Producción de suero de Coombs en carneros inmunizados con globulinas humana opsonizadas / Coombs serum production in sheep immunized with human globulin opsonized

Se obtuvo suero antiglobulínico (Coombs) con el empleo de un inóculo consistente en un inmunocomplejo (IC) inmunoglobulina (Ig) humana-antiglobulina humana en carnero, como opsonina para favorecer la respuesta inmune. Se inmunizaron 18 carneros divididos en 3 grupos de 6: el primero y el segundo destinados a producir anti-IgG y anti-C3, respectivamente. Estos, a su vez, subdivididos en subgrupo A: en el que se empleó el método tradicional de obtención de suero de Coombs; y B: en el que se usó el adyuvante completo de Freud en la dosis inicial y el IC en la fase de mantenimiento. Al tercer grupo solo se le administró el IC puro (subgrupo A) y en una dilución 1:200 (subgrupo B). En los carneros de los subgrupos 1B y 2B se obtuvieron títulos más elevados de anti-IgG y anti-C3dg, que en los inmunizados por el método tradicional. La respuesta de anticuerpos en los animales que se inmunizaron con los IC (3A y 3B), fue más rápida y de mayor título que las obtenidas por el método tradicional (1A y 2A) o el método combinado (1B y 2B). La respuesta en el subgrupo 3B fue más prolongada, al parecer por un efecto de dosis

An antiglobulin serum (Coombs) was obtained using a consistent inoculums in a immunocomplex (IC) the human immunoglobulin (Ig)/human antiglobulin in the seep by example, the opsonin to favor the immune response. Eighteen sheeps were immunized divided into three groups of 6 each: The first and second aimed to produce anti-IgG and anti-C3, respectively. In turn, these were divided into the A subgroup: in which we used the traditional method of Coombs's serum obtaining and B group in which we used the Freud's whole adjuvant in initial dose and the IC in the maintaining phase. Third group received the pure IC (A subgroup) and at a dilution of 1:200 (B subgroup). In sheeps from the 1B and 2B subgroups it was possible to obtain higher titration of anti-IgG and anti-C3dg than those immunized by means of the traditional method. The antibody response in animals immunized with the ICs (3A and 3B) was faster and of higher titration than those obtained by traditional method (1A and 2A) or the combined method (1B and 2B). The response in the 3B subgroup was lengthier apparently by a dose effect

Phagocytosis of serum-and IgG-opsonized zymos an particles induces apoptosis through superoxide but not nitric oxide in macrophage J774A.1

Phagocytosis of serum- and IgG-opsonized zymosan (SOZ and IOZ, respectively) particles into J774A.1 macrophages induced apoptosis of the cells, accompanied by the expression of p21(WAF1), one of cyclin-dependent protein kinase (CDK) inhibitors. Furthermore, phagocytosis of SOZ and IOZ particles into macophages induced superoxide formation. Tat-superoxide dismutase (SOD), which is readily transduced into the cells using Tat-domain, protected the cells from the apoptosis induced by phagocytosis of SOZ and IOZ particles. lipopolysaccharide (LPS)/interferon-gamma (IFN-gamma) also caused the apoptosis of the cells. However, Tat-SOD could not protect the cells from LPS/IFN-gamma induced apoptosis, suggesting that apoptosis mechanisms involved are different from each other. In the present study, we determined the amounts of nitric oxide (NO) produced by SOZ, IOZ, and LPS/IFN-gamma, and found that SOZ and IOZ did not induce the generation of NO in macrophages, whereas LPS/ IFN-gamma did. The apoptosis due to phagocytosis was accompanied with the release of cytochrome c from mitochondrial membrane to cytosolic fraction. Furthermore, SOZ and IOZ induced the cleavage of procasapase-3 (35 kDa) to give rise to an active caspase-3 (20 kDa), which was blocked by Tat- SOD but not by 2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl 3-oxide (PTIO), a scavenger of NO. On the other hand, LPS/IFN-gamma caused the activation of procaspase-3, which was blocked by PTIO but not by Tat-SOD. Taken together, phagocytosis of SOZ and IOZ particles induced apoptosis through superoxide but not NO in macrophages, accompanied with the release of cytochrome c and the activation of caspase-3.

Fagocitosis opsónica de Histoplasma capsulatum / Opsonic phagocytosis of Histoplasma capsulatum

Objetivo: El presente trabajo hace una breve revisión de la escasa literatura existente sobre el papel que desempeñan los receptores Fcç participan en la fagocitosis de levaduras del hongo Histoplasma capsulatum por fagocitos humanos y murinos. Conclusiones: Resultados de diferentes ensayos sugieren que los receptores Fcç participan en la etapa de internalización, aunque parecen no ser los receptores preferenciales para la entrada del hongo a las células fagocíticas murinas

Flow cytometric quantitation of phagocytosis in heparinized complete blood with latex particles and Candida albicans

Se da cuenta de un método rápido para la cuantización del flujo citométrico de la fagocitosis en sangre periférica completamente heparinizada (HCPB), mediante la utilización de partículas de látex phycoerythrin-conjugadas de 1µm de diámetro disponibles comercialmente. El método es más rápido y presenta mayor reproducibilidad que la técnica estandar de Bjerknes' (1984) utilizando propidium iodide-teñida Candida albicans, aplicada convencionalmente a la capa leucocitica de sangre periférica pero modificada por HCPB. Tambien damos cuenta de una modificación de Bjerknes' Intracellular Killing Test para permitir su aplicación a HCPB.

We report a rapid method for the flow cytometric quantitation of phagocytosis in heparinized complete peripheral blood (HCPB), using commercially available phycoerythrin-conjugated latex particles of 1 micron diameter. The method is faster and shows greater reproducibility than Bjerknes' (1984) standard technique using propidium iodide-stained Candida albicans, conventionally applied to the leukocytic layer of peripheral blood but here modified for HCPB. We also report a modification of Bjerknes' Intracellular Killing Test to allow its application to HCPB.

Opsonophagocytosis and intracellular killing activity of neutrophils in patients with human immunodeficiency virus infection.

In this study, neutrophils isolated from asymptomatic HIV positive individuals, patients with AIDS-related complex (ARC), ARC patients receiving zidovudine (AZT) and full-blown AIDS patients were assayed for their opsonophagocytic and intracellular killing activities. Progressively decreasing opsonophagocytosis of C. albicans by neutrophils correlated with increasing severity of the disease in all groups of HIV infected individuals, as compared to neutrophils isolated from healthy controls. The intracellular killing of C. albicans by neutrophils of asymptomatic and ARC patients did not differ significantly from controls. Neutrophils of ARC patients receiving AZT and AIDS patients showed a slightly decreased killing activity in comparison to that of neutrophils from healthy controls.

Elevated polymorphonuclear phagocytic function in thalassemia patients by chemiluminescence.

Twenty five patients with beta thalassemia major, with no evidence of infection were evaluated for their polymorphonuclear cell (PMN) metabolic function and serum opsonic activity by chemiluminescence assay. These were divided into Group I of normal adults (n = 21), Group II thalassemia major < 5 years (n = 9) and Group III thalassemia major > 5 years (n = 16). The ability of the chemiluminescence assay (CL) to reflect opsonic and phagocytic dysfunction suggested its potential application in the evaluation of phagocytic function. The peak count of Group I was (1.07 +/- 0.24 x 10(-5)), Group II (1.60 +/- 0.83 x 10(-5)) and Group III was (2.71 +/- 0.98 x 10(-5)) respectively in the presence of autologous sera. The peak count compared between Group I and III was found to be statistically significant (p < 0.05). The peak count of Group I and II when compared showed a trend in the increase activity not statistically significant. The polymorph function of all the groups were compared with autologous serum as well as normal serum. There was no increase in polymorph function of Group III in the presence of thalassemia serum, nor any decrease in the polymorph function of thalassemia patients of Group II and III. This concluded that polymorphs of thalassemia patients are active in the presence of autologous as well as normal serum. The increased activity of thalassemia polymorphs may be due to antigenic stimulation which may be due to multiple transfusion and not due to circulating iron load.

Capacidad fagocítica y lítica de neutrófilos en artritis reumatoidea y lupus eritematoso sistémico / Phagocytic capacity and lysis of neutrophil in rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus

La capacidad fagocítica y lítica de Polimorfonucleares neutrófilos (PMNn) frente a Cándida albicans, fue evaluada en pacientes con Artritis Reumatoidea (AR) y pacientes con Lupus Eritematoso Sistémico (LES) a través de um método citomorfológico. En ambos grupos hubo una tendencia a la disminución de la función fagocítica, cuando se opsonizaron las cándidas con suero de sujetos normales, mientras que la actividad lítica evidenció un incremento solo en pacientes con AR. Hubo una reducción de la capacidad opsónica del suero de pacientes, que indujo una disminución en la función fagocítica, tanto en PMNn de pacientes como en PMNn de sujetos normales, pero con un incremento en la actividad lítica. Estos resultados sugieren que la alteración funcional observada en PMNn de estos pacientes, podría resultar de una combinación de defectos celulares y efectos de factores humorales, aunque el principal protagonista de la disfunción celular parece ser debida a componentes humorales

Resposta do hospedeiro à infecçäo: inativaçäo de mediadores e morte do agressor / Host reatios to infection: bacterial inactivation and villing

A emigraçäo do leucócito até o local de agressäo subseqüente às adaptaçöes físico-químicas do tecido inflamatório que permitem os processos de marginaçäo, aderência endotelial, permeabilidade vascular e diapedese. A movimentaçäo extravascular do leucócito no sentido do agressor é orientada pelo gradiente químico dos fatores quimiotáticos. O reconhecimento do agressor pelo fagócito é feito graças á identificaçäo da opsonina ligada previamente á parede do microorganismo. A opsonizaçäo pode ocorrer pelas imunoglobulinas nativas ou entäo por outras, específicas, sintetizadas pelos linfócitos B após transformaçäo blástica iniciada pela interaçäo do antígeno com o macrófago e concomitante liberaçäo do fator solúvel Interleucina 1. Este fator juntamente com outras monoquinas respondem pela proliferaçäo e maturaçäo das células T atuantes na imunidade celular destruindo inespecificamente os microorganismos via macrófagos, células T citotóxicas e células matadoras naturais. O complexo antígeno-anticorpo ativa também a série de reaçöes em cascata do sistema complemento cujos componentes atuam como opsonizantes, quimiotáticos, ativadores celulares e agentes bactericidas. O contacto com receptores específicos da membrana do fagócito desencadeia, nesta, alteraçöes morfológicas caracterizadas pela formaçäo da vesícula fagocítica e pelo processo de degranulaçäo, concomitantes às modificaçöes fisiológicas da eclosäo respiratória e destruiçäo bacteriana. A atividade bactericida do fagolisossomo é dada pela açäo isolada ou associada das proteases lisossômicas e das formas reativas do oxigênio geradas pela eclosäo respiratória

Capacidad de reconocimiento opsónico de los neutrófilos polimorfonuclearees de niños desnutridos / Opsonic recognition capacity of polymorphonuclear neutrophils in malnourished children

La capacidad de reconocimiento opsónico de los neutrófilos polimorfonucleares (PMNs) fue evaluada en 19 niños no infectados (13 eutróficos y 6 desnutridos) y en 22 niños infectados (10 eutróficos y 12 desnutridos) por determinación de la capacidad de formación de rosetas (NFR) de los PMNs frente a eritrocitos de carnero. Al evaluar el porcentaje de NFR, no observamos diferencias significativas entre los PMNs de niños eutróficos y desnutridos sin infección (70.2 ñ 5% vs 67 ñ 3% respectivamente, P > 0.05). Por otra parte, la capacidad de reconocimiento opsónico de niños con infección bacteriana aguda, se encontró significativamente disminuida tanto en eutróficos (54.4 ñ 5.8) como en desnutridos (42.8 ñ 5%, P < 0.01), al compararlos con los no infectados. Sin embargo, los desnutridos con complicación infecciosa presentaron un porcentaje de NFR significativamente menor al compararlos con los niños eutróficos e infectados (42.8 ñ 5% vs 54.4 ñ 5.8%, P < 0.05). Estos resultados indican que la capacidad de reconocimiento opsónico de ls PMNs disminuye durante los procesos infecciosos bacterianos. Debido al papel crítico de los PMNs como mecanismo de defesa frente a las infecciones, la mayor disminución de la capacidad de reconocimiento opsónico de los PMNs observada en niños desnutridos con infección, podría constituir una explicación adicional para la mayor morbi-mortalidad de los procesos infecciosos observados en niños desnutridos. Neutrófilos polimorfonucleares; capacidad de reconocimiento opsónico; en infección; en desnutrición