. Clinical dental examination was performed by a calibrated researcher using standard dental instruments to determine probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), and bleeding on probing (BOP). A total 4,765 periodontal sites were evaluated, 125 of which were also studied microbiologically. Subgingival biofilm samples were obtained using sterile paper points; one set was used for microbiological culture studies and the other for endpoint PCR. Statistical analysis was performed using KruskalWallis and posthoc DunnBonferroni contrast tests. All participants were on HAART at the time of the study, and 90.6% had a viral load below 50 copies/mm3. Prevalence of periodontally active sites was low in the study population. Microbiological studies: Black pigmented anaerobic bacteria and fusiform CFU counts were significantly higher in samples from sites with BOP and PD ≥4mm (p 0.020 and p 0.005, respectively). Molecular Assays: Detection of Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) and Treponema denticola (p 0.015) was significantly more frequent at sites with BOP and PD ≥4mm. Conclusions: The patients living with HIV/AIDS under HAART studied here had low prevalence of clinical periodontal disease signs. However, significant detection of P. gingivalis, T. denticola, and T. forsythia in periodontal active sites, and the involvement of these microorganisms as potential HIV reactivators, show the importance of creating awareness among dental health professionals of the need for close dental and periodontal monitoring in HIV patients.

RESUMEN El objetivo de este estudio fue describir el perfil microbiológico del biofilm subgingival de los pacientes con VIH bajo tratamiento antirretroviral de alta actividad (TARGA). El estudio comprendió a 32 pacientes VIH seropositivos con enfermedad periodontal (EP) que se encontraran en tratamiento con TARGA por más de 6 meses. Los antecedentes médicos de los pacientes se obtuvieron de las historias clínicas. El examen clínico instrumental (profun didad de sondaje (PS), nivel de inserción clínico (NIC) y sangrado al sondaje (SS)) fue realizado con instrumental odontológico estándar por un investigador calibrado. De este modo, se evaluaron un total de 4.765 sitios periodontales de los cuales 125 fueron estudiados microbiológicamente. Las muestras de biope lícula subgingival se obtuvieron empleando conos de papel estéril. Las muestras se emplearon en estudios microbiológicos y moleculares por PCR de punto final. El análisis estadístico se realizó según KruskalWallis y pruebas de contrastes posthoc de DunnBonferroni. El 90,6% de la población en estudio presentó carga viral inferior a 50 copias/mm3. La prevalencia de sitios periodontales activos fue baja (1%). Los recuentos de bacterias anaerobias estrictas pigmentadas de negro y fusiformes fueron significativamente más altos en muestras de sitios periodontales con SS positivo y PS ≥4 mm (p 0.020 y p 0.005). La detección molecular de Porphyromonas gingivalis (p 0.002), Tannerella forsythia (p 0.023) y Treponema denticola (p 0.015) fue significativamente mayor en los sitios con SS y PS ≥4mm. La prevalencia del 1% de enfermedad periodontal en el grupo de pacientes estudiados fue menor a la esperada, sin embargo; la detección significativa de P. gingivalis, T. denticola y T. forsythia en sitios periodontales activos y su potencial participación como agentes reactivadores del VIH, nos alerta de la importancia de crear conciencia en los profesionales de la salud (médicos y odontólogos) acerca de la necesidad de un monitoreo minucioso del estado periodontal de pacientes con características semejantes a las descriptas en la muestra poblacional estudiada.

Frequency of Porphyromonas gingivalis fimA in smokers and nonsmokers after periodontal therapy

Abstract Porphyromonas gingivalis is one of the most important Gram-negative anaerobe bacteria involved in the pathogenesis of periodontitis. P. gingivalis has an arsenal of specialized virulence factors that contribute to its pathogenicity. Among them, fimbriae play a role in the initial attachment and organization of biofilms. Different genotypes of fimA have been related to length of fimbriae and pathogenicity of the bacterium. Objectives The aim of this study was to identify 5 types of fimA genotype strains in smokers and nonsmokers with periodontitis, before and after periodontal therapy. Material and Methods Thirty-one patients with periodontitis harboring P. gingivalis were selected: 16 nonsmokers (NS) and 15 smokers (SM). Clinical and microbiological parameters were evaluated at baseline and 3 months after periodontal treatment, namely: plaque index, bleeding on probe, probing depth, gingival recession and clinical attachment level. The frequency of P. gingivalis and fimA genotype strains were determined by polymerase chain reaction. Results Type I fimA was detected in the majority of SM and NS at baseline, and the frequency did not diminish after 3 months of treatment. The frequency of type II genotype was higher in SM than NS at baseline. After 3 months, statistical reduction was observed only for types II and V fimA genotypes in SM. The highest association was found between types I and II at baseline for NS (37.5%) and SM (53.3%). Conclusion The most prevalent P. gingivalis fimA genotypes detected in periodontal and smoker patients were genotypes I and II. However, the presence of fimA genotype II was higher in SM. Periodontal treatment was effective in controlling periodontal disease and reducing type II and V P. gingivalis fimA.

Comparison of full-mouth scaling and quadrant-wise scaling in the treatment of adult chronic periodontitis

Abstract In the search for the ideal treatment of periodontal disease various non-surgical techniques should be considered. The objective of this study was to evaluate the efficacy of full-mouth scaling (FMS) by clinical and microbiological parameters. 670 individuals were evaluated with 230 subjects meeting the selection criteria and were divided into two groups; 115 subjects treated with FMS and 115 treated with weekly sessions of scaling and root planning (SRP). The patient population had a mean age of 51.67 years, with moderate chronic periodontitis. Subjects were evaluated prior to treatment (T1) and 90 days after execution of therapy (T2), with regards to: probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), plaque index (PI), gingival index (GI), and microbial detection for the presence of Porphyromonas gingivalis (P.g.) and Prevotella intermedia (P.i.) by culture method and confirmed by biochemical tests. Subjects treated in the FMS group also rinsed with 0.12% chlorhexidine mouthwash for seven days following treatment. The results were analyzed using statistical Student's t-test and chi-square test. No statistically significant differences were observed for PD and CAL between T1 and T2 in both groups. For GI and PI significant difference was observed between the groups. For the evaluated microbial parameters was observed reduction of P.g. and P.i., but only for P.g. with a significant reduction in both groups. The full mouth scaling technique with the methodology used in this study provided improved clinical conditions and reduction of P.g. in subjects with moderate periodontitis, optimizing the time spent in the therapeutic execution.

Resumo Na busca do tratamento ideal da doença periodontal varias são técnicas não-cirúrgicas que podem ser consideradas. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da técnica de desinfecção total de boca (FMD, na sigla em Inglês) por parâmetros clínicos e microbiológicos. Foram avaliados 670 indivíduos com 230 indivíduos atendendo aos critérios de seleção e divididos em dois grupos; 115 indivíduos tratados com FMD e 115 tratados com sessões semanais de raspagem e alisamento corono radicular (SRP, na sigla em Inglês). A população avaliada tinha idade média de 51,67 anos, com periodontite crônica moderada. Os sujeitos foram avaliados antes do tratamento (T1) e 90 dias após a execução da terapia (T2), quanto à profundidade de sondagem (PS), nível de inserção clínica (NIC), índice de placa (IP), índice gengival (IG) e detecção microbiana da presença de Porphyromonas gingivalis (P.g.) e Prevotella intermedia (P.i.) por método de cultura e confirmada por testes bioquímicos. Os indivíduos tratados no grupo FMD também realizaram bochechos com clorexidina 0,12% durante sete dias após o tratamento. Os resultados foram analisados ​​utilizando o teste estatístico t de Student e o teste de qui-quadrado. Não foram observadas diferenças estatisticamente significativas para PS e NIC entre T1 e T2 em ambos os grupos. Para IG e IP observou-se diferença significativa entre os grupos. Para os parâmetros microbianos avaliados foi observada redução de P.g. e P.i., mas apenas para P.g. com uma redução significativa em ambos os grupos. A técnica FMD com a metodologia utilizada neste estudo proporcionou condições clínicas melhoradas e redução da P.g. Em indivíduos com periodontite moderada, otimizando o tempo gasto na execução terapêutica.

Microbiological and clinical effects of probiotics and antibiotics on nonsurgical treatment of chronic periodontitis: a randomized placebo- controlled trial with 9-month follow-up

ABSTRACT Objective: The aim of this double-blind, placebo-controlled and parallel- arm randomized clinical trial was to evaluate the effects of Lactobacillus rhamnosus SP1-containing probiotic sachet and azithromycin tablets as an adjunct to nonsurgical therapy in clinical parameters and in presence and levels of Tannerella forsythia, Porphyromonas gingivalis and Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Material and Methods: Forty-seven systemically healthy volunteers with chronic periodontitis were recruited and monitored clinically and microbiologically at baseline for 3, 6 and 9 months after therapy. Subgingival plaque samples were collected from four periodontal sites with clinical attachment level ≥1 mm, probing pocket depth ≥4 mm and bleeding on probing, one site in each quadrant. Samples were cultivated and processed using the PCR technique. Patients received nonsurgical therapy including scaling and root planing (SRP) and were randomly assigned to a probiotic (n=16), antibiotic (n = 16) or placebo (n = 15) group. L. rhamnosus SP1 was taken once a day for 3 months. Azithromycin 500mg was taken once a day for 5 days. Results: All groups showed improvements in clinical and microbiological parameters at all time points evaluated. Probiotic and antibiotic groups showed greater reductions in cultivable microbiota compared with baseline. The placebo group showed greater reduction in number of subjects with P. gingivalis compared with baseline. However, there were no significant differences between groups. Conclusions: The adjunctive use of L. rhamnosus SP1 sachets and azithromycin during initial therapy resulted in similar clinical and microbiological improvements compared with the placebo group.

Distribución gen fimA de Porphyromonas gingivalis en pacientes chilenos con periodontitis crónica / Distribution of fimA genotypes of Porphyromonas gingivalis in Chilean patients with chronic periodontitis

RESUMEN: Antecedentes: Gen fimA de Porphyromonas gingivalis es un importante factor de virulencia asociado al desarrollo y la progresión de periodontitis. Objetivo: Cuantificar los niveles de P. gingivalis y la prevalencia de genotipos fimA en pacientes chilenos con diferentes grados de severidad de periodontitis crónica. Metodología: Se analizaron 135 muestras subgingivales de 45 adultos (15 con leve, 15 con moderada y 15 con periodontitis severa) mediante qPCR para P. gingivalis y genotipos fimA (I-V and Ib). Resultados: Se detectó P. gingivalis en el 73,3% de los pacientes con periodontitis crónica (46,6%, 73,3% y 100% para las formas leve, moderada y severa, respectivamente). El gen fimA se detectó en el 66% de los sujetos positivos para P. gingivalis, siendo el fimA IV y I los genotipos más prevalentes. Además, se detectó fimA IV en el 75% y fimA I en el 62,5% de los casos severos y moderados de periodontitis, respectivamente. Los niveles aumentados de fimA IV se asociaron con periodontitis crónica severa. Conclusiones: Los resultados sugieren una alta prevalencia de P. gingivalis y de sus genotipos fimA IV y I en pacientes con periodontitis crónica. Además fimA IV fue asociado con formas más severas de periodontitis crónica en esta población chilena.

ABSTRACT: Background: Porphyromonas gingivalis fimA gene is a key virulence factor and has been associated with development and progression of periodontal diseases. Aim: To quantify the levels of P. gingivalis and the prevalence of fimA genotypes in Chilean patients with different severity of chronic periodontitis. Methodology: One hundred and thirty five subgingival samples from 45 adults (15 with slight, 15 with moderate and 15 with severe chronic periodontitis, respectively) were analyzed by qPCR for P. gingivalis and fimA genotypes (I-V and Ib). Results: P. gingivalis was detected in 73.3% of patients (46.6%, 73.3% and 100% of patients with slight, moderate and severe chronic periodontitis, respectively). The genotype fimA was detected in 66% of positive subjects for P. gingivalis, whereas fimA IV and I were the most prevalent genotypes. In addition, fimA IV was detected in 75% and fimA I in 62.5% of severe and moderate cases, respectively. Increased levels of fimA IV were associated with severe chronic periodontitis. Conclusions: These findings suggest that there is a high prevalence of P. gingivalis and its fimA IV and I genotypes in chronic periodontitis patients. Furthermore, fimA IV was associated with severe chronic periodontitis in this Chilean population.

Características clínicas y microbiológicas de pacientes con periodontitis agresiva generalizada / Clinical and microbiological characteristics of a patients with generalized aggressive periodontitis

RESUMEN: Objetivo: el objetivo de este estudio es describir las características clínicas y microbiológicas de una muestra de pacientes diagnosticados con periodontitis agresiva generalizada (PAgG). Materiales y métodos: En este estudio de corte transversal, 20 sujetos menores de 30 años con PAgG atendidos en las clínicas odontológicas de la Universidad de Antioquia en Medellín Colombia, fueron invitados a participar entre diciembre del 2015 y marzo del 2017, las muestras microbiológicas fueron analizadas usando técnicas de cultivo y tomadas en los seis sitios más profundos de cada paciente (≥ 5mm). Resultados: Prevotella ssp y F. nucleatum fueron detectados en altos porcentajes, Porphyromonas gingivalis (P.g) fue positivo para la mitad de los sujetos estudiados; además de los microorganismos comúnmente estudiados, el 10% de los pacientes fueron positivos para bacilos entéricos gram-negativos. Conclusiones: se observaron grandes proporciones de microorganismos que incluyeron Prevotella spss y F. nucleatum; el 10% de los pacientes fueron positivos para bacilos entéricos gram-negativos.

ABSTRACT: Aim: The aim of this study is to describe the clinical and microbiological characteristics of a sample of patients diagnosed with generalized aggressive periodontitis (PAgG). Materials and methods: In this cross-sectional study, 20 subjects under 30 years of age with PAgG treated at the dental clinics of the University of Antioquia in Medellín, Colombia were invited to participate between December 2015 and March 2017, the microbiological samples analyzed using culture techniques were taken at the six deepest sites of each patient (≥ 5mm). Results: Prevotella ssp and F. nucleatum were detected in high percentages, Porphyromonas gingivalis (P.g) was positive for half of the studied subjects; In addition to the microorganisms commonly studied, 10% of the patients were positive for gram-negative enteric bacilli. Conclusions: large proportions of microorganisms were observed, including Prevotella spss and F. nucleatum; 10% of the patients were positive for gram-negative enteric bacilli.

Identificación del complejo rojo en la necrosis pulpar abierta y cerrada con técnicas moleculares / Red complex identification in exposed and unexposed necrotic pulp with molecular techniques

Objetivo: identificar el complejo rojo periodontal, formado por Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola y Tannerella forsythia, en la infección endodóntica primaria de necrosis pulpar, con cámara abierta y cerrada, utilizando técnicas de reacción en cadena de la polimerasa. Materiales y métodos: se realizó la toma para reacción en cadena de la polimerasa en 27 dientes con necrosis pulpar, 13 con cámara pulpar abierta y 14 con cámara cerrada. Resultados: en las muestras de necrosis abierta se identificaron P. gingivalis en un 92 por ciento, T. denticola en un 76 por ciento, T. forsythia en un 76 por ciento y el complejo rojo en un 61 por ciento. Las tomas de necrosis cerrada mostraron P. gingivalis en un 78 por ciento y T. denticola en un 57 por ciento; no se identificaron T. forsythia ni el complejo rojo. El análisis estadístico evidenció diferencias significativas entre los dos grupos (P<0,05). Conclusión: el sinergismo de las tres bacterias que forman el complejo rojo agravaría la patogénesis de la infección endodóntica y permitiría relacionar la microbiología endodóntica con la microbiología de periodontitis crónica.

Diagnóstico molecular de Porphyromonas gingivalis: optimización del método / Molecular diagnosis of Porphyromonas gingivalis: optimization of the method

El objetivo del presente trabajo fue estandarizar y optimizar la técnica de PCR convencional para detección de Porphyromonas gingivalis ATCC 33277. Materiales y métodos: la cepa de P. gingivalis ATCC332227 se sembró en agar Bruella enriquecido con sangre de cordero, suplementado con hemina y vitamina K. El ADN se extrajo empleando el protocolo que usa bromuro de cetil trimetilamonio (CTAB). Se evaluó la cantidad y calidad del material genético obtenido con el fotómetro UV Ampli-Quat, AQ-07 Nucleic Acid. Se realizó la PCR convencional con diferentes concentraciones de MgCl2 1 mM, 1,5 mM y 2.0 mM y a dos temperaturas de alineamiento: 60ºC y 55ºC. Los productos PCR se separaron por electroforesis en un gel de agarosa 1 por ciento. Las bandas se visualizaron en un fotodocumentador. La sensibilidad se calculó teniendo en cuenta el número de bacterias en diferentes diluciones. Resultados: se obtuvo una concentración 1,55x10(6) ng/ul de ADN genómico a partir de una suspensión bacteriana de 10a células bacterianas/ml, con índice de pureza 1,648 (relación de OD260/OD280). Los mejores resultados se obtuvieron con una concentración de 2 mM de MgCl2 y una temperatura de alineación de 55ºC. En cuanto a la sensibilidad, se obtuvo un límite de detección de 5 x 10/5 uL células bacterianas en suspensión. Conclusión: en la prueba de PCR convencional para Prophyromonas gingivalis ATCC 33277, las condiciones óptimas de estandarización son la concentración de 2 mM de MgCl y 55ºC y es necesaria una carga bacteriana mínima de 5 x 10 células/5 ul como límite de detección.

Detección de Porphyromonas gingivalis en pacientes adultos con periodontitis crónica / Porphyromonas gingivalis detection in adult patient with chronic periodontitis

Se realizó la detección de Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) en pacientes adultos con periodontitis crónica que se atendieron en la Clínica de Periodoncia de la Universidad de Antofagasta, a través de técnicas de microbiología convencional y técnica de biología molecular. fueron obtenidas muestras de fluido gingival crevicular de 37 pacientes con periodontitis crónica, con conos de papel (N 30) por 20 segundos del sitio periodontal más severo de cada cuadrante, posteriormente se realizó cultivo microbiológico en agar sangre y se detectó la presencia de P. gingivalis a través de técnicas de microbiología convencional (lupa estereoscópica y fluorescencia) y técnica de biología molecular (reacción en cadena de la polimerasa). se detectó con lupa estereoscópica colonias pigmentadas de negro en el 75,7 % de las muestras (n=28), de ellas el 67,9 % fueron positivas para P. gingivalis con la técnica de fluorescencia (n=19). A través de la reacción en cadena de la polimerasa se pudo confirmar que el 84,2 % de las colonias positivas por fluorescencia correspondían a P. gingivalis (n=16). En la población de estudio analizada es posible concluir que existe una alta prevalencia de P. gingivalis en la microbiota subgingival de los pacientes con periodontitis crónica lo que ha sido detectado a través de técnicas de microbiología convencional y mediante la reacción en cadena de la Polimerasa. Los pacientes fumadores presentaron mayor presencia de P. gingivalis que los no fumadores.

The detection of Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) was performed in adult patients with chronic periodontitis treated at the Clinic of Periodontology in the University of Antofagasta, through of microbiology techniques conventional and molecular biology. Were obtained samples of gingival crevicular fluid with paper cones (N 30) for 20 seconds of the more severe periodontal site in each quadrant, 37 patients were studied with chronic periodontitis, subsequent microbiological culture was performed on blood agar and the presence of P. gingivalis was detected through conventional microbiology techniques (fluorescence and stereomicroscope) and molecular biology technique (polymerase chain reaction). There was detected with stereomicroscope pigmented black in 75.7 % of the samples, of which 67.9 % were positive for P. gingivalis with the fluorescence technique. Through the polymerase chain reaction it was confirmed that 84.2 % of fluorescence positive colonies corresponded to P. gingivalis. In the population analyzed can conclude that there is a high prevalence of P. gingivalis in the subgingival microbiota of patients with chronic periodontitis which has been detected through techniques of conventional microbiology and by polymerase chain reaction. The smokers had a higher presence of P. gingivalis than nonsmokers.

Porphyromonas gingivalis Fim-A genotype distribution among Colombians / Distribución del genotipo Fim-A de Porphyromonas gingivalis entre la población colombiana

Introduction: Porphyromonas gingivalis is associated with periodontitis and exhibit a wide array of virulence factors, including fimbriae which is encoded by the FimA gene representing six known genotypes. Objetive: To identify FimA genotypes of P. gingivalis in subjects from Cali-Colombia, including the co-infection with Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Treponema denticola, and Tannerella forsythia. Methods: Subgingival samples were collected from 151 people exhibiting diverse periodontal condition. The occurrence of P. gingivalis, FimA genotypes and other bacteria was determined by PCR. Results: Porphyromonas gingivalis was positive in 85 patients. Genotype FimA II was more prevalent without reach significant differences among study groups (54.3%), FimA IV was also prevalent in gingivitis (13.0%). A high correlation (p= 0.000) was found among P. gingivalis, T. denticola, and T. forsythia co-infection. The FimA II genotype correlated with concomitant detection of T. denticola and T. forsythia. Conclusions: Porphyromonas gingivalis was high even in the healthy group at the study population. A trend toward a greater frequency of FimA II genotype in patients with moderate and severe periodontitis was determined. The FimA II genotype was also associated with increased pocket depth, greater loss of attachment level, and patients co-infected with T. denticola and T. forsythia.

Introducción: Porphyromonas gingivalis es una bacteria asociada con la periodontitis. Expresa una amplia gama de factores de virulencia, incluyendo las fimbrias, las cuales están codificadas por el gen FimA que representa seis genotipos conocidos. Objetivo: Identificar los genotipos de FimA de P. gingivalis en pacientes de Cali - Colombia, incluyendo la co -infección con Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Treponema denticola y Tannerella forsythia. Métodos: Se obtuvieron muestras subgingivales de 151 individuos con diferentes diagnósticos periodontales. La ocurrencia de P. gingivalis, los genotipos de FimA y otras bacterias se determinó por PCR. Resultados: Porphyromonas gingivalis fue positiva en 85 pacientes. El genotipo FimA II fue más prevalente, pero no hubo diferencias significativas entre los grupos de estudio (54.3%), FimA IV fue el más frecuente en la gingivitis (13.0%). Una alta correlación (p= 0.000) se encontró entre P. gingivalis , T. denticola y T. forsythia. El genotipo FimA II estuvo correlacionado con la detección de T. denticola y T. forsythia. Conclusiones: Porphyromonas gingivalis tuvo una alta frecuencia incluso en el grupo de individuos sanos. Se encontró una tendencia hacia una mayor frecuencia de FimA II en pacientes con periodontitis moderada y severa. El genotipo FimA II también se asoció con una mayor profundidad de la bolsa, una mayor pérdida de nivel de inserción, y con los pacientes en los que se detectó co-infección con T. denticola y T. forsythia.

Subgingivally applied minocycline microgranules in subjects with chronic periodontitis: a randomized clinical and microbiological trial / Microgránulos de minociclina subgingival en sujetos con periodontitis crónica. Estudio clínico y microbiológico aleatorizado

El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto clínico y microbiológico de microgránulos de Minociclina, colocados subgingivalmente como coadyuvante del raspaje y alisado radicular en pacientes con Periodontitis crónica severa. Participaron 26 sujetos voluntarios con Periodontitis crónica, no fumadores. Se seleccionaron 4 sitios contralaterales con Sangrado al Sondaje (SS) y Profundidad al Sondaje (PS) > 6 mm. Condición Basal (CB): se registró, PS y Nivel de Inserción (NI). Se determinó mdiante PCR la presencia de Porphyromonas gingivalis (Pg), Tannerella forsythia (Tf), Treponema denticola (Td) y Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa). Un lado de la boca fue aleatoriamente asignado al tratamiento experimental: grupo T, el otro al tratamiento control: grupo C. Al día 30 y 90 se repitieron los exámenes clínicos y microbiológicos. Día 30: el SS se redujo al 81 por ciento en el grupo C y al 12 por ciento en el grupo T (p<0,05). Estas diferencias se mantuvieron al día 90 (C: 58 por ciento, T: 8 por ciento) (p<0.05). Día 30 y 90: hubo disminución de la PS en ambos grupos, siendo significativamente mayor en el grupo T (p<0,05). En ambos grupos hubo disminución significativa del NI (p<0,05), no hubo diferencias entre los grupos al día 30 y sí al día 90. A los 30 y 90 días en ambos grupos se redujo la prevalencia para Pg, Tf ,Td y Aa. A los 30 y 90 días la reducción de sitios con Pg fue mayor en el grupo T (p=0,002). A los 90 días Td disminuyó en el grupo T y aumentó en el grupo C (p=0,023). No se observaron efectos adversos. Los resultados mostraron que la aplicación subgingival de microgránulos de minociclina adjunta al raspaje y alisado radicular produjo una reducción mayor del SS, la PS y el NI que el raspaje y alisado solo, aumentó la probabilidad de suprimir Pg y retardó la recolonización con Td.

The aim of this study was to evaluate clinical and microbiological effects of subgingival minocycline microgranules when used as an adjunct to scaling and root planing in subjects with Chronic periodontitis. Twenty-six non-smoker volunteers participated in the study. Four opposite sites, clinically standardized, with bleeding on probing (BOP) and pocket depth (PD) ≥ 6 mm were selected. Baseline BOP, PD and Clinical attachment level (CAL) were measured and microbiological samples were collected from the study sites and analyzed using PCR. Porphyromonas gingivalis (Pg) Tannerella forsythia (Tf), Treponema denticola (Td) and Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) were detected. One side of the mouth was randomly allocated to the experimental treatment: scaling and root planing plus minocycline microgranules (Test group=T) and the other side of the mouth toscaling and root planing alone (Control group=C). At days 30 and 90, clinical and microbiological examination was repeated. After 30 days BOP was reduced to 81% in C and to 12% in T and at day 90 to 58% in C and to 8% in T (p<0.05). PD wassignificantly reduced in both groups (C: 4.8mm, T: 4.2mm) favoring T at days 30 and 90 (p<0.05). CAL reduction at day 30 showed no difference between groups. At day 90, CAL reduction was higher in T (p<0.05). At days 30 and 90 Pg, Tf, Td and Aa was reduced in both groups. Pg reduction wassignificantly greater in group T. At day 90 frequency of sites with Td decreased in T and increased in C (p<0.05). No adverse effect was observed. This study showed that minocycline microgranules adjunct to scaling and root planing resulted in grater reduction of BOP and PD, higher CAL gain, increased probability of Pg suppression and retarded recolonization of Td than root instrumentation alone.

Association between periodontal condition and subgingival microbiota in women during pregnancy: a longitudinal study

Objectivo In this study, the gingival conditions and the quantitative detection for Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis and Prevotella intermedia in pregnant women were determined. Material and Methods Quantitative determinations of periodontal bacteria by using a SyBr green system in women during pregnancy were performed. Women at the 2nd and 3rd trimesters of pregnancy and non-pregnant women were included in this study. A. actinomycetemcomitans was observed in high numbers in women at the 2nd and 3rd trimesters of pregnancy with a significant difference (p<0.05). F. nucleatum and P. intermedia were also observed in high levels. Results and Conclusion Our results show that pregnant women are more susceptible to gingivitis, and the presence of A. actinomycetemcomitans in subgingival biofilm might be taken into account for the treatment of periodontal disease. .

Microbiological effects of periodontal therapy plus azithromycin in patients with diabetes: results from a randomized clinical trial

Evidencia actual sugiere que la infección periodontal puede agravar el control de la diabetes. El objetivo de este estudiofue determinar los cambios en la frecuencia de detección de porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola y Aggregatibacter actinomycetemcomitans en pacientes con diabetes con el uso de terapia mecánica no quirúrgica mas azitromicina en un estudio clínico controlado aleatorizado.Ciento cinco pacientes (105) con diabetes y perio -dontitis fueron asignados aleatoriamente en tres grupos: terapiamecánica mas azitromicina, terapia mecánica mas placebo y profilaxis supragingival mas azitromicina. Un análisis periodontal completo y detección de patógenos perio dontales por medio de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se realizaron al inicio, 3, 6 y 9 meses después de la terapia pe -riodontal. La frecuencia de detección de Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola y Aggregatibacter actinomycetemcomitans disminuyó a los 3 meses en todos los grupos. La frecuencia de detección de Tannerella forsythia se incrementó a los 3 meses en todos los grupos. Todos los patógenosperiodontales mostraron una frecuencia de detección similar a los 9 meses en todos los grupos. La terapia periodontal mas azitromicina no tuvo efectos adicionales sobre la frecuencia dedetección de los patógenos periodontales investigados en pacientes diabéticos...

Occurrence of Porphyromonas gingivalis and its antibacterial susceptibility to metronidazole and tetracycline in patients with chronic periodontitis

La periodontitis crónica es una enfermedad infecciosa multifactorialasociada a bacilos Gram-negativos anaeróbicos estrictos que se encuentran inmersos en la biopelícula subgingival. Porphyromonas gingivalis, importante patógeno periodontal, es frecuentemente detectado en pacientes con periodontitis crónica. Los aislamientos clínicos de P. gingivalis tienden a ser susceptibles a la mayoría de agentes antimicrobianos; sin embargo, se tiene poca información sobre la susceptibilidad antimicrobiana invitro. El objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia de P. gingivalis en pacientes con periodontitis crónica y determinar la susceptibilidad antimicrobiana en términos de concentración inhibitoria mínima (CIM) de los aislamientos clínicos a metronidazol y tetraciclina. Se realizó un estudio observacional descriptivo enel que se incluyeron 87 pacientes con periodontitis crónica. Las muestras tomadas con conos de papel de la bolsa periodontal se depositaron en caldo tioglicolato, se incubaron durante 4 horas a 37 oC en anaerobiosis y se resembraron en agar anaeróbico Wilkins-Chalgren (Oxoid). La identitficación de los aislamientos serealizó con el sistema RapIDTM ANA II (Remel) y la susceptibilidadantibiótica para metronidazol y tetraciclina se evaluó mediante la técnica M.I.C.Evaluator (M.I.C.E., Oxoid). En 30 de los 87 pacientes con periodontitis crónica se identificó P. gingivalis, lo que representa una frecuencia de 34.5 por ciento. Todos los 30 aislamientos (100 por ciento) fueron sensibles al metronidazol con valores de CIM desde 0.015 hasta 4 ug/ml. En cuanto a tetraciclina, 27 aislamientos(90 por ciento) fueron sensibles con valores de CIM desde <0.015 hasta4 ug/ml; los restantes 3 aislamientos (10%) fueron resistentes a tetraciclina con valores de CIM de 8 ug/ml. En cuanto a edad, género, profundidad de bolsa, nivel de inserción clínico y severidad de la periodontitis no se presentaron diferencias estadísticamentesignificativas

Evaluación de la terapia mecánica periodontal en bolsas profundas: respuesta clínica y bacteriológica / Evaluation of periodontal mechanical therapy in deep pockets: Clinical and bacteriological response

Objetivos: Evaluar la composición microbiológica y los parámetros clínicos de bolsas periodontales >5 mm de profundidad al inicio, 1 semana, 3 y 12 meses post raspado y alisado radicular. Materiales y Métodos: Se tomaron registros clínicos y muestras de placa subgingival de 44 sitios de pacientes con diagnóstico de periodontitis crónica. Se identificaron por técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) patógenos putativos periodontales: Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Treponema denticola (Td), Tannerella forsythia (Tf) y Prevotella intermedia (Pi). Los pacientes recibieron terapia mecánica periodontal y fueron reevaluados a los 7 días, 3 y 12 meses. Resultados: Luego del tratamiento, todos los parámetros clínicos (Placa Bacteriana, Hemorragia, Supuración, Profundidad al Sondaje y Nivel de Inserción Clínica) se redujeron significativamente y los valores obtenidos se mantuvieron hasta los 12 meses. Al inicio, las especies bacterianas prevalentes fueron Pg, presente en 66 por ciento de los sitios, Tf (55 por ciento) y Td (41 por ciento). Los sitios más profundos se relacionaron con las asociaciones Tf-Td (6.8 mm) y Tf-Td-Pi (7 mm). Post terapia, el número de sitios positivos para Td, Tf y Pg se redujo significativamente. Conclusiones: El raspado y alisado radicular mejoró significativamente los parámetros clínicos y redujo la prevalencia de los patógenos periodontales Pg, Tf y Td en bolsas periodontales profundas. Los resultados obtenidos se mantuvieron hasta los 12 meses. No se detectaron mayores pérdidas de inserción clínica en el 86 por ciento de los sitios a 3 meses y en 79 por ciento a los 12 meses. Los sitios en los que el tratamiento no fue efectivo en la eliminación de patógenos a los 12 meses desarrollaron mayores profundidades de sondaje.

Objectives: To evaluate the microbial composition and clinical parameters of periodontal pockets with probing depth >5 mm at baseline, 1 week, 3 and 12 months after scaling and root planning. Methods: Clinical parameters were measured and bacterial samples were collected from 44 sites in 11 patients with chronic periodontitis. By means of Polymerase Chain Reaction (PCR) the presence of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa), Porphyromonas gingivalis (Pg), Treponema denticola (Td), Tannerella forsythia (Tf) and Prevotella intermedia (Pi) was estimated. The patients received mechanical periodontal therapy and were evaluated after 1 week, 3 months and 12 months. Results: After treatment, all clinical parameters (Plaque, Bleeding on Probing, Supuration, Probing Pocket Depth and Clinical Attachment Level) were significantly reduced, and the values obtained were maintained up to the 12 months that the study lasts. At baseline, the most prevalent species were Pg, present in 66 percent of the sites, Tf (55 percent) and Td (41 percent). The deepest sites were related to the association Tf-Td (6.8 mm) and Tf-Td-Pi (7 mm). The number of positive sites for Td, Tf and Pg was significantly reduced after therapy. Conclusions: Scaling and root planning improve significantly clinical parameters as well as reduce the prevalence of periodontal pathogens Pg, Td and Tf in deep periodontal pockets. The results obtained were maintained up to 12 months. No further clinical attachment loss was found in 86 percent of the sites at 3 months and 79 percent at 12 months. The sites where the treatment failed in removing pathogens developed at 12 months greater probing pocket depths.

Genotipificación de los genes rgpA y kgp que codifican para las gingipaínas de Porphyromonas gingivalis / Genotyping of rgpA and kgp genes encoding Pophyromonas gingivalis gingipains

Porphyromonas gingivalis es un microorganismo fuertemente asociado con la etiología de la periodontitis. Esta bacteria posee varios factores de virulencia, dentro de los que destacan las gingipaínas, debido a sus múltiples acciones relacionadas con la destrucción de la matriz extracelular del tejido conectivo periodontal, la modulación del sistema inmune del hospedero y la estimulación de la expresión de citoquinas pro-inflamatorias. Estas proteinasas tienen afinidades específicas siendo Arg-gingipaínas (RgpA y RgpB, codificadas por los genes rgpA y rgpB, respectivamente) y Lys-gingipaínas (Kgp, codificada por el gen kgp). Se ha descrito que existen polimorfismos en los genes que codifican para esta proteinasas. El objetivo del presente estudio fue describir la frecuencia de los genotipos identificados para los genes rgpA y kgp en aislados clínicos de P. gingivalis, obtenidos desde pacientes con periodontitis. Para ello se utilizó amplificación por PCR de los genes rgpA y kgp, seguido de análisis de restricción. De un total de 47 aislados provenientes de 4 individuos con periodontitis crónica y 2 con periodontitis agresiva, se genotipificaron 38 aislados para el gen rgpA, exhibiendo la totalidad de éstos el patrón electroforético A (100 por ciento). Para el gen kgp se genotipificaron 43 aislados, presentando 28 de ellos (65.2 por ciento) el perfil electroforético kgp-I y 15 aislados (34.8 por ciento) el perfil kgp-II. En los aislados provenientes de un individuo fue posible apreciar ambos genotipos descritos para el gen kgp. Los resultados indican un predominio del patrón electroforético A (rgpA) y que el genotipo kgp-I fue el más frecuentemente encontrado de los genotipos kgp.

Porphyromonas gingivalis is a microorganism strongly associated with the etiology of periodontitis. This periodontal bacterium possesses an array of virulence factors, among which gingipains have a key importance, being involved with extracellular matrix destruction of periodontal tissues, modulation of host immune response and stimulation in the production of pro-inflammatory cytokines by different types of cells. These proteinases have specific affinities, being Arg-gingipains (RgpA and RgpB, encoded by rgpA and rgpB genes, respectively) and Lys-gingipains (Kgp, encoded by the kgp gene). It has been described that there are polymorphisms in the genes encoding for gingipains. Therefore, the aim of the present study was to describe the frequency of rgpA and kgp genotypes in clinical isolates of P. gingivalis obtained from periodontitis patients. For determining the rgpA and kgp genotypes, we used PCR amplification and restriction analysis. From 47 isolates obtained from 4 individuals with chronic periodontitis and 2 subjects with aggressive periodontitis, 38 were typified for rgpA gene and all exhibited the electrophoretic pattern A (100 percent). For kgp gene, we characterized 43 isolates, 28 of them (65.2 percent) with the kgp-I electrophoretic profile and 15 isolates (34.8 percent) with the kgp-II profile. In the isolates belonging to one individual, we found both genotypes of kgp gene. The results indicate a clear predominance of the electrophoretic pattern A (for rgpA gene) and kgp-I genotype was the most frequently found of the kgp genotypes.