Eficacia y seguridad de las vacunas de ARNm contra COVID-19 en adolescentes / Efficacy and security of vaccines of mRNA against COVID-19 in adolescents

INTRODUCCIÓN: La enfermedad por el coronavirus 2019 (COVID-19) causada por el coronavirus 2 del Síndrome respiratorio agudo grave o SARS-CoV-2 fue inicialmente reportada en Wuhan, China en diciembre de 2019. El 30 de enero de 2020 la OMS determinó que la COVID-19 representaba una emergencia de salud pública de importancia internacional y posteriormente el 11 de marzo del 2020 fue declarada como pandemia. A partir de diciembre de ese mismo año, se inició la vacunación contra la COVID-19 en el mundo. La Administración de Alimentos y Medicamentos (FDA) de los Estados Unidos, el 11 de diciembre de 2020, emitió una autorización de uso de emergencia (EUA) para la vacuna de tipo ARNm BNT162b2 desarrollada por Pfizer-BioNTech para su uso en personas a partir de los 16 años. En base a los resultados de un ensayo clínico de fase 3 (2), esta EUA se amplió para adolescentes de 12 a 15 años el 10 de mayo de 2021. En el Perú, el Ministerio de Salud (MINSA) aprobó la utilización de la vacuna BNT162b2/Pfizer-BioNTech en adolescente de 12 a 17 años con comorbilidades específicas a partir del mes de junio en base a la autorización de la Dirección General de Medicamentos (DIGEMID) (3). Hasta la fecha de la redacción de este informe, 17 de setiembre de 2021, en el Perú se habían administrado 18 953 dosis (1° dosis: 14 958 y 2° dosis: 3 995) de la vacuna de Pfizer-BioNTech en adolescentes de 12 a 16 años. OBJETIVO: Sintetizar la evidencia disponible sobre la eficacia, efectividad y seguridad de las vacunas contra COVID-19 basadas en ARN mensajero (ARNm) en adolescentes de 12 a 17 años. METODOLOGÍA: Pregunta PICO abordada: En adolescentes de 12 a 17 años ¿la administración de vacunas de ARNm contra COVID-19 es eficaz y segura? Criterios de elegibilidad: Los criterios de selección de los estudios fueron los siguientes: Estudios que corresponden a la pregunta PICO planteada y que reporten resultados para al menos uno de los desenlaces considerados. Los estudios que incluyeron adultos y adolescente fueron incluidos si reportaban resultados desagregados para la población de interés. Idioma: inglés, español y portugués. Se incluyeron estudios publicados y manuscritos sin revisión por pares (pre-print). Se excluyeron cartas al editor, revisiones narrativas, estudios preclínicos (estudios in vitro o en modelos animales) y artículos de opinión. Las cartas al editor, cartas de investigación y comentarios fueron incluidos sólo si brindaban datos suficientes sobre las características de los participantes, intervención y desenlaces. Las revisiones sistemáticas recuperadas y las referencias de las publicaciones relevantes fueron analizadas para identificar estudios adicionales que cumpliesen con los criterios de selección establecidos. Métodos de búsqueda: La búsqueda sistemática se realizó en MEDLINE/Pubmed, medRxiv (un servidor de distribución de manuscritos aún no publicados, sin revisión por pares) y en la Plataforma Living Overview of the Evidence (L·OVE) de la Fundación Epistemonikos, con fecha 15 y 16 de setiembre de 2021, incluyendo términos en lenguaje natural y lenguaje estructurado (Tesauros), según cada base de datos, para adolescentes y las vacunas de ARNm consideradas. Los resultados de las búsquedas fueron importados al gestor de referencias Zotero versión 5.0.96.3 para la identificación y eliminación de los artículos duplicados. Esta etapa fue realizada por una sola autora. Selección de evidencia y extracción de datos: La selección de estudios consideró una fase inicial de lectura de títulos y resúmenes, realizada de manera pareada e independiente por dos autoras utilizando el software Rayyan®, seguida de una fase de lectura del texto completo de las referencias potencialmente relevantes identificadas. Para la extracción de datos se utilizó una plantilla diseñada en Google Sheets. La selección por texto completo y la extracción de datos fue realizada de forma individual por cada autora. Análisis de los datos: Se realizó una síntesis narrativa de los datos extraídos. No se consideró la realización de un meta-análisis debido a la heterogeneidad de los estudios identificados (tipo de intervención y diseño de estudio). Evaluación de certeza de la evidencia: En un primer paso se realizó la evaluación de riesgo de sesgo de los estudios incluidos utilizando herramientas de acuerdo al diseño de investigación. Se empleó la Herramienta para evaluar riesgo de sesgo de ensayos clínicos aleatorizados de la Colaboración Cochrane versión 2 (RoB 2)(8) y para las series de caso, se empleó la lista de verificación para evaluación crítica de Joanna Briggs Institute para series de casos (9) (preguntas 1-8 y 10) y la herramienta para evaluar la calidad metodológica de reportes de caso y series de casos de Murad et al.(10) (ítems 4 y 8). En una segunda etapa, los estudios con mejor calidad metodológica o menor riesgo de sesgo fueron considerados para la evaluación de la certeza de la evidencia según la metodología GRADE, que toma en cuenta los siguientes criterios: diseño del estudio, riesgo de sesgo, inconsistencia en los resultados, ausencia de evidencia directa, imprecisión, sesgo de publicación, tamaño de efecto, gradiente dosis-respuesta, y efecto de los potenciales factores de confusión residual (los tres últimos aplicables en estudios observacionales)(11,12). RESULTADOS: Se identificaron 303 citaciones. Luego de la eliminación de duplicados, tamizaje de títulos y resúmenes y lectura de textos completos, se seleccionaron 13 estudios, reportados en 14 artículos (1 estudio con 2 reportes de diferentes periodos de seguimiento). Dos artículos estuvieron disponibles como pre-print. CONCLUSIONES: El objetivo del presente documento fue sintetizar la evidencia científica disponible respecto a la eficacia y seguridad de las vacunas basadas en ARNm en adolescentes de 12 a 17 años, específicamente para la vacuna BNT162b2 de Pfizer-BioNTech y la vacuna mRNA-1273 desarrolada por Moderna. Se identificaron 2 ensayos clínicos aleatorizados que evaluaron la eficacia y seguridad de estas vacunas, además de 11 series de caso que reportan la ocurrencia de miocarditis luego de la vacunación en adolescentes de 12 a 17 años. La eficacia de 2 dosis de BNT162b2 para prevenir COVID-19 (infección sintomática) en participantes de 12 a 15 años, se estimó en 100% (IC 95%: 75.3 ­ 100) (1983 participantes, con un seguimiento de al menos 2 meses en el 58% de ellos). Para el subgrupo de 16 a 17 años, esta eficacia se estimó en 100% (IC 95%: 58.2­100.0) (673 participantes, con un seguimiento de hasta 6 meses luego de la 2o dosis). La certeza de la evidencia es moderada debido a imprecisión. La eficacia del esquema de 2 dosis con la vacuna mRNA-1273 para prevenir COVID-19 en adolescentes de 12 a 17 años es de 93.3% (IC 95%: 47.9 - 99.9) (1 ensayo clínico aletorizado, 3181 participantes, seguimiento de 53 días luego de la 2o dosis). La certeza de evidencia es moderada debido a imprecisión. Se desconoce la eficacia de la vacunación con BNT162b2 ó mRNA-1273 para prevenir COVID-19 severo y mortalidad, ya que no se observaron estos eventos en los ensayos clínicos identificados. La incidencia de eventos adversos serios en el grupo de adolescentes de 12 a 15 años vacunados con BNT162b2, fue mayor a lo reportado en el grupo placebo (Incidencia de 0.4% versus 0.1%, riesgo relativo (RR): 3.99 (IC 95%: 0.45 a 35.67) (1 ensayo clínico, 2260 participantes). Ninguno de estos eventos fue catalogado como relacionado a la vacunación. La certeza de la evidencia es baja debido a imprecisión muy seria. La incidencia de eventos adversos serios, entre adolescentes de 12 a 17 años que recibieron la vacuna mRNA-1273 fue similar a lo reportado por el grupo placebo (Incidencia de 0.1% versus 0.1%, RR: 1.00 (IC 95%: 0.09 a 10.99) (1 ensayo clínico, 3276 participantes). Ninguno de estos eventos estuvo relacionado con la intervención recibida. La certeza de la evidencia es baja dado debido a imprecisión muy seria. El mayor número de casos de miocarditis reportados en las series fue de 397 y ocurrieron con mayor frecuencia en el sexo masculino y luego de la 2o dosis de la vacuna BNT162b2. El tiempo de inicio de síntomas fue de 2 días, rango de 1 a 7 días, luego de la 2o dosis. En su mayoría, los casos se caracterizaron por dolor torácico, elevación de troponinas, elevación del segmento ST e imágenes compatibles con miocarditis en la resonancia magnética cardiaca. El tiempo de hospitalización fue de 2 a 5 días (mediana). No se reportaron muertes durante la hospitalización y ninguno de los casos requirió soporte hemodinámico o respiratorio avanzado. No se cuenta con información suficiente respecto del seguimiento al alta que permita establecer su pronóstico a largo plazo. La tasa de ocurrencia de miocarditis en población adolescentes de Estados Unidos, a partir de los reportes disponibles en un sistema de notificación de reacciones adversas, estimada por CDC de Estados Unidos y autores independientes, osciló entre 43 a 162 y 72 a 94 casos por millón de segundas dosis administradas en adolescentes varones de 12 a 15 años y 16 a 17 años respectivamente. En mujeres, las tasas observadas fueron de 4 a 13 en el grupo de 12 a 15 años y de 0 a 8 en aquellas con 16 a 17 años. La certeza de la evidencia fue muy baja debido al diseño de estudio y riesgo de sesgo serio.

Expression of Toll-Like Receptor 4 and Matrix Metalloproteinase 8 in Gingival Crevicular Fluid in Patients with Periodontitis

Abstract Objective: To determine the expression of TLR4 and MMP8 in gingival crevicular fluid [GCF] in patients with periodontitis. Material and Methods: Clinical samples were collected from 23 gingival crevicular fluid of periodontal disease subjects (n = 14) and healthy periodontal subjects (n=9). Measurement of Clinical parameters of probing pocket depth (PPD), bleeding on probing (BOP), and clinical attachment loss (CAL) were included as diagnostic criteria. Pocket Depth (PD) and CAL were defined as present if the PPD was ≥ 4 mm and the CAL ≥ 1 mm. Expression of TLR4 and MMP8 in the gingival crevicular fluid of deep pockets (PD≥ 6mm), shallow pockets (PD 4-5 mm) and healthy periodontal sulcus (0-3 mm) were evaluated by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Statistical analysis to compare the pocket was using Independent t-test and Mann-Whitney test. Correlation between mRNA expression and clinical parameters was analyzed using Spearman's correlation test Results: Expression of TLR4 was higher in shallow pockets compared to the control group, but the difference was not statistically significant (p>0.05). The expression of MMP8 was higher in shallow pockets compared to the control group, but the difference was not statistically significant (p>0.05) either. There is no significant correlation between TLR4 and MMP8 with clinical periodontal parameters Conclusion: TLR4 and MMP8 mRNA expression levels should not be used as a clinical biomarker in periodontitis diagnostic tools.

B cells expressing IL-10 mRNA modulate memory T cells after DNA-Hsp65 immunization

In DNA vaccines, the gene of interest is cloned into a bacterial plasmid that is engineered to induce protein production for long periods in eukaryotic cells. Previous research has shown that the intramuscular immunization of BALB/c mice with a naked plasmid DNA fragment encoding the Mycobacterium leprae 65-kDa heat-shock protein (pcDNA3-Hsp65) induces protection against M. tuberculosis challenge. A key stage in the protective immune response after immunization is the generation of memory T cells. Previously, we have shown that B cells capture plasmid DNA-Hsp65 and thereby modulate the formation of CD8+ memory T cells after M. tuberculosis challenge in mice. Therefore, clarifying how B cells act as part of the protective immune response after DNA immunization is important for the development of more-effective vaccines. The aim of this study was to investigate the mechanisms by which B cells modulate memory T cells after DNA-Hsp65 immunization. C57BL/6 and BKO mice were injected three times, at 15-day intervals, with 100 µg naked pcDNA-Hsp65 per mouse. Thirty days after immunization, the percentages of effector memory T (TEM) cells (CD4+ and CD8+/CD44high/CD62Llow) and memory CD8+ T cells (CD8+/CD44high/CD62Llow/CD127+) were measured with flow cytometry. Interferon γ, interleukin 12 (IL-12), and IL-10 mRNAs were also quantified in whole spleen cells and purified B cells (CD43−) with real-time qPCR. Our data suggest that a B-cell subpopulation expressing IL-10 downregulated proinflammatory cytokine expression in the spleen, increasing the survival of CD4+ TEM cells and CD8+ TEM/CD127+ cells.

Antigen-presenting cells transfected with Hsp65 messenger RNA fail to treat experimental tuberculosis

In the last several years, the use of dendritic cells has been studied as a therapeutic strategy against tumors. Dendritic cells can be pulsed with peptides or full-length protein, or they can be transfected with DNA or RNA. However, comparative studies suggest that transfecting dendritic cells with messenger RNA (mRNA) is superior to other antigen-loading techniques in generating immunocompetent dendritic cells. In the present study, we evaluated a new therapeutic strategy to fight tuberculosis using dendritic cells and macrophages transfected with Hsp65 mRNA. First, we demonstrated that antigen-presenting cells transfected with Hsp65 mRNA exhibit a higher level of expression of co-stimulatory molecules, suggesting that Hsp65 mRNA has immunostimulatory properties. We also demonstrated that spleen cells obtained from animals immunized with mock and Hsp65 mRNA-transfected dendritic cells were able to generate a mixed Th1/Th2 response with production not only of IFN-γ but also of IL-5 and IL-10. In contrast, cells recovered from mice immunized with Hsp65 mRNA-transfected macrophages were able to produce only IL-5. When mice were infected with Mycobacterium tuberculosis and treated with antigen-presenting cells transfected with Hsp65 mRNA (therapeutic immunization), we did not detect any decrease in the lung bacterial load or any preservation of the lung parenchyma, indicating the inability of transfected cells to confer curative effects against tuberculosis. In spite of the lack of therapeutic efficacy, this study reports for the first time the use of antigen-presenting cells transfected with mRNA in experimental tuberculosis.

Caracterizaçäo do gene da triose fosfato isomerase do schistosoma mansoni / Characterization of the gene ensyme triose phosphate isomerase of schistosoma mansoni

O gene completo codificando a enzima triose fosfato isomerase (TPI) do Schistosoma mansoni foi caracterizado a partir do estudo de dois ciclones exibindo áreas de superposiçäo, isolados, de uma biblioteca genômica em fago de lambda. Estes clones genômicos foram caracterizados através de mapas de restriçäo, sequenciamento do DNA envolvendo a regiäo a montante do gene ("5' flanking region"), exons, limites dos entrons e o sítio de poli-adenilaçäo. O gene da TPI do Schistosoma mansoni é codificado por 6 exons ocupando uma regiäo de aproximadamente 12 Kb. Os cinco introns estäo situados em posiçöes análogas aquelas para os genes da TPI de mamíferos, porém um dos 6 introns da TPI de mamíferos está ausente no S. mansoni. Nós näo encontramos evidências da participaçäo de "spliced leader" na expressäo do gene do TPI. O gene é precedido de pelo menos 4 cópias de sequências repetitivas de 2.5 Kb dispostas de forma linear. Apesar do gene de TPI de S. mansoni com 12 Kb, ser muito maior que um gene típico da TPI de um mamífero, o qual tem em média 3-4 Kb, ele apresenta o primeiro intron com apenas 42 bp. O sítio de iniciaçäo de transiçäo do S. mansoni é heterogêneo. A análise pela técnica de "Southern blot" sugere que o gene da TPI de S. mansoni se expressa a partir de uma única cópia do gene