Molecular Characterization of Group B Streptococcus Serotypes By Multiplex Polymerase Chain Reaction / Caracterização molecular dos sorotipos de estreptococos do grupo b por reação multiplex pcr

OBJECTIVE: Group B Streptococcus (GBS) serotypes (Ia, Ib and II to IX) are classified based on variations in their capsular polysaccharide; their prevalence differs between different geographic areas. We examined the prevalence of all GBS serotypes in rectal and vaginal swab samples obtained from 363 pregnant women followed at a Brazilian referral center (Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti); bacterial susceptibility to antibiotics was further determined. METHOD: Prevalence of positive GBS was evaluated by latex agglutination and by multiplex PCR analysis; bacterial susceptibility to antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, levofloxacin, linezolid, penicillin and tetracycline was determined by the disk diffusion method. RESULTS: (a) standard GBS culture and the multiplex PCR analysis tested positive for 83 swabs, collected from 72 women (prevalence of GBS colonization: 72/363; 20%); the most prevalent Serotype was Ia (n=43/83; 52%), followed by serotype V (n=14/83; 17%); according to anatomical origin, serotype Ia accounted for 27/59 (46%) and 16/24 (67%) of the vaginal and rectal samples, respectively; PCR also identified serotypes Ib, II, III and VI. Serotype VI is rarely described and had not been previously reported in Brazil or in Latin America. (b) The latex agglutination test only identified 44 positive samples, all of which were serotyped: 34 of these samples (77%) had serotypes matching those identified by multiplex PCR. (c) Only one sample (serotype Ia) showed resistance to erythromycin and clindamycin. CONCLUSION: Regional studies on GBS serotypes prevalence are essential to guide immunoprophylactic interventions (vaccines) and the implementation of adequate antibiotic prophylaxis or treatment. In this study, the incidence of the serotype VI, a new and rare serotype of GBS was described for the first time in a Brazilian population.

OBJETIVO: Os sorotipos (Ia, Ib e II ao IX) do estreptococo do grupo B (GBS) são classificados baseado nas variações em seus polissacarídeos capsulares; sua prevalência difere entre diferentes áreas geográficas. Nós examinamos a prevalência de todos os sorotipos do estreptococo do grupo B em amostras de swabs vaginal e retal obtidas de 363 mulheres seguidas em um centro de referência brasileiro, o Hospital da Mulher Professor Doutor José Aristodemo Pinotti; a susceptibilidade bacteriana a antibióticos foi também determinada. MÉTODO A prevalência de estreptococo do grupo B positivo foi avaliada por aglutinação em látex e através de análise por multiplex PCR; susceptibilidade bacteriana a antibióticos, tais como clindamicina, eritromicina, levofloxacin, linezolide, penicilina e tetraciclina foi determinada pelo método de disco difusão. RESULTADOS: (a) Tanto a cultura padrão para estreptococo do grupo B quanto a análise por multiplex PCR testaram positivos para 83 swabs. A prevalência para colonização por GBS foi 20%. O sorotipo Ia foi o mais prevalente (n= 43/83; 52%), seguido pelo sorotipo V (n= 14/83; 17%); De acordo com a origem anatômica, o sorotipo Ia positivou 27/59 (46%) e 16/24 (67%) das amostras vaginais e retais, respectivamente; o teste de PCR também identificou os sorotipos Ib, II, III, VI. O sorotipo VI é raramente descrito e não reportado no Brasil ou na América Latina até esta data. (b) O teste de aglutinação em látex somente identificou 44 amostras positivas, todas das quais foram sorotipadas: 34 destas amostras (77%) tiveram os sorotipos coincidindo com aqueles identificados pela multiplex PCR. (c) Somente uma amostra (sorotipo Ia) mostrou resistência a eritromicina e clindamicina. CONCLUSÃO: Estudos regionais sobre a prevalência dos sorotipos do estreptococo do grupo B são essenciais para guiar medidas imunoprofiláticas (vacinas) e a implementação de adequada antibiótico profilaxia. Neste estudo, a incidência do sorotipo VI foi descrita pela primeira vez na população Brasileira, um novo e raro sorotipo do estreptococo do grupo B.

Antisuero AA479: nuevo reactivo para la serotipificación de variantes atípicas se Shigella flexneri / AA479 antiserum: new reagent for the serotype characterization of atypical variants of Shigella flexneri

Shigella flexneri is divided into 13 serotypes based on the combination of antigenic determinants present in the O-antigen. A new O-antigen modification with phosphoethanolamine has been identified. The presence of this antigenic determinant (called E1037) is recognized by monoclonal antibody MASF IV-1. Given the increasing incidence of these new variants and the difficulty in supplying the monoclonal antibody to our country, we produced a polyclonal antiserum (AA479) through immunization with a S. flexneri Xv strain. The antiserum specificity was assessed by slide agglutination against isolates from clinical cases and a culture collection representing all Shigella serotypes. The results obtained demonstrated a 100% correlation between AA479 absorbed antiserum and monoclonal antibody MASF IV-1. The availability of AA479 antiserum in every public hospital in Argentina will allow us to identify atypical S. flexneri isolates in order to strengthen Shigella surveillance in our country and to compare with global epidemiological dat

Shigella flexneri se divide en al menos 13 serotipos sobre la base de la combinación de determinantes antigénicos presentes en el antígeno O. Se identificó una nueva modificación del antígeno O con fosfoetanolamina. La presencia de este determinante antigénico (denominado E1037) es reconocida por el anticuerpo monoclonal MASF IV-1. Teniendo en cuenta la incidencia creciente de estas nuevas variantes y la dificultad en la provisión del anticuerpo monoclonal para nuestro país, se elaboró un antisuero de tipo policlonal (AA479) mediante la inmunización con un cultivo de S. flexneri Xv. La especificidad del antisuero se evaluó por aglutinación en lámina con aislamientos clínicos y cultivos de colección, con lo que quedaron representados todos los serotipos de Shigella. Los resultados obtenidos demostraron una correlación del 100% entre el antisuero AA479 absorbido y el anticuerpo monoclonal MASF IV-1. La disponibilidad del antisuero AA479 en todos los hospitales públicos de Argentina permitirá identificar los aislamientos atípicos de S. flexneri; de esta forma se podrá fortalecer la vigilancia de Shigella en nuestro país y comparar con los datos epidemiológicos a nivel global

Contribuição ao estudo da diversidade do HIV-1 no Brasil: caracterização genotípica e fenotípica de amostras de HIV-1 obtidas em diferentes regiões geográficas / Contribution to the study of HIV-1 diversity in Brazil: genotypic and phenotypic characterization of HIV-1 samples obtained from different geographical regions

Desde o estabelecimento em cultura do primeiro isolado de HIV-l no Brasil (Galvão-Castro e cols., 1987), já podíamos perceber um polimorfismo genético e biológico em amostras obtidas no início da epidemia de AIDS no país, indicando que esta heterogeneidade seria similar a descrita para o HIV-l em outras partes do mundo (Couto-Fernandez e cols., 1992). Nos anos subsequentes, buscando um melhor detalhamento da estrutura genética destes isolados, entre outros, sequenciamos um fragmento genômico de aproximadamente 860pb correspondentes as regiões V3, V4, V5 e parte da gp41 do envelope viral de 6 amostras coletadas entre 1987 e 1989 (documento 1). A análise filo genética mostrou que estas amostras brasileiras eram do subtipo B, com níveis de diversidade variando entre 5,9 e 13, 1%. A análise das seqüências de aminoácidos da alça V3 revelou que 3 amostras possuíam o motivo GPGR no topo da alça, característico de isolados Norte Americanos/Europeus, enquanto que nas outras três existia uma substituição da prolina pelo triptofano (W), metionina (M) e fenilalalina (F), respectivamente. O grau de diversidade antigênica, avaliado pela reatividade sorológica de 114 soros obtidos de pacientes do Rio de Janeiro, coletados no período de 1990 a 1992, frente à diferentes peptídeos sintéticos subtipo-específicos, mostrou que 60,5% deles reagiram com peptídeos do subtipo B e 15,8% mostraram reatividade específica para o peptídeo Bra-cons (GWG). Um elevado percentual de soros (37,7%) não mostrou reatividade com os diferentes peptídeos usados. Buscando conhecer o espectro da diversidade do HIV-1 nos sítios selecionados para futuros testes de vacinas anti-HIV/AIDS, foi estabelecida a Rede Nacional de Laboratórios para Isolamento e Caracterização do HIV-1 no Brasil que, permitiu uma análise abrangente e sistematizada de amostras coletadas em diferentes regiões do país. Estes estudos, realizados primeiramente em amostras do Rio de Janeiro (documento 2) e, subseqüentemente,...

Fatal group a streptococcal toxic shock-like syndrome in a child with varicella: report of the first well documented case with detection of the genetic sequences that code for exotoxins SPE A and B, in Sao Paulo, Brazil

Crianca de sete anos, previamente higida, foi admitida na unidade de terapia intensiva por quadro de toxemia associado a varicela. Evoluiu rapidamente para choque e insuficiencia de multiplos orgaos e sistemas e, apesar do tratamento intensivo, morreu no quarto dia apos a admissao. A cultura de secrecao colhida por puncao profunda de partes moles em regiao toracica foi positiva para Streptococcus pyogenes, proteina-M nao tipavel e carreador dos genes codificadores da producao de exotoxinas pirogenicas estreptococicas A e B, preenchendo os criterios para definicao de Sindrome do choque toxico estreptococico. Os autores discutem aspectos clinicos e fisiopatologicos desta sindrome, bem como alguns aspectos incomuns relacionados a este caso

Rapid characterization of S. mansoni expression library clones of potential interest

Uma biblioteca de expressao de cDNA de verme adulto de S. mansoni foi selecionada utilizando-se soros de macacos babuinos em fase inicial da infeccao. Os clones que reagiram positivamente com os soros de infeccao recente foram examinados quanto a reatividade contra soros normais e soros de infeccao heterologa. Com a finalidade de se conseguir melhor discriminacao entre reatividade positiva com o anticorpo especifico e aquela devido aos anticorpos anti-E. coli residuais, um clone de cDNA nao relacionado ao S. mansoni foi plaqueado em mistura com o clone positivo. O plano de fundo negativo proporcionado pelo clone nao relacionado forneceu o contraste necessario para discriminar a reacao positiva especifica...

Concomitant rotavirus serotypes 1 and 4 infections in a diarrhoeic from Belem, Brazil

Infeccoes simultaneas por sorotipos 1 e 4 de rotavirus foram observadas em uma crianca de 15 meses de idade, do sexo feminino, internada com diarreia aguda contraida na comunidade que perdurou por 7 dias, evoluindo com desidratacao moderada. As evidencias dessas infeccoes foram inferidas baseadas em testes tais como: a) ensaio imunoenzimatico (ELISA), evidenciando-se reacao positiva para os sorotipos 1 e 4; e b) migracoes extras de segmentos de ARN visualizados a eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA). Esses resultados sugerem que as condicoes precarias de higiene e saneamento em que vivia essa crianca propiciam a infeccao macica por esses agentes virais. Alem disso, a co-circulacao de diferentes sorotipos no mesmo ambiente sustenta a necessidade de utilizar-se, no futuro, uma vacina polivalente, que proteja as criancas contra os quatro sorotipos G, epidemiologicamente importantes

Acinetobacter species in clinical specimens: biotypes and serotypes of acinetobacter baumannii strains isolated in Säo Paulo, Brazil

Foram estudadas 190 cepas de Acinetobcter (76 isoladas de líquido cefalorraquidiano, 30 de sangue e 84 de outros materiais clínicos), isoladas no período 1986-92, em Säo Paulo, Brasil. As espécies foram identificadas segundo Bouvet and Grimont e Vouvet and Jeanjean. Os sorotipos e biotipos foram determinados para A. baumannii seguindo os métodos descritos por Traub e Bouvet and Grimont, respectivamente. Entre as 10 espécies identificadas, o A.baumannii (60 por cento) e A.genospecies 3 (11.6 por cento) foram as mais frequentes. Verificou-se que os biotipos 2,6, e 9 e os sorotipos 04, 015 e 029 foram predominantes entre as cepas de A.baumannii

Serotyping, proteinase and phospholipase production associated with the pathogenicity of Candida albicans strains isolated from frog meat

Quinze amostras de Candida albicans isoladas de coxas de räs (Rana catesbeiana, Shaw, 1802) comercializadas no Brasil, foram estudadas quanto ao sorotipo e fatores de virulência "in vitro" e "in vivo". A sorotipagem revelou predominância do sorotipo B. Todas as amostras estudadas foram produtoras de fosfolipases e 66,6 por cento produziram proteinases. No estudo da patogenicidade foram observados dois tipos de alteraçöes renais: uma do tipo agudo com abscessos corticais e outra do tipo crônico com pielonefrite e envolvimento unilateral

Characterization of brazilian Listeria monocytogenes strains using DNA macrorestriction patterns

Vinte e uma linhagens de Listeria monocytogenes amostradas no Brasil, no período de 1989-90, procedentes de material clínico e alimentos foram identificadas, sorotipadas e fagotipadas de acordo com métodos tradicionais. Estas linhagens foram, também, tipadas quanto ao perfil de macrorestriçäo de DNA, após clivagem com ApaI, SmaI e NotI e separadas por eletroforese em campo pulsado. Os resultados obtidos evidenciaram uma grande heterogeneidade entre as linhagens: enquanto a sorotipagem dividiu dois sorogrupos (1/2 e 4), fagotipagem definiu oito fagovares e, finalmente, perfil de macrorestriçäo de DNA permitiu distinguir doze diferentes grupos. Estes resultados enfatizam a necessidade de caracterizaçäo de L. monocytogenes com, pelo menos, três diferentes métodos para definir se isolados säo similares ou näo, especialmente por ocasiäo de investigaçöes epidemiológicas da transmissäo alimentar da listeriose humana

Byotipe and lior's serogroup of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli isolated in Säo Paulo, Brazil

Foi avaliada a frequência de Campylobacter sp no período 1983 a 1989, quanto à sua distribuiçäo por grupo etário e ao percentual em relaçäo a outros enteropatógenos. As cepas isoladas foram classificadas em biotipos e sorogrupos, segundo as metodologias descritas por Lior. Foram utilizados 46 anti-soros preparados com cepas de referências recebidas do "National Reference Service for Campylobacter" do Canadá. Neste período foram isoladas 285 cepas de Campilobacter sp., correspondendo a 3,72 por cento de C. jejuni e 11,93 por cento de C. coli, das quais 62,81 por cento de C. jejuni por cento foram isoladas de crianças com menos de 2 anos de idade. Em 67 vezes (23,51), C. jejuni e C. coli foram isolados em infecçöes mistas. Houve prevalência do C. jejuni biotipo II com 24,22 por cento e C. coli biotipo I com 9,76 por cento. Foram sorotipadas 84,94 por cento das cepas isoladas, havendo predominância dos sorogrupos; 22 cepas (10,04 por cento) no puderam ser tipadas com os 46 anti-soros utilizados e outras 11 (5,02 por cento) se apresentaram autoaglutinantes