Desenvolvimento de bebidas lácteas probióticas adicionadas de polpa de morango e suplementadas com L-triptofano elaboradas a partir de leite bubalino e bovino / Development of probiotic dairy beverages with strawberry pulp and supplemented with L-tryptophan from buffalo and bovine milk

O objetivo deste estudo foi desenvolver uma formulação de bebida láctea bubalina probiótica adicionada de polpa de morango, comparando os efeitos do uso do leite de búfala e de vaca na elaboração dos produtos e verificando a possibilidade de suplementação com triptofano nos produtos lácteos probióticos. Como primeira etapa do trabalho, bebidas lácteas probióticas foram elaboradas a partir de leite bubalino e bovino, fermentadas com Streptococcus thermophilus TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 e Lactobacillus acidophilus La5, e formuladas com 0, 25 e 50% de soro em sua formulação. As bebidas foram avaliadas quanto à cinética de fermentação das culturas láticas utilizadas, ao teor de proteína, gordura e sólidos totais não gordurosos, pós-acidificação, viabilidade das culturas fermentadoras e sua capacidade de sobrevivência ao estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas bubalinas apresentaram resultados superiores as bebidas bovinas. O uso do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas promoveu benefícios quanto as culturas láticas presentes nos produtos, exercendo efeito protetivo e influindo na preservação da viabilidade das bactérias ao longo do armazenamento refrigerado e durante a simulação do estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas elaboradas com 25% apresentaram os resultados mais próximos aos obtidos pelos produtos controle, sem adição de soro, sendo selecionadas para a segunda parte do estudo. Nesta etapa, as formulações de bebida láctea com 25% de soro, foram acrescidas de um preparado com polpa de morango e bebidas sem adição da fruta, utilizadas como controle. As bebidas lácteas bubalinas frutadas, apresentaram menor teor de gordura e melhores características reológicas, com maior viscosidade e consistência do que os produtos controle, sem afetar a pós-acidificação, o perfil de ácido graxo, assim como, a viabilidade e a resistência às condições de estresse gastrointestinal in vitro das culturas fermentadoras. A avaliação da possibilidade de suplementar lácteos probióticos com triptofano foi realizada em conjunto com a Universidade de Milão. Para isso, iogurtes probióticos receberam adição de triptofano antes ou após a fermentação, sendo avaliados com relação ao perfil de pós-acidificação, quantidade de triptofano nos produtos, número de células viáveis por plaqueamento e citometria de fluxo ao longo do armazenamento a 25° e 4°C. Complementarmente, a influência da presença do triptofano no crescimento e produção de compostos antimicrobianos pelas culturas láticas, também foi avaliada. A adição de triptofano após a fermentação dos iogurtes, que foram armazenados sob refrigeração (4°C), além de não afetar a pós-acidificação dos produtos, apresentou benefícios quanto a viabilidade L. acidophilus, redução do dano e aumento do número de células vivas, promovendo teor maior do aminoácido nos iogurtes. A presença do triptofano nos meios de cultivo, também influenciou de forma positiva o crescimento de S. thermophilus e L. acidophilus, melhorando o desenvolvimento das bactérias durante a fermentação e influindo em uma maior atividade antilistérica por parte do S. thermophilus. Diante da influência positiva da aplicação do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas, assim como, a adição do triptofano em iogurtes probióticos, a suplementação do aminoácido em bebidas lácteas bubalinas frutadas permitiria a obtenção de um produto funcional, onde seus benefícios estariam relacionados tanto ao consumo do probiótico presente no produto quanto a complementação de triptofano na dieta do consumidor

The aim of this study was to develop a formulation of probiotic buffalo dairy beverage added with strawberry pulp, comparing the effects of using buffalo and cow's milk in the preparation of products and verifying the possibility of tryptophan supplementation in probiotic dairy products. As a first stage of the work, probiotic dairy beverages were made from buffalo and bovine milk, fermented with Streptococcus thermophiles TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 and Lactobacillus acidophilus La5, and formulated with 0, 25 and 50% whey in their formulation. The beverages were evaluated for the fermentation kinetics of the used lactic cultures, the levels of protein, fat and total no fat solids, post-acidification, fermenting cultures viability and their ability to survive gastrointestinal stress in vitro. Buffalo milk use in dairy beverages production promoted benefits regarding the lactic cultures present in the products, exerting a protective effect and influencing the viability preservation of bacteria during the cold storage and simulation of gastrointestinal stress in vitro. Dairy beverages made with 25% whey addition showed results similar to those obtained by the control products, without whey addition, being selected for the second part of the study. In this part, the dairy beverages formulations with 25% whey, were added with a preparation were added with a strawberry pulp preparation and dairy beverages without added fruit, used as a control. Fruity bubaline dairy beverages had lower fat content and better rheological characteristics, with higher viscosity and consistency than control products, without affecting post-acidification, fatty acid profile, as well as viability and resistance to in vitro gastrointestinal condition of fermented cultures. The possibility of supplementing probiotic dairy products with tryptophan was evaluated in partnership with the University of Milan. For this, probiotic yogurts received the addition of tryptophan before or after fermentation, being evaluated in relation to the post-acidification profile, tryptophan amount in the products, viable cell number per plating and flow cytometry during storage at 25°C and 4°C. In addition, the influence of the tryptophan presence on the growth and production of antimicrobial compounds by lactic cultures was also evaluated. The addition of tryptophan after the yogurt fermentation, which were stored under refrigeration (4°C), in addition to not affecting the post-acidification of the products, showed benefits to the viability of L. acidophilus, reduced the damage and increased the number of cells promoting higher amino acid content in yogurts. Tryptophan presence in the culture media also positively influenced the growth of S. thermophiles and L. acidophilus, improving the development of bacteria during fermentation and influencing better antilisteric activity in the part of S. thermophiles. In view of the buffalo milk positive influence observed after the application in dairy beverage preparation, as well as the addition of tryptophan in probiotic yoghurts, amino acid supplementation in fruity buffalo dairy beverages would allow to obtain a functional product, where its benefits would be related both to the consumption of the probiotic present in the product as to the supplementation of tryptophan in the consumer's diet

Efeito da oligofrutose (FOS) sobre a capacidade de acidificação da cultura nativa Lactobacillus plantarum CNPC 003 isolada ou em co-cultura com Streptococcus thermophilus em leite de cabra / Influence of oligofrutose (FOS) on the acidification capacity of the indigenous culture Lactobacillus plantarum CNPC 003 solely or in coculture with Streptococcus thermophilus in goat milk

Objetivou-se analisar o comportamento fermentativo da cultura Lactobacillus plantarum CNPC 003 em leite de cabra em quatro tratamentos por 6 horas: T1 – L. plantarum CNPC 003; T2 – L. plantarum + oliogofrutose (FOS); T3 – L. plantarum + Streptococcus thermophilus; T4 – com L. plantarum + S. thermophilus + FOS. Os tratamentos estudados diferiram significativamente entre si em relação à acidez e ao pH após 6h de fermentação (p<0,05), tendo sido verificada uma influência positiva do uso de S. thermophilus e da adição de FOS sobre esses parâmetros. Do mesmo modo, a presença de FOS melhorou a viabilidade dos microrganismos estudados após 6h de fermentação. A utilização de S. thermophilus e de FOS é uma alternativa viável para o uso em leites fermentados contendo a cepa nativa L. plantarum CNPC 003.

Influência de duas culturas nativas de Lactobacillus spp. isoladas ou em co-cultura com Streptococcus thermophilus na fermentação de leite de cabra / Influence of two indigenous cultures of Lactobacillus spp. solely or in co-culture with Streptococcus thermophilus in the fermentation of goat milk

O uso combinado de probióticos e culturas starters permite elaborar produtos lácteos fermentados com características sensoriais agradáveis, nutritivos e benéficos à saúde. O objetivo deste estudo foi analisar o comportamento fermentativo de cepas nativas de lactobacilos com potencial probiótico isolados ou em co-cultura com Streptococcus thermophilus (starter) em quatro tratamentos de leites de cabra fermentados: T1 – Lactobacillus plantarum CNPC 001; T2 – L. plantarum + S. thermophilus; T3 – Lactobacillus mucosae CNPC 007; T4 – L. mucosae + S. thermophilus. A formulação T2 resultou em maior acidificação do leite, com menor pH (4,33) e maior acidez titulável (0,653g de acido lático 100g-1 ), porém com menor viabilidade de Lactobacillus sp. (7,92 log UFC g-1) em comparação à co-cultura L. mucosae e S. thermophilus (8,63 log UFC g-1 em T4).

Fermented beverage based on water-soluble soybean extract / Bebida fermentada à base de extrato hidrosolúvel de soja

Functional foods are those that, beyond basic nutrition, promote health benefits. This study aimed to produce a fermented beverage from a water-soluble soybean extract and low-lactose semi-skimmed milk. The beverage was prepared using a blend (v/v) containing 62% water-soluble soybean extract, 33% low-lactose semi-skimmed milk, and 5% of an inoculum containing Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus salivarius subsp. thermophilus. The fermentation was carried out with monitoring of the lactic acid bacteria (LAB) counts, pH, and titrable acidity (% lactic acid). The consumption-ready fermented beverage was added of strawberry syrup and posteriorly characterized by its centesimal composition and sensory attributes as appearance, aroma, flavour, texture, overall impression, and purchase intent. Additionally, the LAB count and presence of pathogens in the final product were evaluated. After 14 h of fermentation, the refrigerated product presented L. bulgaricus and S. thermophilus counts of 8.5 × 103 and 7.4 × 107 CFU/mL, respectively. The product contained 14.93% carbohydrates, 0.76% fats, 0.96% ash, 22.76% totalsolids, and 2.19% protein. Because the product did not present any pathogens, it was adequate according to the standards of microbiological safety determined by Brazilian legislation. Regarding the sensory evaluation, the panelists assigned a mean score of 7.0 for the attributes evaluated, indicating 'liked moderately' to the drink. In addition, 61% of the evaluators responded that they 'certainly or probably would buy' the product if it were available on the market.

Alimentos funcionais são aqueles que, além da nutrição básica, promovem benefícios à saúde. Este trabalho teve como objetivo produzir uma bebida fermentada a partir de extrato hidrosolúvel de soja (EHS) e leite semidesnatado com baixa lactose. A bebida foi preparada utilizando uma mistura (v/v) contendo 62% de EHS, 33% de leite semidesnatado com baixa lactose e 5% de inóculo contendo Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus e Streptococcus salivarius subsp. Thermophilus. A fermentação foi acompanhada durante 14 horas, através das contagens das bactérias ácido lácticas, pH e a acidez titulável (% de ácido láctico). A bebida fermentada pronta para consumo foi adicionada de uma calda de morango e caracterizada por sua composição centesimal, bem como por avaliação sensorial para os atributos: aparência, aroma, sabor, impressão global e intenção de compra. Além disso, a contagem das bactérias lácticas e presença de patógenos no produto foi avaliada. Após 14 horas de fermentação, o produto final refrigerado apresentou contagens de 8,5x103 UFC/mL e 7,4x107 UFC/mL para as bactérias L. bulgaricus e S. thermophilus respectivamente. O produto apresentou 14,93% de carboidratos, 0,76% de gordura, 0,96% de cinzas, 22,76% de sólidos totais e 2,19% de proteína. O produto não apresentou quaisquer patógenos, portanto, foi adequado aos padrões determinados pela legislação brasileira quanto à segurança microbiólogica. Com relação à avaliação sensorial, os provadores atribuíram em média nota 7,0 para todos os parâmetros avaliados, indicando que "gostarammoderadamente" da bebida. Ademais 61% dos avaliadores apontaram que "certamente ou provavelmente comprariam" o produto se estivesse disponível no mercado.

Seleção e aplicação de bactérias láticas produtoras de folato para obtenção de um leite fermentado bioenriquecido e avaliação de biodisponibilidade do folato produzido / Screening and application of folate-producing lactic acid bacteria for production of bioenriched fermented milk and evaluation of the bioavaliability of the produced folate

A deficiência de folato é um problema de saúde pública que vem sendo combatido através da fortificação obrigatória de ácido fólico. Entretanto, a ingestão excessiva pode causar efeitos colaterais indesejados. A forma natural da vitamina produzida por algumas cepas de bactérias láticas pode ser uma alternativa segura para aumentar a ingestão de folato pela população. Este trabalho visou selecionar as melhores cepas de BAL produtoras de folato, identificar as melhores condições para a produção da vitamina e avaliar a biodisponibilidade do folato produzido pelas cepas no leite fermentado, empregando-se testes em modelos animais. O estudo foi desenvolvido com cinco cepas de Streptococcus thermophilus (34v, 170v, 268v, 361v e 341 pc) e um cepa de Lactobacillus plantarum (16cv), todas boas produtoras de folato. As condições de produção e a combinação de cepas que resultaram na melhor produção folato foram utilizadas para produzir um leite biofermentado (BFM), avaliando-se a biodisponibilidade da vitamina produzida empregando-se um modelo animal de depleção/repleção, com camundongos Balb/c submetidos a 14 dias de depleção, seguido de 21 dias de repleção da vitamina. Após os 35 dias, os animais foram sacrificados, retirando-se sangue, rins, fígado, baço e intestino para quantificação de folato e avaliação histológica da mucosa intestinal. Todas as quantificações de folato foram feitas pelo método microbiológico. A melhor combinação de cepas (St. Thermophilus 34v + Lb. Plantarum 16cv) resultou na produção de 300 ng/mL de folato, sendo a temperatura de 42ºC melhor que 37ºC para a produção da vitamina. A produção de folato no leite na fermentação em pH controlado 6,0 foi 35% superior à observada no leite fermentado em pH livre. As concentrações de folato no baço e glóbulos vermelhos foram mais altas nos camundongos que ingeriram leite fermentado bioenriquecido (BFM) em relação aos demais grupos de animais. A relação vilosidade/cripta nos camundongos dos grupos BFM foi igual à observada nos animais que receberam leite suplementado com ácido fólico. Houve aumento da hemoglobina, hematócrito e hemácias nos camundongos que ingeriram BFM, evidenciando a bioeficácia do folato produzido. Esses resultados indicam que a produção de folato por bactérias láticas selecionadas em produtos fermentados pode ser uma boa alternativa para aumentar a ingestão de vitamina B9 pela população

A deficiência de folato é um problema de saúde pública que vem sendo combatido através da fortificação obrigatória de ácido fólico. Entretanto, a ingestão excessiva pode causar efeitos colaterais indesejados. A forma natural da vitamina produzida por algumas cepas de bactérias láticas pode ser uma alternativa segura para aumentar a ingestão de folato pela população. Este trabalho visou selecionar as melhores cepas de BAL produtoras de folato, identificar as melhores condições para a produção da vitamina e avaliar a biodisponibilidade do folato produzido pelas cepas no leite fermentado, empregando-se testes em modelos animais. O estudo foi desenvolvido com cinco cepas de Streptococcus thermophilus (34v, 170v, 268v, 361v e 341 pc) e um cepa de Lactobacillus plantarum (16cv), todas boas produtoras de folato. As condições de produção e a combinação de cepas que resultaram na melhor produção folato foram utilizadas para produzir um leite biofermentado (BFM), avaliando-se a biodisponibilidade da vitamina produzida empregando-se um modelo animal de depleção/repleção, com camundongos Balb/c submetidos a 14 dias de depleção, seguido de 21 dias de repleção da vitamina. Após os 35 dias, os animais foram sacrificados, retirando-se sangue, rins, fígado, baço e intestino para quantificação de folato e avaliação histológica da mucosa intestinal. Todas as quantificações de folato foram feitas pelo método microbiológico. A melhor combinação de cepas (St. Thermophilus 34v + Lb. Plantarum 16cv) resultou na produção de 300 ng/mL de folato, sendo a temperatura de 42ºC melhor que 37ºC para a produção da vitamina. A produção de folato no leite na fermentação em pH controlado 6,0 foi 35% superior à observada no leite fermentado em pH livre. As concentrações de folato no baço e glóbulos vermelhos foram mais altas nos camundongos que ingeriram leite fermentado bioenriquecido (BFM) em relação aos demais grupos de animais. A relação vilosidade/cripta nos camundongos dos grupos BFM foi igual à observada nos animais que receberam leite suplementado com ácido fólico. Houve aumento da hemoglobina, hematócrito e hemácias nos camundongos que ingeriram BFM, evidenciando a bioeficácia do folato produzido. Esses resultados indicam que a produção de folato por bactérias láticas selecionadas em produtos fermentados pode ser uma boa alternativa para aumentar a ingestão de vitamina B9 pela população

Development and characterization of an innovative synbiotic fermented beverage based on vegetable soybean

Abstract Soymilk was produced from vegetable soybean and fermented by probiotics (Lactobacillus acidophilus La-5, Bifidobacterium animalis Bb-12) in co-culture with Streptococcus thermophilus. The composition of the fermented beverage and oligosaccharides content were determined. The effect of fructooligosaccharides and inulin on the fermentation time and viability of probiotic microorganisms throughout 28 days of storage at 5 °C were evaluated. The soymilk from vegetable soybeans was fermented in just 3.2 h, when pH reached 4.8. Fermentation reduced the contents of stachyose and raffinose in soymilk. Prebiotics had no effect on acidification rate and on viability of B. animalis and S. thermophilus in the fermented beverage. The viable counts of B. animalis Bb-12 remained above 108 CFU mL-1 in the fermented soymilk during 28 days of storage at 5 °C while L. acidophilus La-5 was decreased by 1 log CFU mL-1. The fermented soymilk from vegetable soybeans showed to be a good food matrix to deliver probiotic bacteria, as well as a soy product with a lower content of non-digestible oligosaccharides.

Influencia del aceite esencial de orégano en la elaboración tradicional de quesos: efecto sobre el fermento láctico / Influence of oregano essential oil on traditional Argentinean cheese elaboration: Effect on lactic starter cultures

The aim of this work is to study the oregano essential oil (OEO) composition from Northwestern Argentinean regions and to evaluate its effect on the lactic starter cultures. The oregano used, Origanum vulgare var hirtum, was obtained from Andalgalá, Catamarca. The essential oil presented high amounts of α-terpinene (10%), γ-terpinene (15.1%), terpinen-4-ol (15.5%) and thymol (13.0%) as the main components. No negative effect on growth or metabolic activity of lactic acid bacteria Streptococcus thermophilus CRL 728 and CRL 813, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CRL 656 and CRL 468, and Lactococcus lactis subsp. lactis CRL 597 up to the maximum concentration (200 μg/g) assayed was observed. No differences in the organoleptic characteristics of semi-hard cheeses flavored with oregano essential oil (200 μg/g) and homemade cheeses flavored with oregano leaves were found. With respect to the microbiological quality of the products, neither enterobacteria nor mold and yeast were detected during ripening in essential-oil flavored cheese compared to control cheese (enterobacteria 2 × 10³ UFC/g) and cheese flavored with oregano leaves (mold/yeast 4 × 10(4) CFU/g). Our results showed that the use of oregano essential oil and lactic starter culture considerably improved cheese quality.

El objetivo de este trabajo fue estudiar la composición del aceite esencial de orégano recolectado en el noroeste argentino y evaluar su efecto sobre algunos fermentos lácticos. El orégano recolectado correspondió a la especie Origanum vulgare var. hirtum proveniente de Andalgalá, Catamarca. En su aceite esencial (obtenido por arrastre con vapor de agua) se detectó principalmente α-terpineno (10%), γ-terpineno (15,1%), terpinen-4-ol (15,5%) y timol (13,0%). El aceite esencial no tuvo efecto inhibitorio (máxima concentración ensayada 200 μg/g) sobre el crecimiento ni sobre la actividad metabólica de Streptococcus thermophilus CRL 728 y CRL 813, de Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CRL 656 y CRL 468, y de Lactococcus lactis subsp. lactis CRL 597. No se observaron diferencias en las características organolépticas de quesos semiduros aromatizados con el aceite esencial (200 μg/g) comparados con quesos artesanales aromatizados con hojas de orégano. Respecto de la calidad microbiológica de los productos, no se detectaron enterobacterias ni hongos o levaduras durante la maduración en los quesos aromatizados con el aceite esencial de orégano comparados con los quesos control, que presentaron desarrollo de enterobacterias (2 × 10³ UFC/g), y con los quesos elaborados con hojas de orégano, en los que hubo desarrollo de hongos/levaduras (4 × 10(4) CFU/g). Los resultados obtenidos demostraron que el uso del aceite esencial de orégano y del fermento láctico incrementó la calidad general de los quesos artesanales.

Efeito da composição de bactérias láticas e da suplementação do soro de leite na cinética de acidificação, crescimento celular e produção de nisina / Effect of lactic acid bacteria composition and the supplementation of milk whey on acidification kinetics, cell growth and nisin production

As bactérias ácido-láticas (BAL) são micro-organismos que auxiliam nas características organolépticas, funcionais e de bioconservação de produtos fermentados. A utilização do soro de leite como meio de cultivo natural enaltece o conceito da produção de biomoléculas de alto valor agregado, como bacteriocinas, já que é um subproduto gerado por indústrias de laticínios e considerado um agente poluidor. A inulina é um ingrediente prebiótico que promove seletivamente o crescimento de culturas probióticas. Nesse âmbito, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da composição da cultura de Lactococcus lactis (LL) em cocultura com Streptococcus thermophilus (ST) e da suplementação da base de soro de leite com inulina: (i) nos parâmetros cinéticos de acidificacão, (ii) no crescimento celular, (iii) na viscosidade do produto e (iv) na atividade antimicrobiana da nisina. A fermentação do soro de leite com Lactococcus lactis em cocultura com Streptococcus thermophilus proporcionou a maior taxa de acidificação (Vmax=7,93x10-3 upH/min), assim como apresentou o menor tempo para atingir a velocidade máxima de acidificação (Tvmax=1,13 h). A adição de 2% de inulina ao soro de leite fermentado pela cocultura binária fez com que o tempo para completar o cultivo fosse o mais curto (TpH4,5=4,43 h) quando comparado aos demais ensaios. Quanto ao crescimento celular, pode-se observar que a inulina não afetou significativamente a contagem microbiológica, quando as cepas ST e LL foram utilizadas separadamente no processo fermentativo. Em particular, a adição de 4% de inulina reduziu em 1,2 LogUFC/mL e 0,92 LogUFC/mL a contagem de ST e LL (em monocultura), respectivamente. Por outro lado, em coculturas binárias (ST-LL), percebeu-se ganho na contagem microbiológica nos ensaios que receberam suplementação do ingrediente prebiótico, ou seja, quando adicionados 2% e 4% de inulina, houve aumento de 1 LogUFC/mL e de 1,34 LogUFC/mL na contagem de ST, respectivamente. No caso da cepa LL em cocultura com ST, a suplementação de 2% e 4% do prebiótico aumentou em 0,31 LogUFC/mL e 0,75 LogUFC/mL, respectivamente. A concentração de ácido lático também foi mais elevada nos cultivos realizados com a cocultura binária, sendo 4,56 g/L (na ausência de inulina), 5,28 g/L (com adição de 2% de inulina) e 5,71 g/L (com suplementação de 4% de inulina). A viscosidade foi influenciada tanto pela adição de inulina como pelo efeito sinérgico da cocultura, sendo que o maior valor (7,38 mPas) foi obtido pela cocultura ST-LL e pela adição de 4% do ingrediente prebiótico. Quanto à produção de nisina, observou-se que, no cultivo em cocultura (ST-LL), a concentração de 2% de inulina aumentou em 102% a atividade antimicrobiana quando comparada com a cultura pura LL. Vale ressaltar que ambas as cepas satisfizeram os requisitos tecnológicos relativos à produção de laticínios funcionais

Lactic acid bacteria (LAB) are microorganisms that help in the organoleptic and functional characteristics and in the biopreservation of fermented products. The use of milk whey as a culture medium extols the concept of the production of high value-added biomolecules, such as bacteriocins, since it is a by-product generated by the dairy industry and considered a pollutant. Inulin is a prebiotic ingredient that promotes selectively the growth of probiotic cultures. In this context, the aim of this study was to evaluate the effect of culture composition Lactococcus lactis (LL) in co-culture with Streptococcus thermophilus (ST) and the supplementation of milk whey with inulin on: (i) the acidification kinetic parameters, (ii) the cell growth, (iii) the product viscosity, and (iv) the antimicrobial activity of nisin. The fermentation of milk whey by Lactococcus lactis in coculture with Streptococcus thermophilus provided the highest acidification rate (Vmax = 7.93x10-3 upH/min) and the shortest time to reach the maximum acidification rate ( TVmax = 1.13 h). The addition of 2% inulin in the binary coculture binary led to the shorter time to complete the fermentation (TpH4,5 = 4.43) compared to the other tests. With regard to cell growth, it can be observed that the addition of inulin did not affect the microbiological count of pure cultures of ST and LL strains in the fermentation process. In particular, the addition of 4% inulin reduced by 1.2 Log CFU/mL and 0.92 Log CFU/mL the counts of ST and LL (monoculture), respectively. In the other hand, the binary co-cultures cultivations (ST-LL) with the addition of 2% and 4% inulin increased by 1 LogCFU/mL and 1.34 Log CFU/mL in the case of the ST counts and 0.31 log CFU/mL and 0.75 log CFU/mL the counts of LL, respectively. Lactic acid concentration was higher in cultivations carried out by binary cocultures, thus being 4.56 g/L (in the absence of inulin), 5.28 g/L (with addition of 2% inulin) and 5.71g/L (supplemented with 4% inulin). The viscosity was influenced by the addition of prebiotic ingredient and by the synergistic effect of binary coculture, being the highest value (7.38 mPas) obtained by the addition of 4% inulin. Finally, as regards the production of nisin noted that in the binary coculture cultivations (ST-LL), the concentration of 2% inulin increased at 102% the antimicrobial activity when compared to the pure culture LL. It is worth mentioning that both strains met the technological requirements as regards the production of functional dairy products

Las leches fermentadas potencialmente probióticas frente a la inflamación intestinal y el cáncer / Potential of probiotic fermented milks in intestinal inflammation and cancer

Mediante modelos con animales se demostró que el consumo de leches fermentadas con microorganismos potencialmente probióticos puede modular la respuesta inmunitaria del hospedador, manteniéndolo en estado de vigilancia, lo que le ayudaría a enfrentar enfermedades como la inflamación intestinal y algunos tipos de cáncer, mejorando su calidad de vida...

Interference of different storage temperatures in the dynamics of probiotic Bifidobacterium spp. and Streptococcus thermophilus starter cultures in fermented milk / Interferência de diferentes temperaturas de armazenamento na dinâmica de Bifidobacterium spp. probióticas e cultura starterStreptococcus thermophilus em leite fermentado

The variations of temperature during the cold chain can impair the quality of live foods, such as fermented milks. Probiotic bacteria are commonly added to food to provide the consumer with beneficial effects. Nevertheless, the concentration of probiotic in the end products should be elevated to ensure functionality. The aim of this study was to evaluate the viability of probiotic strains of bifidobacteria and starter strain of Streptococcus thermophilus in fermented milks at storage temperatures of 4 and 10ºC, for a period of 28 days. Commercial cultures of Bifidobacterium spp. were added to milk fermented by Streptococcus thermophillus and stored for 28 days at 4 and 10ºC. During this period, bifidobacteria and S. thermophilluscultures were monitored to check their behavior in the evaluated storage conditions. Viable bifidobacteria and S. thermophillus counts showed no significant variation during storage at 4 and 10ºC (p < 0.05), indicating that both of these conditions are adequate for maintaining their initial concentrations. The results indicate that the storage conditions usually adopted in sale establishments of dairy products are suitable to maintain bifidobacteria and S. thermophillus cultures in fermented milk.(AU)

As variações de temperatura que ocorrem durante a cadeia refrigerada da produção leiteira pode interferir na qualidade de alimentos bioativos, como leites fermentados. Bactérias probióticas são usualmente adicionadas a alimentos, visando a oferecer ao consumidor efeitos benéficos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade de culturas probióticas de bifidobactérias e de cultura starter de Streptococcus thermophilus em leites fermentados, armazenados nas temperaturas de 4 e 10ºC por um período de 28 dias. Culturas comerciais de Bifidobacterium spp. foram adicionadas ao leite fermentado produzido com Streptococcus thermophillus e estocados por 28 dias a 4 e 10ºC. Nesse período, as culturas de Bifidobacterium spp. e Streptococcus thermophillus foram monitoradas, com o objetivo de verificar seus comportamentos nas temperaturas de estocagem testadas. As contagens de ambos os micro-organismos não apresentaram variação significativa ao longo do período de estocagem a 4 e a 10ºC (p < 0,05), indicando que as duas temperaturas testadas podem oferecer condições adequadas de conservação desse produto. Os resultados obtidos indicaram que as condições de conservação de alimentos usualmente adotadas para produtos lácteos em estabelecimentos comerciais são adequadas para manter as contagens de bifidobactérias e Streptococcus thermophillus em leites fermentados.(AU)

Biochemical characteristics and viability of probiotic and yogurt bacteria in yogurt during the fermentation and refrigerated storage

This research aimed to investigate the viability of probiotic bacteria [Lactobacillus acidophilus LA-5 and Bifidobacterium lactisBB-12] and yogurt bacteria [Streptococcus thermophiles and Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus] in yogurt during the fermentation, immediately after fermentation and during refrigerated storage [21 d, 4°C]. Also the biochemical characteristics of milk as affected by the commercial 4-strain mixed starter culture were investigated. Storage time affected the viability of all bacterial species. The concentration of lactic acid during the fermentation increased in parallel with the titrable acidity, and the concentration of acetic acid was proportional to the viability of Bifidobacterium lactis. The acetaldehyde level was decreased in the yogurt from day 0 up to the end of the storage. Streptococcus thermophiles and Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricuswere multiplied considerably during the fermentation. Streptococcus thermophiles could maintain its viability to the highest level, but Lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus lost its viability rapidly during the cold storage compared to Streptococcus thermophilus. The multiplication and viability of probiotic bacteria were also influenced by the associative strains and species of yogurt organisms. Bifidobacteria counts were satisfactory. The loss of viability for bifidobacteria was gradual and steady during the storage, and they showed good stability during the storage as compared to Lactobacillus acidophilus

Comportamento de cepas distintas de Lactobacillus acidophilus em queijo petit-suisse

O objetivo do presente trabalho foi avaliar as características de físico-químicas e microbiológicas de queijo petit-suisse processado com a adição de duas cepas de Lactobacillus acidophilus: LA-14 (potencialmente probiótica) e La-5 (comprovadamente probiótica), utilizando Streptococcus thermophilus TA040 como cultura starter. Três queijos petit-suisse foram preparados: Q1 (controle:TA040), Q2 (TA040 + LA-14) e Q3 (TA040 +La-5). Foram realizadas análises microbiológicas (determinação das populações dos microrganismos La-5, La-14 e TA040) e físico-químicas (umidade e pH) após 1, 7, 14, 21 e 28 dias de armazenamento dos produtos a 4±1°C. As populações de L. acidophilus oscilaram entre 7,46 e 7,62 log UFC g -1 para La-5 e entre 6,39 e 6,83 log UFC g -1 para LA-14, evidenciando que a sobrevivência de L. acidophilus no produto depende de características particulares da cepa. Populações superiores da cultura starter foram observadas para Q2 (9,58 - 9,68 log UFC g -1 ) e Q3 (9,42 - 9,79 log UFC g -1 ), quando comparadas a Q1 (9,11 - 9,23 log UFC g -1 ), sugerindo sinergismo entre L. acidophilus e o starter. A umidade e o pH permaneceram estáveis e não diferiram entre os queijos após o 1º dia de armazenamento (p>0,05). As características peculiares das cepas de L. acidophilus determinaram os comportamentos distintos observados nos queijos petitsuisse, sendo possível detectar a melhor adaptação da cepa La-5 ao produto, o que resultou em populações significativamente superiores quando comparada a LA-14.

Particular behavior of different Lactobacillus acidophilus strains in petit-suisse cheese. The objective of this study was to evaluate the physico-chemical andmicrobiological characteristics of petit-suisse cheeses manufactured with the addition of two Lactobacillus acidophilus strains: LA-14 (potentially probiotic) and La-5 (probiotic culture), using Streptococcus thermophilus TA040 as starter culture. Three cheese-making trials were prepared: Q1 (control: with TA040), Q2 (with TA040 + LA-14), and Q3 (with TA040 + La-5). Parameters analyzed included microbial counts of probiotic, potentially probiotic and starter microorganisms, and physico-chemical parameters (pH and moisture) after 1, 7, 14, 21, and 28 days of storage of the product at 4±1°C. Viable counts of L. acidophilus remained between 7.46 and 7.62 log CFU g -1 for La-5, and between 6.39 and 6.83 log CFU g -1 for LA-14. As for the starter, higher populations were observed for Q2 (9.58 - 9.68 log CFU g -1 ) and Q3 (9.42 - 9.79 log CFU g -1 ), when compared to Q1, which suggests synergism between L. acidophilus and the starter culture. Moisture and pH values remained stable for cheeses Q1, Q2, and Q3, and no significant differences were detected between cheeses after the first day of storage (p>0.05). Particular features of both L. acidophilus strains determined different behavior in petit-suisse cheese, and the better adaptation of the La-5 to the product environment was perceptible, since higher populations were observed when compared to LA-14.

Increase of stress resistance in Lactococcus lactis via a novel food-grade vector expressing a shsp gene from Streptococcus thermophilus

The effects of the expression of a small heat shock protein (shsp) gene from Streptococcus thermophilus on stress resistance in Lactococcus lactis under different environmental stresses were investigated in this study. pMG36e-shsp, an expression vector, was first constructed by inserting a shsp open reading frame (ORF) cloned from S. thermophilus strain St-QC into pMG36e. Then, a food-grade expression vector, pMG-shsp, was generated by deleting the erythromycin resistance gene from pMG36e-shsp. The transformation rate of pMG-shsp was comparable to that of pMG36e-shsp when each of these two vectors was introduced into L. lactis. These results demonstrated that the shsp ORF could successfully used as a food-grade selection marker in both pMG-shsp and pMG36e-shsp. Furthermore, the growth characteristics were almost the same between L. lactis ML23 transformants harboring pMG36e or pMG-shsp. The survival rate of L. lactis ML23 expressing the shsp ORF were increased to 0.032%, 0.006%, 0.0027%, 0.03%, and 0.16% under the following environmental stresses: heat, acid, ethanol, bile salt and H2O2, respectively. These results indicated that the expression of the shsp gene in the food-grade vector pMG-shsp conferred resistance to environmental stresses without affecting the growth characteristics of L. lactis ML23.

Suitability of MRS-bile agar for the selective enumeration of mixed probiotic bacteria in presence of mesophilic lactic acid cultures and yoghurt bacteria

Measuring the viability of probiotic microorganisms in food products using plate count methodology is a common practice due to the simplicity [ease of performance], inexpensive and routine testing characters of this method. In present study, the suitability of de man rogosa and sharpe agar [MRS] bile agar medium for the selective enumeration of mixed probiotic bacteria [Lactobacillus acidophilus LA-5, L. casei 431 and Bifidobacterium lactis BB-12] in presence of mesophilic lactic cultures [Lactococcus lactis ssp. lactis and Lactococcus lactis ssp. Cremoris] and yoghurt bacteria [Streptococcus thermophilus and Lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus] was investigated. Yoghurt bacteria did not grow neither in presence of 0.15% nor 0.30% of bile salts, as was expected. Mesophilic lactic starters could grow at both concentrations of bile salts at all incubation temperatures except 37°C. According to these results, MRS-bile agar [0.15 bile salts] could be successfully used for selective enumeration of mixed probiotic cultures in presence of mesophilic culture and/or yoghurt bacteria when plates were incubated at 37°C for 72 h

Growth and exopolysaccharide production by Streptococcus thermophilus ST1 in skim milk

To analyze the exopolysaccharide (EPS) production by Streptococcus thermophilus ST1, cultures were cultivated in 10 percent (w/v) reconstituted skim milk under different growth conditions including various temperatures and pHs of growth medium, supplementation of the medium with various carbon sources (glucose, lactose, sucrose, galactose and fructose) and nitrogen source (whey protein concentrate, or WPC). The results showed that most EPS production by strain ST1 was obtained at a temperature (42°C) and pH (6.5) optimal for its growth. Supplementation of the skim milk medium with either carbohydrates or WPC increased both growth and polymer formation by different extents, with sucrose being most effective among the carbon sources tested. Under the optimal cultural conditions, i.e. pH 6.5, 42°C with 2 percent (w/v) sucrose and 0.5 percent (w/v) WPC, 135.80 mg l-1 of EPS was produced by strain ST1. The monosaccharide composition of the EPS was determined to be glucose and galactose (2:1), and the molecular mass of the EPS was 3.97 × 10(6) Da. The aqueous solution of the EPS at 1 percent (w/v) showed relatively high viscosity, indicating the potential of this EPS-producing S. thermophilus strain for applications in the improvement of physical properties of fermented milk products.

Effect of freeze drying process on some properties of Streptococcus thermophilus isolated from dairy products

The present investigation represents the effect of freeze drying on some properties as acid and bile tolerance of Streptococcus thermophilus MTCC 1938 culture isolated from dairy products. The cell paste obtained from milk based medium was freeze dried with a pressure of 50-100 mtorr for 24h at -40ºC. Acid and bile tolerance test exhibited 3.8-4.9 and 3.2-3.8 log counts reduction after freeze drying respectively.

Development of pulsed field gel electrophoresis and application for characterization and identification of Lactobacillus and Streptococcus thermophilus / 中华预防医学杂志

<p><b>OBJECTIVE</b>To develop a pulsed field gel electrophoresis (PFGE) method for molecular typing of Lactobacillus and Streptococcus thermophilus (S. thermophilus) and to apply it in identification and characterization of both bacteria isolated from yoghurt collected from Beijing supermarket.</p><p><b>METHODS</b>The five most useful restriction enzymes including Apa I, Not I, Sfi I, Xba I and Sma I were chosen to cut DNA of 52 strains of Lactobacillus, S. thermophilus as well as associated standard bacteria strains. The endonucleases and electrophoresis conditions for PFGE analysis were optimized and applied in molecular typing of Lactobacillus and S.thermophilus isolates. Cluster analysis based on the PFGE data was conducted. The identification results of PFGE were compared with those obtained in biochemical and 16s ribosomal RNA PCR identification tests.</p><p><b>RESULTS</b>Not I was suitable for L. bulgaricus, L. fermentum and L. delbrueckii digestion. While Apa I was an appropriate endonuclease for S. thermophilus, L. acidophilus and L. casei digestion. The results of molecular typing indicated that 24 strains of L.bulgaricus and 15 strains of S. thermophilus were grouped into 8 types by PFGE method, respectively. While 7 strains of L.acidophilus were grouped into 3 types and 2 strains of L. delbrueckii were grouped into 2 different PFGE types.</p><p><b>CONCLUSION</b>The results of PFGE analysis are in compliance with those of 16s rRNA PCR and biochemical identification. The PFGE method developed in this study is suitable for molecular characterization of both Lactobacillus and S. thermophilus.</p>

Probiotic Fermented Milk Containing Dietary Fiber Has Additive Effects in IBS with Constipation Compared to Plain Probiotic Fermented Milk

BACKGROUND/AIMS: Although controversial, probiotics and dietary fiber are commonly used for patients with irritable bowel syndrome (IBS). We evaluated the effects of multistrain probiotics on the symptoms of IBS to determine whether the addition of dietary fi ber had an additive effect on constipation-predominant IBS. METHODS: A total of 142 participants who met the Rome III criteria were recruited and randomized into a control group or a test group. Participants in the control group received multistrain probiotic fermented milk with Streptococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium infantis; the participants in the test group received the same probiotic fermented milk mixed with dietary fi ber such as sea tangle extracts, radish extracts and glasswort extracts. The patients were treated for four weeks. RESULTS: Most of the symptoms of IBS, with the exception of fl atulence, stool consistency, and frequency of defecation, signifi cantly improved in both groups. In the analysis of IBS subtypes, especially constipation-predominant IBS, the frequency and duration of defecation and straining at stool were improved more in the test group than in the control group. CONCLUSIONS: Dietary fiber had additive benefits for the symptoms of constipation, especially in constipation-predominant IBS.

Meta analysis of lactic acid bacteria as probiotics for the primary prevention of infantile eczema / 中国当代儿科杂志

<p><b>OBJECTIVE</b>To determine whether lactic acid bacteria as probiotics is efficacious in the primary prevention of infantile eczema or atopic eczema.</p><p><b>METHODS</b>For this meta analysis of randomized controlled trials (RCT) describing the efficacy of probiotics in infants with eczema or atopic eczema at ages of ≤2 years, a comprehensive search in the databases was performed up to January 2010. Three reviewers independently evaluated the studies for methodological qualities. RevMan 5.0.2 software was used for meta analysis.</p><p><b>RESULTS</b>Twelve RCTs on the preventive effects of lactic acid bacteria as probiotics on infantile eczema were included, and 7 of the 12 RCTs reported the preventive effect of lactic acid bacteria on atopic eczema. The meta analysis showed that there was an overall significant reduction in infantile eczema and atopic eczema favoring lactic acid bacteria compared with placebo. The relative risk (RR) ratios for eczema and atopic eczema were 0.80 (95%CI: 0.70-0.90; P<0.01) and 0.78 (95%CI: 0.64-0.97; P<0.01), respectively. Lactic acid bacteria combined with other probiotics decreased significantly the incidence of eczema, with a RR ratio of 0.79 (95%CI: 0.68-0.93; P<0.01). The use of lactic acid bacteria alone did not result in a reduction in the incidence of eczema, with a RR ratio of 0.85 (95%CI: 0.69-1.05; P>0.05).</p><p><b>CONCLUSIONS</b>The data from this meta analysis suggest that lactic acid probiotics combined with other probiotics play a role in the prevention of infantile eczema. There is insufficient evidence to recommend single use of lactic acid bacteria for prevention of eczema. Further studies are required to determine whether the findings are reproducible.</p>

Bebida fermentada probiótica de soro de leite / Probiotic drink of milk serum

O presente trabalho propôs desenvolver uma bebida composta por soro de leite fermentado com microrganismos probióticos, saborizada com polpa de frutas, caracterizando-a em seus aspectos físico-químicos, microbiológicos e sensoriais. Foram elaborados três tratamentos diferidos apenas pelo tipo de fermento lácteo empregado. Os resultados mostraram a viabilidade tecnológica de apenas um tratamento composto por fermento YC-X11, contendo cepas mistas de L.delbrueckii subsp. bulgaricus e S.salivarius subsp. thermophilus, o qual foi submetida a análise físico-químicas e microbiológicas para caracterização do produto e posterior avaliação sensorial pelo método de escala hedônica. Obteve-se uma bebida probiótica inovadora, de excelente valor nutritivo, dentro dos parâmetros de identidade microbiológica e físico-química e de grande aceitação pelo consumidor final.