A latest and promising approach for prediction of viral load in hepatitis B virus infected patients.

INTRODUCTION: Designing a rapid, reliable and sensitive assay for detection of hepatitis B virus (HBV) variants by real-time PCR is challenging at best. A recent approach for quantifying the viral load using a sensitive fluorescent principle was brushed in this study. MATERIALS AND METHODS : A total of 250 samples were collected from the outpatient unit, CLRD. Complete Human HBVDNA sequences (n = 944) were selected from the National Centre for Biotechnology Information (NCBI), primers and probes were designed and synthesized from the core, surface, and x region. Real-time based quantification was carried out using a standard kit and in-house generated standards and RT-PCR protocols. RESULTS AND DISCUSSION: The standard calibration curve was generated by using serial dilution 102 to 108. The calibration curve was linear in a range from 102 to 108 copies/ml, with an R2 value of 0.999. Reproducibility as measured by dual testing of triplicates of serum samples was acceptable, with coefficients of variation at 6.5%, 7.5%, and 10.5%. Our results showed that amplification performance was good in the case of the x-region-based design (98%). Out of 100 negative samples screened by enzyme linked immunosorbent assay and the standard RT-PCR kit, one sample was detected as positive with the in-house developed RT-PCR assay, the positivity of the sample was confirmed by sequencing the amplified product, NCBI accession {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"EU684022","term_id":"189176131"}}EU684022. CONCLUSION: This assay is reproducible showing limited inter- and intra-assay variability. We demonstrate that the results of our assay correlated well with the standard kit for the HBV viral load monitor.

Detección del virus de la hepatitis b por la técnica de inmunoperoxidasa en hepatocarcinoma / The usefulness of the immunoperoxidase method to detect hepatitis b antigens in tumoral liver samples

El antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg) y el antígeno core (HBcAg) fueron investigados por la técnica de inmunoperoxidasa indirecta en biopsias fijadas en formol y embebidas en parafina, obtenidas de dieciocho pacientes del Hospital Nacional Cayetano Heredia, con el diagnóstico de carcinoma hepatocelular. El HBsAg fue detectado en el citoplasma de células del tejido tumoral en cinco casos (27.7 por ciento). El HBcAg fue encontrado en las células tumorales en uno (5.5 por ciento). Este último caso fue también positivo para el HBsAg. Al ser este un estudio retrospectivo de muestras hepáticas que se obtuvieron de 1982 y diciembre de 1992, no se pudo establecer correlación con los marcadores serológicos de hepatitis B siguientes: HBcAg, antiHBe, o antiHBc IgG o M, ya que estos exámenes no fueron realizados. El HBsAg en suero se hizo sólo en diez pacientes, y éste fue positivo en cinco de ellos. Hubo asociación del HBsAg positivo en hígado con el HBsAg positivo en suero en dos de ellos. Aunque la muestra es pequeña y considerando que las biopsias fueron obtenidas sólo del tejido tumoral, la información obtenida sugiere que existe una importante asociación del virus de la hepatitis B (VHB) con el hepatocarcinoma, como se observa en regiones endémicas de infección por el VHB. Se corrobora la utilidad de la técnica de la inmunoperoxidasa para la detección de antígenos del VHB en tejidos hepáticos tumorales. Aún conociendo de sus ventajas la técnica es poco utilizada entre nosotros.

Estudio del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B por biopsia hepática / Study of surface antigen of virus of hepatitis B by liver biopsy

Se estudiaron 60 pacientes portadores asintomáticos del virus de la hepatitis B, 40 con hepatitis crónica activa y 20 con hepatitis aguda tipo B, a los cuales se les realizó biopsia hepática y se observó la presencia del antígeno de superficie del virus B en tejido, por la técnica de inmunoperoxidasa. Se encontró que del total de portadores asintomáticos estudiados el 100 % tenían antígeno de superficie en tejido hepático, en contraste con un 65 % en los casos de hepatitis crónica activa y un 20 % en los casos de hepatitis aguda tipo B. Además, se relacionaron la presencia del antígeno de superficie del virus B y la zona histológica donde éste predominaba en las tres entidades estudiadas, se encontró que en el 73 % de los pacientes con hepatitis crónica activa apareció el antígeno en espacios porta y en todos los casos de hepatitis aguda tipo B, el antígeno predominó alrededor de la vena controlobulillar. En los casos de los portadores asintomáticos la distribución de antígeno de superficie del virus B estaba muy diseminado en todo el tejido, lo cual no permitió enmarcarlo en una zona determinada

Estudio sobre transmisiòn perinatal del virus B de la hepatitis en un hospital Ginecoobstétrico de Ciudad de La Habana / Study on perinatal transmission of virus B of hepatitis in a Ginecologic and Obstetric Hospital; Havana City

Se estudiaron 2 000 gestantes a término que parieron entre los meses de septiembre y diciembre de 1986 en el Hospital Ginecoobstétrico Docente "Eusebio Hernández" de Ciudad de La Habana. Todas las gestantes y los hijos de las madres positivas fueron investigados para la determinación de Ags HB por la técnica de ELISA. Adicionalmente se investigó en los seropositivos al primer marcador de Age HB. Los hijos de las madres positivas fueron seguidos clínica y serológicamente durante 4 meses. El índice de positividad de las madres estudiadas fue de 0,4%, y el índice de transmisión perinatal fue de 28,6% Se confirma la gran importancia que tiene la presencia del Age HB para la transmisión del virus B de la hepatitis al elevarse el índice de transmisión al 100% entre las que tenían este marcador. Se considera la importancia relativa que tiene esta vía de transmisión para el mantenimiento de la prevalencia de portadores del Ags HB en nuestro país

Investigación por virus de hepatitis B y citomegalovirus en donadores de sangre / Hepatitis B virus and cytomegalovirus in blood donors

En un estudio de 783 donadores altruistas, se realizó el análisis de transaminasas séricas y la determinación del antígeno de superficie para la hepatitis tipo B (HBsAg). En 83 donadores, (10,6%) se demostró elevaciones de los valores de las transaminasas séricas, que oscilaron entre 1.3 y 3.8 veces lo normal, y únicamente se demostró positividad para el HBsAg en dos (0.25% del total de las muestras analizadas, lo que concuerda con lo reportado en la literatura. A 198 personas del estudio se les practicó cultivos para citomegalovirus (CMV) en la orina, secresión faríngea y en un concentrado de leucocitos, no lográndose el aislamiento del virus en ningun caso; sin embargo, se demostro la presencia de virus herpes tipo I en el cultivo fríngeo de 4 de estos donadores

Hepatites por vírus / Viral hepatitis

Analisa-se a incidência de hepatites por virus na Amazônia. A forma endêmica é a maneira mais comum de ocorrência dessa virose na regiäo e, em determinadas condiçöes, pode haver muitos epidêmicos. Embora näo se tenha dados estatísticos para toda a regiäo, apresentam-se resultados de inquéritos realizados no Estado do Pará