Aspectos morfológicos, citoquímicos ultra-estruturais e citoquímicos ultra-estruturais de células do sistema hematopoético de Caiman crocodilus yacare(Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) / Morphological, cytochemical, ultrastructural and cytochemical-ultrastructural aspects of cells of hematopoetic system in Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802)(Reptilia, Crocodilia

Com o objetivo de estudar o sistema hematopoético do réptil da espécie Caiman crocodilus yacare, foram utilizados cinco exemplares hígidos e jovens (aproximadamente um ano de idade), provenientes de São Paulo e de Mato Grosso do Sul. Amostras de sangue periférico foram colhidas em EDTA, através da punção do seio venoso cervical, e da medula óssea pela punção aspirativa do osso femural. Estudo histológico da medula óssea femural foi realizado em um animal, através da coloração em HE, Giemsa e pela técnica de Gomori para fibras reticulínicas. Os esfregaços de sangue e de medula foram processados para coloração panótica (Leishman ou Rosenfeld) e reações citoquímicas para fosfatase alcalina, peroxidase e azul de toluidina. O material de medula óssea foi também processado para estudo ultra-estrutural em Microscopia Eletrônica de Transmissão, pelo método clássico e com o emprego de reações citoquímicas (fosfatase alcalina e peroxidase). A presença de sítios hematopoéticos ativos foi demonstrada histologicamente nos cortes transversais do fêmur, principalmente no seu terço distal. As células leucocitárias imaturas foram localizadas no espaço extravascular da região subendosteal, enquanto as da linhagem eritrocítica foram encontradas dentro dos vasos capilares sinusóides medulares, na região central do osso. As células precursoras desta linhagem estavam aderidas à parede do vaso, e suas sucessoras distribuídas em direção ao centro do sinusóide à medida que amadureciam. Nos esfregaços de medula, as células imaturas da linhagem eritrocítica mostraram-se arredondadas e com núcleo predominantemente frouxo, em contraposição às células maduras, de núcleo condensado e forma em geral elíptica. Foram vistos pró-eritroblastos, eritroblastos basofilicos, policromáticos e ortocromáticos, e finalmente eritrócitos. As células precursoras da linhagem granulocítica foram grandes e diminuíam progressivamente com a diferenciação. Os grânulos específicos surgiram a partir da fase de mielócito inicial, aumentando com a maturação celular. O núcleo foi excêntrico e de cromatina frouxa nas fases mais imaturas, tomando-se esférico com o avançar da diferenciação no caso do eosimófilo e do heterófilo, porém ocupando posição central no basófllo. Os heterófilos, contendo grânulos de coloração em geral salmão, foram positivos para a fosfatase alcalina e para a mieloperoxidase a partir da...(au)

Biología de las células totipotenciales hematopoyéticas / Biology of hemopoietic stem cells

Todas las células que comprenden el sistema hematopoyético son derivadas de un precursor común, la célula totipotencial hematopoyética (CTH), la cual por procesos de proliferación y diferenciación da lugar a las células maduras que se localiza en la sangre y órganos linfohematopoyéticos. Para que se lleven a cabo los procesos de proliferación, supervivencia, apoptosis,inhibición y diferenciación desde las CTH hasta las células maduras funcionales, se requiere de la participación de proteínas denominadas colectivamente citocinas, las cuales promueven y regulan una o varias funciones celulares, e intervienen en una o varías etapas de diferenciación de las CTH. Por el empleo de diferentes técnicas de cultivo, se concluyó que el estroma de la médula ósea: fibroblastos, células endoteliales y adipocitos, tiene un papel importante. La participación de esta células radica en la producción de citocinas, así como en proveer de un soporte sobre el cual se asientan las CTH. Aunque podría parecer que las citocinas son los factores fundamentales para regular los procesos mencionados de las células hematopoyéticas, se han propuesto dos hipótesis principales para explicar cómo se lleva a cabo la hematopoyesis: el modelo determinístico y el modelo estocástico. Ambos modelos aportan pruebas para apoyar sus postulados; sin embargo, a la fecha decidir cuál modelo es el acertado es todavía materia de controversia. Aunque el estudio de las CTH plantea muchas preguntas de orden básico, en muchos laboratorios en el mundo se han comenzado a indagar sobre la aplicación de las CTH en terapia humana: su uso en transplantes, sustituyendo el trasplante de médula ósea completa y, aún en etapas experimentales, el empleado de las CTH para insertar genes que pudieran ser de importancia terapéutica en enfermedades deficitarias o incluso en el tratamiento contra el cáncer

Aspectos morfológicos e citoquímicos dos glóbulos sangüíneos de Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia) / Morphological and cytochemical observations of blood cells of Caiman crocodilus yacare (Daudin, 1802) (Reptilia, Crocodilia)

Foram utilizados 10 jacarés Caiman crocodilus yacare, colhendo-se 5 ml do sangue periférico de cada animal. A análise morfológica foi realizada após coloraçäo por Leishman. Para estudo citoquímico, empregaram-se os métodos do PAS, do Sudan black B, da o-toluidina e do azul de bromofenol. Foram identificados 7 tipos celulares: eritrócitos, trombócitos, heterófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos azurófilos. Os eritrócitos nucleados apresentam formato elíptico com atividade mitótica e positividade citoplasmática para o azul de bromofenol. Os trombócitos säo de formato elíptico, com citoplasma abundante nos pólos, contendo grânulos de glicogênio e núcleo com sulcos profundos. Heterófilos, grosseiramente esféricos, mostram núcleo esférico excêntrico e citoplasma repleto de grânulos corados em salmäo, de formato fusiforme, em baqueta, oval ou esférico. A citoquímica nestas células revelou a presença de glicogênio, grânulos citoplasmáticos positivos para azul de bromofenol e parcialmente sudanófilos e positivos para mieloperoxidase. Eosinófilos mostram-se esféricos com núcleo lenticular excêntrico e citoplasma com grânulos esféricos ou ovais róseos positivos para Sudan e mieloperoxidase, porém fracamente para o azul de bromofenol. Basófilos apresentam formato esférico, de tamanho menor em relaçäo aos demais granulócitos, núcleo esférico central e citoplasma com poucos grânulos fortemente basófilos. Linfócitos mostram-se polimórficos com núcleo de formato irregular, citoplasma escasso com projeçöes e grânulos azurófilos. Monócito azurófilo, de formato esférico, núcleo excêntrico e citoplasma basófilo contendo grânulos azurófilos abundantes