Diferencia espacial de la incidencia de fiebre hemorrágica argentina y la composición y abundancia de roedores en el ensamble / Spatial difference in the incidence of Argentine Hemorrhagic Fever and composition and abundance of rodents in the assemblage

Resumen La fiebre hemorrágica argentina (FHA) es una enfermedad zoonótica endémica en una amplia zona de la pampa húmeda de Argentina. El agente etiológico es el virus Junin que es mantenido en la naturaleza por el roedor Calomys musculinus y transmitido, principalmente, al humano a través de aerosoles generados de las secreciones y excreciones. Objetivos: Caracterizar la composición y diversidad de los ensambles de pequeños roedores, determinar la abundancia del hospedador C. musculinus y la prevalencia del virus de la FHA en las zonas epidémica, histórica y no endémica de dicha enfermedad en Argentina. Métodos: Para el muestreo de roedores en cada una de las zonas se demarcaron un área central y dos periféricas para 18 localidades de la región central de Argentina (incluyendo las provincias de Córdoba, Buenos Aires y Santa Fe) muestreadas en dos años. Se comparó la abundancia de C. musculinus entre zonas y entre las áreas dentro de cada zona y áreas cercanas entre zonas, utilizando modelos de análisis de varianza anidados. Resultados. Dentro de cada zona, el ensamble de roedores mostró diferencia espacial en la composición específica, diversidad y abundancia de C. musculinus. La zona epidémica registró mayor número de especies y mayor abundancia del hospedador. En zona histórica se capturó el menor número de especies (de roedores) y Akodon azarae fue la más abundante. En zona no endémica la composición del ensamble y la abundancia de C. musculinus variaron entre los dos años. Sólo se detectó infección por virus Junin en C. musculinus correspondientes a la zona epidémica con una prevalencia de 2,7 y 1,1% para los años 2007 y 2008, respectivamente. Conclusión: En este sistema, la abundancia del hospedador estaría afectando la dinámica espacial de este virus, más que la diversidad del ensamble o la presencia de A. azarae.

Background. The Argentine Hemorrhagic Fever (AHF) is a zoonotic disease endemic in a wide area of the humid pampa of Argentina. The etiologic agent is the Junin virus that is maintained in the wild by the rodent Calomys musculinus and transmitted to humans, mainly, through aerosols generated from secretions and excretions. Aims: To characterize and compare the assemblages of small rodent composition and diversity inside the epidemic, historic and non-endemic zone of AHF and to register C. musculinus abundance in each zone and in each area within each zone, registering the prevalence of infection in rodent populations. Method: One central and two peripheral areas were delimited to sample rodents in each zone with different incidence of AHF. Thus, 18 localities were selected to do the sampling in two years. Host abundance between zones and among areas inside each zone and among nearby areas between zones were compared applying nested ANOVA's. Results: In each zone, the rodent assemblage showed differences in composition, diversity and numeric representation of C. musculinus. The epidemic zone was the richest of the three, registering also great host abundance; meanwhile in the historic zone, A. azarae was the dominant numeric species with less number of other species. Regarding the non-endemic zone, the assemblage composition and C. musculinus abundance varied respect the sampled year. Junin virus infection was only detected in C. musculinus individuals corresponding to the epidemic zone, with a prevalence of 2.7 and 1.1% for the years 2007 and 2008, respectively. Conclusion: In this system, the abundance of C. musculinus could be impacting over the pathogen dynamic, rather than the assemblage diversity or the A. azarae presence.

Encuesta poblacional sobre vacunación contra Fiebre Hemorrágica Argentina en zona endémica en la provincia de Santa Fe / Population survey on vaccination against Hemorrhagic Fever Argentina in endemic area in the province of Santa Fe

La fiebre Hemorrágica Argentina es una enfermedad viral aguda grave, de carácter sistémico, con duración de una a dos semanas, con cuadros clínicos de gravedad variable. Su agente transmisor es el virus Junín cuyo reservorio natural es el llamado ratón maicero y su zona endémica de distribución comprende sur de la provincia de Santa Fe, Córdoba, Noroeste de Buenos Aires y La Pampa, en Argentina. La primera medida preventiva para la enfermedad es la vacuna llamada Candid 1. Se realizó una encuesta poblacional para dimensionar en la zona de Venado Tuerto y localidades vecinas el alcance de la vacunación y estimar el conocimiento de la existencia de dicha vacuna, que no es de aplicación obligatoria.

Population survey on vaccination against Argentine Hemorrhagic fever in endemic area in the Province of Santa Fe. Argentine Hemorrhagic Fever is a serious systemic, acute viral disease, with a duration of one or two weeks and of variable gravity. Its transmitting agent is Junín Virus, whose natural reservoir is the corn mouse. Its endemic zone is the south of the province of Santa Fe, Cordoba, northwest of Buenos Aires and La Pampa; in Argentina. The first preventive measure for the disease is the vaccine called Candid 1. A population survey was carried out to measure the extent of vaccination and the knowledge of the vaccine, that is not of compulsory application.

Los nuevos escenarios de transmisión de la fiebre hemorrágica Argentina desde la introducción de la vacuna a virus Junín vivo atenuado (Candid#1): una experiencia en trabajadores golondrinas / New transmission scenarios of the Argentine hemorrhagic fever since the introduction of the live attenuated Junin virus vaccine (Candid #1): an experience in migrant workers

La fiebre hemorrágica Argentina (FHA) es una enfermedad viral aguda grave causada por el virus Junín, de la familia Arenaviridae. El área endémica de la FHA coincide geográficamente con el mayor complejo agroindustrial cerealero de exportación del Argentina. Desde la implementación de la vacunación con Candid#1, se logró una importante reducción de la incidencia y se modificaron los patrones de riesgo. Un estudio previo permitió caracterizar estos cambios e identificar tres escenarios de transmisión: clásico, emergente-reemergente y viajero. Dentro de este último escenario se incluyen los trabajadores migrantes estacionales que se desplazan cada año, principalmente desde la provincia de Santiago del Estero, al área endémica para trabajar en el despanojado de maíz. Con el objetivo de brindar protección a este grupo de trabajadores se inició una campaña de prevención que incluyó: capacitación de personal de salud de esta provincia, educación para la salud e inmunización con vacuna Candid#1. Se vacunaron 3021 trabajadores. Previo a la vacunación, se tomaron muestras de suero en un grupo de 104 voluntarios. Se realizó la detección de anticuerpos neutralizantes específicos para virus Junín en el total de las mismas y 6 (5,76%) arrojaron resultado positivo. El inesperado hallazgo de un elevado porcentaje de trabajadores con anticuerpos, nos sugiere la necesidad de valorar varias hipótesis: a) que el resultado sea producto de un muestreo no probabilístico; b) que podría tratarse de personas que enfermaron en viajes previos, c) o que se vacunaron en viajes previos; d) considerar esta región como un escenario emergente.

The Argentine hemorrhagic fever (AHF) is a severe acute viral disease caused by the Junin virus of the Arenaviridae family. The AHF endemic area coincides geographically with the largest grain export agro-industrial complex of the country [Argentina]. Since the implementation of vaccination with the Candid #1 vaccine, a significant reduction in incidence was achieved and risk patterns were modified. A previous study allowed characterizing these changes and identifying three transmission scenarios: classic, emergent-reemergent, and traveler. The latter scenario includes seasonal migrant workers who move each year, mainly from the province of Santiago del Estero, the endemic area to work in the detasseling of maize. With the objective of protecting this group of workers, a prevention campaign was initiated which included: capacity building of health personnel in the province, health education, and immunization with the vaccine Candid #1. 3,021 workers were vaccinated. Prior to vaccination, serum samples were taken from a group of 104 volunteers. Tests for neutralizing antibodies specific to the Junin virus were performed and 6 (5.76%) tested positive. The unexpected finding of a high percentage of workers with antibodies suggests the need to evaluate several hypotheses: a) that the result is the product of non-probabilistic sampling; b) that it could be people who fell ill in previous travels, c) or who were vaccinated in previous travels; or d) consider this region as an emerging scenario.

Marcadores fenotípicos de atenuación en cepas de virus Junín recuperadas de individuos vacunados con la cepa Junín Candid#1 / Phenotypic markers of attenuation in Junin virus strains recently isolated from individuals vaccinated with Junin Candid#1 strain

La Fiebre Hemorrágica Argentina es una enfermedad producida por el virus Junín. Para la prevención de esta enfermedad se obtuvo una vacuna efectiva denominada Candid#1. Durante un ensayo clínico realizado en el INEVH, dos cepas de virus Junín fueron aisladas de sangre periférica de dos voluntarios mediante co-cultivo de células mononucleares. El objetivo de este trabajo fue comparar las características fenotípicas de atenuación de esas dos cepas recuperadas de humanos con las de la vacuna Candid#1 utilizando los indicadores de atenuación desarrollados por Contigiani y Sabattini en 1977. A tal fin se midieron los índices de letalidad, infección y protección en cobayos y ratones de diferentes edades. Las tres cepas investigadas resultaron letales para ratones recién nacidos pero no para ratones de 10 a 12 días, ratones adultos ni cobayos, aun a la más baja dilución inoculada. Los cobayos inoculados con las cepas recuperadas de humanos y con la cepa Candid#1 no presentaron síntomas de enfermedad y mostraron estar protegidos cuando fueron desafiados con una cepa patógena. Los índices de infección y de protección hallados indican que estas cepas poseen elevada capacidad infectante y protectora en las especies animales aquí estudiadas. Estos resultados demuestran que las cepas de virus Junín aisladas de voluntarios inmunizados con Candid#1 mantienen el mismo fenotipo atenuado de la vacuna Candid#1 después de un pasaje por humanos.

Argentine hemorrhagic fever is a severe acute disease caused by Junin virus. For prevention of this disease an effective vaccine called Candid#1 has been developed, composed of a live attenuated Junin virus strain. During a clinical trial conducted at Instituto Nacional de Enfermedades Virales Humanas (INEVH) in 2005, Junin virus was isolated from two vaccinated volunteers by co-culture of peripheral mononuclear blood cells. The aim of this study was to compare the strains isolated from these human volunteers with Candid#1 strain regarding phenotypic characteristics of attenuation according to the indicators developed by Contigiani and Sabattini in 1977. The three strains were lethal to suckling mice but not to 10-12 days old mice and guinea pigs. Surviving guinea pigs from primary infection were protected when challenged by intra-muscular inoculation with lethal doses of a virulent strain. Infection and protection rates indicate that these strains are highly infective and protective in the hosts studied herein. These results demonstrate that Junin virus strains isolated from volunteers immunized with Candid#1 maintain the same attenuated phenotype of Candid#1 vaccine after one passage in humans.

Estudio de marcadores fenotípicos de atenuación en cepas de virus Junin recuperadas de individuos recientemente vacunados con la cepa Junin Candid #1: índices de letalidad y protección en animales de laboratorio / Study of phenotypic markers of attenuation in Junin virus strains recovered from individuals vaccinated with strain recently Junin Candid # 1: lethality rates and protection of laboratory animals

La fiebre hemorrágica argentica (FHA), es una enfermedad aguda producida por el vírus Junin (VJUN) siendo el roedor Calomys musculinus el principal reservorio del VJUN.Para la prevención de la FHA, tanto el control de los roedores como el control del contacto humano com la problación de roedores infectados sin impraticables. Por esto, desde el aislamiento de VJUN, todos los esfuerzos han estado dirigidos a la obtenciõn de una vacuna efectiva. La cepa atenuada de VJUN Candid#1 há sido resultado de estas investigaciones. Durante el ensayo clínico puente realizado em el Instituto Nacional de Enfermedades Virales Humans (INEVH), em el año 2005, para comparar la vacuna Candid#1 producida em EE.UU. com la vacuna producida em la Argentina, se logro aislar por cocultivo de células mononucleares de sangre periférica (CMNs) dos cepas de VJUN (65604 y 65727) de 10 voluntarios inoculados com Candid#1 que concurrieron entre los dias 9 y 10 post vacunación com sintomas de cefalea, mialgia y decaimiento. Dichas cepas fueron identificadas como VJUN por netralización de placas bajo agar enfrentadas com um suero espercífico anti-Candid obtenido em conejo. El objetivo de este trabajo fue comparar lãs características fenotípicas de atenuación de las dos cepas recuperadias con la vacuna Candid#. Para ello se utilizaron cobayos y ratones de diferentes edades como modelo de este estúdio. Se midieron os índices de letalidad, infección y proteccíón. El ratón recién nacido (rrn) fue el único que mostro letalidad com las tres cepas estudiadas, sin embargo para ratónde 10 a 12 días, ratón adulto (rad) y cobayo, ninguna de las cepas fue letal, aún para la más baja dilución inoculada. Los cobayos inoculados com las cepas recuperadas65604 y 65727 com la cepa Candid#1 no mostraron sintomas de enfermedad y resultaron protegidos cuando fueron desafiados com la cepa patógena P3790. Se observo que los valores obtenidos de tanto de los índices de infección como de protección fueron muy bajos, lo que indica que estas cepas tienen un alto poder infectante y que son altamente protectoras. En base a los resultados obtenidos podemos concluir que las cepas de VJUN recuperadas de indivíduos vacunados com Candid#1 mantienen las características de atenuaciõn de la vacuna, no detectándose ninguma evidencia de reversión de Candid#1 luego de um pasaje em humanos.

Vacuna contra la fiebre hemorrágica argentina Candid#1 producida en la Argentina: Inmunogenicidad y seguridad / Candid#1 vaccine against Argentine Hemorrhagic Fever produced in Argentina: Immunogenicity and safety

Se realizó un estudio clínico en 946 voluntarios humanos sanos, donde se comparó la vacuna Candid#1 producida en Argentina con la elaborada en EE.UU., que había sido utilizada en estudios previos. Como objetivo primario se evaluó la equivalencia en la eficacia utilizando como marcador subrogante a la inmunogenicidad medida por detección de anticuerpos neutralizantes. Como objetivo secundario se evaluó la equivalencia en inocuidad comparando las tasas de reacciones adversas. Ambas vacunas mostraron una tasa equivalente de inmunogenicidad ligeramente superior al 95.5%, que es la eficacia estimada para Candid #1 en estudios previos. No se observaron eventos adversos graves relacionados con la vacuna. Los eventos adversos generales considerados relacionados fueron de escasa significación clínica y de resolución espontánea o con tratamiento sintomático; se presentaron en los receptores de ambas vacunas en tasas equivalentes (29.9% para la vacuna fabricada en la Argentina y 35.0% para la fabricada en EE.UU.), e incluyeron: cefalea, decaimiento, mialgias, plaquetopenia leve (< 150 000 plaquetas/mm³), náuseas y/o vómitos, leucopenia leve (< 4 000 blancos/mm³), fiebre, dolor retroocular, mareos, microhematuria, lumbalgia y exantema. Estos resultados indican que la vacuna Candid #1 elaborada en la Argentina es equivalente a la elaborada en los EE.UU. Este estudio permitió el registro del biológico producido en la Argentina ante la autoridad regulatoria del país (ANMAT).

A clinical study in 946 human volunteers was done to compare Candid #1 vaccine manufactured in Argentina with the vaccine produced in USA that had been previously used. The efficacy was evaluated using immunogenicity measured by the detection of neutralizing antibodies as a subrogate marker. Safety was evaluated comparing the rate of adverse events. Both vaccines showed a comparable rate of seroconversion, slighty higher than the efficacy estimated from previous studies (95.5%). There were no severe adverse events related to the vaccines. The general events considered related to the vaccines were not clinically relevant and disappeared either spontaneously or with symptomatic treatment. Similar rates of adverse events (29.9% for the Argentine vaccine and 35.0% for the USA vaccine) were found for both vaccines. These included: headache, weakness, myalgias, mild low blood cell (< 4 000/mm³) and platelet (< 150 000/mm³) counts, nausea and/or vomiting, fever, retroocular pain, dizziness, microhematuria, low backache and exantema. These results indicate that the vaccine Candid#1 manufactured in Argentina is equivalent to the manufactured in USA. These results allowed the National Institute of Human Viral Diseases (INEVH) to register the vaccine produced locally under the National Regulatory Authority (ANMAT).

Standardization of an ELISA test using a recombinant nucleoprotein from the Junin virus as the antigen and serological screening for arenavirus among the population of Nova Xavantina, State of Mato Grosso / Padronização de um teste de ELISA utilizando a nucleoproteína recombinante de vírus Junin como antígeno e triagem sorológica para Arenavírus na população de Nova Xavantina, Estado do Mato Grosso

INTRODUCTION: Arenavirus hemorrhagic fever is a severe emerging disease. METHODS: Considering that the levels of antibodies against arenavirus in the Brazilian population are completely unknown, we have standardized an ELISA test for detecting IgG antibodies using a recombinant nucleoprotein from the Junin virus as the antigen. This protein was obtained by inserting the gene of the Junin virus nucleoprotein into the genome of Autographa californica nucleopolyhedrovirus, using the Bac-to-Bac baculovirus expression system. This recombinant baculovirus was used to infect S. frugiperda cells (SF9). RESULTS: The infection resulted in synthesis of high concentrations of recombinant protein. This protein was detected on 12.5 percent polyacrylamide gel and by means of Western blot. Using the standardized ELISA test, 343 samples from the population of Nova Xavantina were analyzed. We observed that 1.4 percent of the serum samples (five samples) presented antibody titers against arenavirus. CONCLUSIONS: These results show the population studied may present exposure to arenavirus infection.

INTRODUÇÃO: A febre hemorrágica por Arenavirus é uma severa doença emergente. MÉTODOS: Considerando que os níveis de anticorpos contra Arenavirus na população brasileira é totalmente desconhecido, nos padronizamos um teste de ELISA para detecção de anticorpos IgG usando uma nucleoproteína recombinante do vírus Junin como antígeno. Esta proteína foi obtida pela inserção do gene da nucleoproteína do vírus Junin no genoma do vírus Autographa californica nucleopolyhedrovirus, utilizando o sistema de expressão em Baculovírus, Bac-To-Bac. Este baculovirus recombinante foi utilizado para infecção de células de S. frugiperda (Sf9). RESULTADOS: A infecção resultou na produção de altas concentrações de proteína recombinante. Esta proteína foi detectada em gel de poliacrilamida 12,5 por cento, e em Western blot. Utilizando o teste de ELISA padronizado, foram analizadas 343 amostras provenientes da população de Nova Xavantina. Observamos que 1,4 por cento dos soros (5 amostras) apresentavam títulos de anticorpos contra arenavírus. CONCLUSÕES: Estes resultados sugerem que a população estudada pode estar sendo exposta a infecções por arenavírus.

La producción nacional de vacuna a virus Junin vivo atenuado (Candid #1)anti-fiebre hemorrágica argentina / The national vaccine production to alive Junin virus attenuated (Candid #1) Argentine haemorrhagic anti-fever

La emergencia de la fiebre hemorrágica argentina(FHA) a comienzos de la década del ´50 representó para los científicos argentinos un desafío excepcional: una patología humana de alta letalidad, nueva para el mundo, se presentaba solamente en una región ( de gran importancia económica) del territorio argentino. El afrontar ese desafío con dedicación y, sin duda, con más recursos intelectuales que financieros, permitió que a los tres años de la descripción clínica de la enfermedad se demostrara que el virus Junin era el agente etiológico de la FHA, siendo éste el segundo arenavirus descripto luego del virus de la Coriomeningitis Linfocitaria, prototipo del grupo, aislado en 1993. En las décadas de los ´60 y los ´70 se realizaron avances fundamentales con la detección del reservorio natural del virus Junin y el conocimiento de múltiples aspectos de la fisiopatología y la epidemiología de la enfermedad. Esto permitió conocer que se trataba de una enfermedad controlable pero no erradicable. Fue en este mismo período en que se encontró un tratamiento para la FHA que disminuyó drásticamente su mortalidad y se iniciaron diversas líneas de investigación para desarrollar una vacuna eficaz que permitiera controlar la enfermedad. Este trabajo es un relato no exhaustivo de los acontecimientos que condujeron a la elaboración en Argentina de una vacuna (Candid#1) para prevenir la FHA, y fue realizado para rendir homenaje al gran inmunólogo argentino Dr. Ricardo Margni mostrando cómo los principios de la inmunología, difundidos por el Dr. Margni durante su extensa trayectoria como científico y docente contribuyeron, por este camino, a mejorar la calidad de vida de la sociedad.

Ensayo preclinico de la vacuna candid #1 producida en Argentina contra la fiebre hemorragica Argentina / Preclinical assay of candid #1 vaccine against argentine hemorrhagic fever made in Argentina

Se comparó en cobayos la seguridad, inmunogenicidad y eficácia protectora de um lote de vacuna Candid #1 (C#1) fabricada en Estados Unidos de América (EE.UU.) y distintos lotes de la misma vacuna fabricados en Argentina (Arg.). El lote TSI 5-1-92 (EE.UU) y los lotes Exp N3, 7A y 8A (Arg) fueron inoculados (0.5ml, IM) en cobayos de 250400g. Para cada ensayo diez animales recibieron solución fisiológica y sirvieron como control. Todos fueron desafiados con la cepa patógena P23790 de vírus Junin. Se registro: a) temperatura rectal, b) peso corporal , c) presencia de anticuerpos neutralizantes (AcNT) pré y post-vacunación, d) respuesta al desafio . Todos los animales vacunados desarrollaron AcNT anti vírus Junin (rango= 4081920 y sobrevivieron al desafio. En cada grupo control 810 animales murieron (dia 23.3+_ 5.4 post- desaportada y los diferentes lotes de C#1 producidos en Argentina.

Acción inhibitoria de la cafeína sobre la multiplicación del virus junín / Inhibition of Junin virus multiplication by caffeine

The inhibitory activity of caffeine, a pharmacologically active compound, on Junin virus (JV) multiplication in Vero cells was evaluated by a virus yield inhibition assay. The compound achieved a dose-dependent inhibition of virus production at concentrations not affecting cell viability. The 50 inhibitory concentration (IC50) and the 90 inhibitory concentration (IC90) were 9.0 mM and 10.8 mM, respectively. From time of addition experiments, it can be concluded that caffeine inhibited an early stage in the replicative cycle of JV occuring before 4 h of infection. Extracellular and cell-associated virus yields were reduced to the same extent. The addition of caffeine after several cycles of infection for a very short treatment period did not significantly affect the formation of JV infectious particles. The expression of viral proteins in the cytoplasm and the membrane of infected cells was highly reduced in the presence of caffeine, as revealed by immunofluorescence staining, confirming that caffeine predominantly exerted its inhibitory action early in the infection of Vero cells with JV.

Influencia del tratamiento enzimático sobre la interacción virus Junín-células Vero / Influence of enzyme treatment on the interaction of Junin virus with Vero cells

Se investigó la naturaleza bioquímica de las estructuras presentes en la superficie de células Vero, implicadas en la interacción con el virus Junín (cepa XJ C13) y una mutante de rango de huésped denominada Cl 67. Los tratamientos enzimáticos realizados a las células antes de la infección indican que las primeras moléculas que interaccionan con el virus Junín serían proteínas o grupos proteícos con aminoácidos básicos o aromáticos expuestos, existiendo diferencias en la afinidad hacia las cepas estudiadas

Neural spread of Junin virus in intraperitoneally inoculated rats

Una vez establecida la ruta neural como la seguida por el virus Junín (VJ) a partir de su inoculación intradérmica en ratas lactantes, resultaba de interes determinar cuál era la vía adoptada luego de inoculado intraperitonealmente. Desde la 2da semana se evidenció una enfermedad neurológica que a los 30 días post-infección alcanzó un 84 por ciento de mortalidad. En curso de ese período, se efectuaron cosechas de tejidos extraneurales y neurales para la marcación por inmunoperoxidasa del antígenos viral y el examen histopatológico, asi como la titulación de infectividad que también se extendió a sangre. En todas las muestras de tejido en que se detectó virus infectivo, sea por cocultivo o por aislamiento convencional, se logró la marcación del antígeno viral. El VJ estuvo presente en valores mínimos en bazo e hígado desde el día 2 al 5, y en sangre del 5 al 15. En tejidos neurales, el antígeno viral fue inicialmente revelado al día 5, tanto en ganglios raquídeos torácicos como en los segmentos medulares relacionados. A partir del día 7, la positividad se extendió a la médula espinal en toda su extensión; a la vez, ya había evidencias de presencia viral en tronco cerebral, con disfusión al resto de estructuras encefálicas desde el día 10. Pese a la presencia masiva del antígeno viral en neuromas, dichas células no mostraban cambios morfológicos aparentes. Dado que la infección de ganglios raquídeos y de médula espinal invariablemente precedió al acesso viral a encéfalo, y ello ocurrió en forma concomitante a la desaparición del virus en órganos linfo-reticulares y en sangre, la vía neural parece ser la adoptada por el VJ desde cavidad peritoneal hasta sistema nervioso central

Nuevas observaciones de la infección de roedores por el virus Junin dentro y fuera de la zona endemica de la Fiebre Hemorragica Argentina / [New findings on Junin virus infection in rodents inside and outside the endemic area of hemorrhagic fever in Argentina]

In conjunction with field trials for a vaccine against Argentine Hemorrhagic Fever (AHF), small mammals were trapped during a 28-month period (1 November 1987 to 13 March 1990) in 3 epidemiologically defined areas of the central Argentine pampas: northern and central Buenos Aires provinces were included in the AHF [quot ]historic[quot ] area, where the disease was common 15-20 years ago, but case rates are currently low; southern Santa Fe province is the current high-incidence area for AHF; the nonendemic area was represented by two localities 60-90 km beyond the northernmost extension of human disease. Animals were live-trapped for 3 days per month in permanent [quot ]mark-recapture[quot ] grids in each of the 3 areas. Samples of blood, sera, and oral swabs were taken from these animals before they were marked and released at the site of capture. In addition, [quot ]removal[quot ] traplines provided animals from 16 localities in these 3 areas which were sacrificed to obtain samples of organs in addition to the aforementioned samples. Samples were tested for the presence of Junin virus (JV) antigen by enzyme immunoassay (ELISA). In this assay, a pool of 13 mouse anti-JV glycoprotein and nucleocapsid monoclonal antibodies adsorbed to the surface of microtiter plates was used to capture JV antigen in sample suspensions. A polyclonal rabbit anti-JV antiserum was added as a detector antibody, and an anti-rabbit antibody conjugated to horseradish peroxidase applied with substrate to complete the sandwich.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)