Expression in Saccharomyces boulardii of recombinant Toxin-coregulated pilus A subunit (TcpA) of Vibrio cholerae O1

Cholera is endemic in over 50 countries with an estimated mortality of 100,000-120,000. Vaccination is considered the complementary key to prevent and control cholera; therefore, alternative vaccine preparations are needed. Toxin Co-regulated Pilus is part of the toxR virulence regulon, which is necessary for colonization in the intestinal mucosa. In order to express Vibrio cholerae TcpA protein in Saccharomyces boulardii, the expression plasmid pYES2 was constructed by inserting tcpA gene isolated from local Vibrio cholerae Eltor Inaba isolates. The new construct was transferred into Saccharomyces boulardii cells and the expression of tcpA gene was induced from the GAL1 promoter by adding galactose to the medium. The SDS-PAGE and Western blot analysis showed the presence of TcpA in yeast. These results showed that Saccharomyces boulardii is a promising host to express Vibrio cholerae toxin TcpA as the first step in attempt to produce an oral Vibrio cholerae vaccine(AU)

El cólera es endémico en más de 50 países. Se estima una mortalidad entre 100.000 - 120.000 debido a esta enfermedad. La vacunación se considera una medida complementaria para prevenir y controlar el cólera, por lo tanto, se necesitan preparaciones vacunales alternativas a las existentes. El Pili corregulado con la toxina, es parte del regulón de virulencia toxR, y es necesario para la colonización en la mucosa intestinal. Para expresar la proteína tcpA de Vibrio cholerae en Saccharomyces boulardii, se construyó el plásmido de expresión pYES2 insertando el gen tcpA obtenido a partir de aislamientos locales de Vibrio cholerae El Tor Inaba. La nueva construcción se transfirió a las células de Saccharomyces boulardii y se indujo la expresión del gen tcpA a partir del promotor GAL1 mediante la adición de galactosa al medio. El análisis mediante SDS-PAGE y Western blot demostró la presencia de TcpA en levaduras. Los resultados demostraron que Saccharomyces boulardii es un hospedero prometedor para expresar el gen tcpA de Vibrio cholerae como el primer paso en el intento de producir una vacuna oral contra Vibrio cholerae(AU)

Aplicação terapêutica de Saccharomyces boulardii em diarreias: uma revisão / Therapeutic application of Saccharomyces boulardii in diarrheas: a review

Saccharomyces boulardii é uma levedura não patogênica, termotolerante e resistente à ação dos sucos gástrico, entérico e pancreático. Esta levedura atua no intestino por três mecanismos: efeito antagonista direto, imunoestimulação e efeito trófico na mucosa intestinal. O objetivo deste trabalho de revisão é contribuir para uma atualização dos profissionais de saúde sobre as indicações terapêuticas e as formas de uso da levedura S. boulardii como agente probiótico. S. boulardii é utilizada sob a forma de medicamentos como agente terapêutico na diarreia, com eficácia comprovada em muitas condições patológicas que cursam com diarreias agudas e crônicas. Além de não alterar a morfologia intestinal nem a microbiota colônica residente como os antibióticos, esta levedura tem resultados equivalentes aos medicamentos padrões utilizados. Devido a esses fatores, é vantajosa a utilização de medicamentos à base deste probiótico.

Saccharomyces boulardii is a nonpathogenic yeast which is thermotolerant and resistant to gastric, pancreatic and enteric secretions. This yeast works in the bowel by three ways: direct antagonist effect, immunostimulation and trophic effect upon the intestinal mucosa. The objective of this revision is to contribute to an upgrade of health professionals about the therapeutic indications and ways of using the yeast S.boulardii as a probiotic. S. boulardii is employed in the form of medicines as therapeutic agent on the treatment of diarrhea with proven efficiency in pathological conditions that develop with acute and chronic diarrhea. Neither interfering in intestinal morphology nor in the colonic microbiota like antibiotics, this yeast has shown efficacy equivalentto standard medicines employed. Due to these factors it is very profitable the use of this probiotic-based medicines.