Larvas recién nacidas de Trichinella spiralis: cinética de agregación eritrocitaria / Newborn larvae of Trichinella spiralis: erythrocyte aggregation kinetics

El objetivo de este trabajo fue estudiar la cinética de agregación eritrocitaria producida por dos concentraciones de larvas recién nacidas (LRN) de Trichinella spiralis. Se trabajó con 5 suspensiones eritrocitarias incubadas con 500 y 1.000±100 LRN/mL durante 120 minutos, con tomas de muestra al tiempo inicial y cada 15 minutos. Los respectivos controles se incubaron de la misma manera con solución salina. Se aplicaron el método de titulación por Polibrene calculando el CexpST y la técnica de análisis de la variancia con las comparaciones múltiples según Tukey. Los resultados mostraron para ambas concentraciones de LRN, que el coeficiente promedio disminuyó con el aumento del tiempo de incubación. En el tratamiento con 1.000 LRN/mL, el coeficiente promedio no presentó diferencias significativas a tiempo 0 y 15 minutos, ni entre 60 y 75 minutos, mientras que con 500 LRN/mL no hubo diferencias entre los tiempos 0, 15 y 30 minutos. Todas las restantes diferencias fueron significativas para ambas concentraciones larvales. El valor promedio de CexpST no difirió significativamente entre los dos tratamientos a tiempo 0 y 15 minutos, pero a todos los otros tiempos fue menor a mayor concentración de larvas. La experiencia realizada indicaría que in vivo, la cantidad de LRN y el tiempo que permanecen en circulación determinan el grado de desializacion eritrocitaria, y por lo tanto el riesgo de activación T y de alteraciones hemorreológicas en el hospedador.

The aim of this work was to study the kinetics of erythrocyte aggregation produced by two concentrations of Trichinella spiralis newborn larvae (NL). Work was performed with 5 erythrocyte suspensions incubated with 500 and 1000 ± 100 NL/mL for 120 minutes, taking samples at the initial time and every 15 minutes. The respective controls were incubated in the same way with saline solution. The Polybrene titration method calculating the CexpST and the variance analysis technique with the multiple comparisons according to Tukey were applied. The results showed that the average coefficient decreased with the rise in incubation time for both NL concentrations. The average coefficient did not present significant differences between the initial time and 15 minutes, nor between 60 and 75 minutes in the treatment with 1000 NL/mL, while there were no differences between 0,15 and 30 minutes in the treatment with 500 NL/mL. All other differences were significant for both larval concentrations. The average value of CexpST did not differ significantly between the two time treatments at zero time and 15 minutes, but at all other times it was less at a higher concentration of larvae. The experience carried out would indicate that in vivo, the amount of NL and the time that they remain in circulation determines the degree of erythrocyte desialylation, and therefore, the risk of T activation and hemorrheological alterations in the host.

O objetivo desse trabalho foi estudar a cinética de agregação eritrocitária produzida por duas concentrações de larvas recém nascidas (LRN) de Trichinella spiralis. O trabalho foi feito com 5 suspensões eritrocitárias incubadas com 500 e 1.000 ± 100 LRN/mL por 120 minutos, colhendo amostras no tempo inicial e a cada 15 minutos. Os respectivos controles foram incubados da mesma forma com solução salina. Foi aplicado o método de titulação por Polibreno e se calculou CexpST. e a técnica de análise da variância com as comparações múltiplas de acordo com Tukey. Os resultados mostraram, para ambas as concentrações de LRN, que o o coeficiente médio diminuiu com o aumento do tempo de incubação. No tratamento com 1.000 LRN/mL o coeficiente médio não mostrou diferenças significativas no tempo 0 e 15 minutos ou entre 60 e 75 minutos, ao passo que não houve diferenças com 500 LRN/mL entre tempos 0, 15 e 30 minutos. Todas as restantes diferenças foram significativas para ambas as concentrações de larvas. O valor médio de CexpST não diferiu significativamente entre os dois tratamentos no tempo de 0 e 15 minutos, mas em todos os outros tempos foi menor em maior concentração de larvas. A experiência realizada indicaria que in vivo a quantidade de LRN e o tempo que permanecem em circulação determina o grau de dessialização dos eritrócitos e, portanto, o risco de ativação T e de alterações hemorreológicas no hospedeiro.

Efecto de la temperatura sobre la viabilidad de larvas de Trichinella spiralis / Effect of temperature on the viability of Trichinella spiralis larvae

El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de diferentes temperaturas sobre la viabilidad de larvas libres y enquistadas de Trichinella spiralis aisladas en el sudoeste de la provincia de Buenos Aires, Argentina. Se trataron larvas libres y enquistadas a diferentes temperaturas (-30 °C, -20 °C, 4 °C, 20 °C, calentamiento gradual entre 0-100 °C). Se determinó el tiempo necesario para matar el 100 % de las larvas. Durante los primeros días, la mortalidad larvaria en todos los tratamientos con frío aumentó signifcativamente en función del tiempo. En todos los casos, las larvas libres sobrevivieron menor cantidad de días que las enquistadas. A -30 °C, -20 °C y 20 °C no se observaron diferencias signifcativas entre las curvas de mortalidad de cada estadio larvario, pero a 4 °C la mortalidad fue menos intensa entre las larvas enquistadas. El calentamiento disminuyó la viabilidad, sin observarse diferencias entre estadios larvarios. La totalidad de las larvas libres y enquistadas había muerto a los 61 y 95 días (-30 °C), a los 160 y 180 días (-20 °C), a los 280 y 330 días (4° C), y a los 460 y 590 días (20 °C), respectivamente. Fue necesaria una cocción durante 15 minutos a 90 °C para matar al 100 % de las larvas libres y a 100 °C para lograr igual mortalidad de las enquistadas. Nuestros resultados indican que la temperatura y los tiempos tradicionalmente utilizados para tratar productos cárnicos con potencial de transmisión de T. spiralis no serían los más efectivos para lograr la inactivación de la totalidad de larvas vivas de este parásito.

The aim of this work was to study the effect of temperature on the viability of free and encysted larvae of Trichinella spiralis from southwest Buenos Aires province, Argentina. Larvae were treated at variable temperatures (-30 °C, -20 °C, 4 °C, 20 °C, gradual heating between 0-100 °C). The time necessary to kill 100 % of larvae was calculated. During the frst days of freezing, larval mortality signifcantly increased as a function of time. Regardless of temperature, encysted larvae survived longer than the free ones. At -30 °C, -20 °C, and 20 °C there were no signifcant differences between the survival curves for each larval stage. At 4 °C, mortality was less severe for encysted larvae. All free and encysted larvae died at 61 days and 95 days (-30 °C), 160 days and 180 days (-20 °C), 280 days and 330 days (4 °C) and 460 days and 590 days (20 °C), respectively. Cooking at 90 °C and 100 °C during 15 minutes killed 100 % of free and encysted larvae, respectively. Our results suggest that temperatures and exposure times traditionally used to treat meat products with a potential to transmit T. spiralis are not entirely effcient.

Efecto de la temperatura en la viabilidad e infectividad de Trichinella spiralis / Effect of the temperature in the viability and infectividad of Trichinella spiralis

Trichinella spiralis es el parásito causante de la Trichinellosis una zoonosis endémica en nuestro estado la cual afecta a mamíferos entre ellos el humano. La principal causa de infección para este es el consumo de carne mal cocida de cerdo infectada con la larva infectante (LI) de T. spiralis. El propósito de este trabajo es determinar el efecto que tiene la temperatura sobre este parásito para poder proporcionar a la población medidas profilácticas las cuales se puedan poner en práctica de manera sencilla y económica contra esta enfermedad. Material y Métodos: En este estudio se utilizaron 2 modelos experimentales: A) 2 cerdos raza York de 6 meses de edad (control y problema) el control sin infección y un problema infectado con T. spiralis para evaluar el efecto de la temperatura (cocción, frita, horno de microondas, olla de presión, refrigeración y congelación) en la viabilidad e Infectividad por medio de digestión artificial para obtener paquete larvario y observación directa al microscopio por compresión para observar sus características físicas y B) 3 ratas Long Evans se inocularon con muestras de carne (de cada procesamiento de temperatura) infectada obtenida del modelo de cerdo en cuánto a los resultados de los procedimientos empleados a temperaturas altas (cocción y frita) por compresión en la cocción a 96ºC la viabilidad dió positiva hasta los 30 min. Después de este tiempo sus características no fueron viables (sus características físicas se observaron alteradas), en cuánto a la Infectividad (capacidad de completar su ciclo vital), se observó positiva hasta el minuto 30, después de este tiempo la Infectividad fue negativa. Al observar los resultados obtenidos podemos concluir que T. spiralis es un parásito con gran capacidad de resistencia a condiciones extremas de temperatura, siendo efectivo el cocimiento de la carne en la olla de presión a los 30 minutos la infectividad y viabilidad fue negativa, en caso de no contar con la olla de presión.

Implante histológico de trichinella spiralis experimental / Histologic experimental implant of trichinella spiralis

El presente estudio nos permitió conocer los 3 estadios del parásito y detección de anticuerpos desde la segunda semana con un peso molecular de 45 kDa. Perspectivas, los cortes histológicos serán estudiados por técnicas inmunohistoquímicas con anticuerpos específicos para determinar en qué estadio están presentes y su probable papel a la respuesta inmune en esta