Feulgen staining in malpighian tubules of meliponid bees: a methodological contribution

Whole-mounted Malpighian tubules of larvae from two meliponid bee species fixed in acetic acid-ethanol showed apositive cytoplasmic staining with Schiff reagent when submitted to the Feulgen reaction in which acid hydrolysiswas done in 4 M HCl at room temperature. The ability of various treatments applied before the Feulgen acid hydrolysisto abolish this cytoplasmic staining was examined. The aldehyde groups of phospholipids present in the cytoplasm ofthe Malpighian tubules were blocked or removed by sequential treatment with 5% sodium borohydride and acetonechloroform(1:1, v/v) for 15 min each prior to HCl hydrolysis. This treatment is recommended in order to abolish thecytoplasmic (plasmal) reaction and to allow the reliable quantification of DNA by the Feulgen reaction and thediscrimination of nuclear phenotypes in the Malpighian tubules of meliponid bees.

Estudo morfo-fisiológico dos túbulos de Malpighi de Rhodnius prolixus stal 1859 (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) / Morpho-physiological study of malpighian tubules of Rhodnius prolixus stal 1859 (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae)

Foram analisadas modificações nos túbulos de Malpighi de Rhodnius prolixus durante o ciclo alimentar do inseto. As regiões proximais e distais destes túbulos, possuem epitélio simples, envoltos por uma lâmina basal. O citoplasma é homogêneo na região proximal, existindo na distal, numerosos vacúolos, grânulos e concreções de minerais amorfos... A região proximal apresenta interdigitações basais, de aspecto vacuolizado e na região distal estas têm aspecto paralelo. O glicogênio evidenciado nos túbulos de Malpighi é possivelmente a principal fonte de reserva de energia nestas células. A partir de uma hora após a alimentação, a região proximal apresenta uma gradual diminuição do volume do epitélio, com intensa vacuolização na região basal e desorganização parcial das microvilosidades. Com 72h o volume é grande e as mitocôndrias encontram-se espalhadas pelo epitélio. A região distal apresenta concreções de minerais amorfos com aspecto de lamelas concêntricas. Após 24h observa-se muitos vacúolos de conteúdo não-eletrondenso. Os túbulos, quando submetidos a um choque hiperosmótico, apresentam uma desorganização parcial das microvilosidades na região proximal, sem alteração da vacuolização basal. Na região distal, as concreções são expelidas para o lúmen juntamente com porções de membrana, sem quebra da integridade do epitélio, mantendo o padrão em paralelo das interdigitações basais, sugerindo que os íons presentes seriam utilizados na regulação de volume. A ocorrência de uma variação na expressão da Na++K+-ATPase indica que esta enzima participa ativamente da regulação do volume. O mesmo ocorre com VH+-ATPase, cuja intensa atividade expressa com uma hora após o repasto, coincide com o pico de presença de cálcio e fósforo nas concreções de minerais amorfos, com a detecção da Ca++-ATPase por citoquímica ultraestrutural e pela alta atividade da Na++K+-ATPase neste período. O citoesqueleto evidenciou uma variação na expressão da tubulina nos diferentes tempos após a alimentação, diferente dos filamentos de actina, que mantiveram um padrão constante. Estes dados reforçam a importância da alimentação nas modificações morfológicas, na regulação do volume celular e na expressão das ATPases da membrana luminal e baso-lateral nas células dos túbulos de Malpighi de R. prolixus.

Microconcreciones de calcio en túbulos de malpinghi de rhodnius: ultraestructura y morfometría / Microconcretions of calcium in malpinghian tubules of rhodnius ultrastructure and morphometry

Los Rhodnius prolixus son insectos hematófagos que no tienen mecanismos urinarios para eliminar al exterior el exceso de calcio proveniente de la dieta. Haciendo estudios morfométricos en microfotografías de túbulos de Malpighi, hemos comparado Rhodnius con ideas bajas y altas de calcio. La concentración media de Calcio medida en las miconcreciones 21 mM (Bajo Calcio) y 1.000 mM (Alto Calcio). Estos resultados indican que hay grandes diferencias en el modelo de acumulación de Calcio entre ambos grupos. La formación de miconcreciones debe ser un mecanismo para acumular Calcio sin eliminarlo