Fatores de patogenicidade de Vibrio spp. de importância em doenças transmitidas por alimentos / Vibrio spp. pathogenicity factors of importance in foodborne diseases

As bactérias do gênero Vibrio habitam ambiente tipicamente marinho e estuarino, sendo comumente isoladas de pescados. As principais espécies de Vibrio reportadas como agentes de infecções em humanos são V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae e V. mimicus . V. vulnificus é considerado o mais perigoso, podendo causar septicemia e levar à morte. V. parahaemolyticus é um patógeno importante nas regiões costeiras de clima temperado e tropical em todo o mundo e tem sido responsável por casos de gastroenterites associadas ao consumo de peixes, moluscos e crustáceos marinhos. V. cholerae causa surtos, epidemias e pandemias relacionados com ambientes estuarinos. V. mimicus pode causar episódios esporádicos de gastroenterite aguda e infecções de ouvido. A patogenicidade das bactérias está ligada à habilidade do micro-organismo em iniciar uma doença (incluindo entrada, colonização e multiplicação no corpo humano). Para que isso ocorra, os micro-organismos fazem uso de diversos fatores. O objetivo desta revisão foi sintetizar o conhecimento disponível na literatura sobre os fatores de patogenicidade de V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae e V. mimicus.(AU)

Bacteria of the genus Vibrio typically habitat marine and estuarine environment and are commonly isolated from fish. The main Vibrio species reported as agents of infections in humans are V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae and V. mimicus . V. vulnificus is considered the most dangerous, may cause sepsis and lead to death. V. parahaemolyticus is an important pathogen in coastal regions of temperate and tropical climates around the world and has been responsible for cases of gastroenteritis associated with consumption of fish, shellfish and marine crustaceans. V. cholerae causes outbreaks, epidemics and pandemics related to estuarine environments. V. mimicus can cause sporadic episodes of acute gastroenteritis and infections. The pathogenicity of the bacteria is linked to the ability of the micro-organism to initiate a disease (including entry, colonization and multiplication in the human body). For this to occur, the micro-organisms make use of several factors. The objective of this review is to summarize the knowledge available in the literature on the factors of pathogenicity of V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae and V. mimicus.(AU)

Isolation of Vibrio mimicus from a case of acute diarrhoea--a case report.

Over a four months period (June to September, 2003) 111 stool samples from cases of acute diarrhoea were screened for Vibronaceae in department of microbiology, Smt. N. H. L. Municipal medical college, Ahmedabad. All the isolates were identified by standard laboratory technique. A total of 36 species belonging to Vibrionaceae were isolated. Phage typing of all these Vibronaceae were done at National Institute Of Cholera and Enteric Disease, Kolkata. Out of 36 isolates, 35 were Vibrio cholereae and only one was Vibrio mimicus. We report this case because of rare strain.

Estudo de Vibrio ssp. potencialmente patogênicos através de métodos moleculares / Study of virulence factors in Vibrio ssp through molecular methods

De forma similar ao V. cholerae, outros vibrios potencialmente patogênicos podem causar doença no homem em uma variedade de formas de quadros auto-limitantes até diarréia severa a cólera, septicemia, celulite e infecções de pele. Com o advento da biologia molecular, novas técnicas vêm sendo empregadas para o estudo do gênero Vibrio com o intuito de determinar presença de fatores de virulência, traçar rotas de transmissão, ou ainda como ferramenta no estudo epidemiológico destes organismos. O presente estudo visou pesquisar a presença de genes codificadores de virulência em cepas de V. cholerae provenientes de vários países, e ainda estudar do polimorfismo genético, com o emprego de iniciadores para seqüências ERIC e BOX e eletroforese em campo pulsado (PFGE), para determinar a relação entre cepas de V. cholerae, V. mimicus, V. parahemolyticus, V. fluviais e V. alginolyticus isolados de amostras de ostras e mexilhões no Brasil, e V. metschnikovii isolados de amostras de peixe isolados de outros países bem como com o Padrão ATCC de cada espécie. Foi realizada também, a confirmação da posição taxonômica de cepas de V. metschnikovii isolados de amostras de peixes, e a comparação dos padrões de bandas com isolados de outros países e cepa padrão da espécie. A posição taxonômica de cepas de V. metschnikovii foi confirmada através da Hibridização DNA/DNA, e o estudo do polimorfismo genético através de ERIC PCR, BOX PCR e eletroforese em campo pulsado demonstrou que essas são poderosas ferramentas para estudos epidemiológicos do gênero Vibrio.

Diversidade genética e genes de virulência em Vibrio mimicus / Genetic diversity and genes of virulence in Vibrio mimicus

Non-O1. Atualmente está claro que as duas espécies diferem em um número significativo de características fenotípicas e genotípicas. Ambas as espécies têm como habitat natural os ecossistemas aquáticos, onde podem ser encontradas sob a forma livre ou em associação com outros organismos. Para melhor compreender a biologia e genética do V. mimicus nós trabalhamos com isolados ambientais e clínicos analisando sua diversidade genômica e caracterizando genes associados à virulência. Foi demonstrado que através do perfil isoenzimático (MEE) é possível separar estas duas espécies relacionadas em dois grupos distintos, sendo para isto necessário apenas a combinação de quatro loci. Considerando os resultados das análises por RAPD-PCR, REP-PCR, por perfil de isoenzimas e até mesmo os resultados das provas bioquímicas, V. mimicus têm se apresentado como um grupo geneticamente heterogêneo. Também demonstramos que a abordagem que usa PCR específico para a região intergênica dos genes ribossomais, proposta por Chun et al. (1999), para distinguir as duas espécies, dá resultados falso positivos para V. mimicus. Detectamos em 50 (por cento) de nossas amostras o gene da toxina termoestável. Determinamos, pela primeira vez, que o gene stm presente em V. mimicus está associado às seqüências repetitivas de V. cholerae e que estas seqüências estão também ladeando várias outras regiões como acontece em V. cholerae. Foi identificada a presença, em dois distintos isolados ambientais, do genoma completo do VPIF (profago contendo a ilha de patogenicidade de vibrio). O isolado 573 carreia um novo alelo do gene tcpA e o outro (343) possui alelo similar áquele característico de V. cholerae biotipo clássico. Os dois isolados contém também o genoma do CTXF; o isolado 573 possui cópia completa correspondente ao genótipo encontrado em isolados do biotipo El Tor isolado na Austrália enquanto o outro (343) apresentada todos os genes da região do core exceto o operon ctxAB...

The Effect of Iron Limmted Condition on Outer Membrane of Vibrio mimicus

Vibrio mimicus, marine bacteria pathogenic for fish, can causes acute gastroenteritis in human. Iron limmited condition like in human body, may change the surface structure of V. mimicus. In this study we obse'rved the effect of iron limmited condition on outer membrane protein of V. mimicus. Ethylenediamine-di (O-hydroxy-phenylacetic) acid (EDDA), an iron chelator, delayed the time to reach expotential growth of V. mimicus in brain heart infusion medium from 3 hours to 20 hours. Outer membrane protein of V. mimicus-CON (cultured in BHI) and V. mimicus-EDDA (cultured in BHI contain EDDA) were seperated by 1% sarcosine from total cell envelop. SDS-PAGE of V. mimicus-EDDA and V. mimicus-CON showed similar protein profiles contain 37 kDa major protein but 86 and 90 kDa protein were induced differently. Immunological properties of above protein were determined by ELISA and western blotting. 86 kDa EDDA- specific OMP was induced in V. mimicus (isolate 96-1), V. parahaemolyticus (serotype 09), V. alginolyticus (isolate 95-1), E. coli (human isolate) and V. vulnificus ATCC 27562 in iron limmited condition.

Purification Siderophore from Vibrio mimicus ATCC 33653 and its Effect to Bacterial Pathogenecity

Growth under conditions of iron-restriction and the production of siderophore was examined in Vibrio mimicus ATCC 33653. This strain grew and multiplied in the presence of the high-affinity iron chelators ethylenediamine-di (o-hydroxyphenylacetic acid). Chrorne azurol S (CAS) agar and solution were used to detect the production of siderophore under these condition. Siderophore could be detected in the iron-rcstricted culture supernatants. The siderophore was extracted from iron-restricted culture supernatants by phenol-chloroform-ether method and purified by Dowex ion-exchange and Sephadex G-25 gel filtracton chromatography. The purified siderophore was confirmed by paper chromatography and HPLC. The Purified siderophore enhanced the growth of V. mimicus when the bacterium was grown in iron limited medium. Injection of both the siderohore and the bacteria to mice resulted in more rapid death than that of the only bacteria. However, the siderophore did not show lethality to mice and any toxicity to cell line like HeLa and U937.

Pathogenicitic Characterization of Purified beta-Hemolysin - Produced by Vibrio mimicus

In order to investigate the main factor of pathogenicity in V. mimicus, we have studied the toxic effects of j3-hemolysin produced by V. mimicus. The purified hemolysin of V. mimicus was active erythrocytes from three animal species including mouse, rabbit and rat, but the hemolysin was most active against rabbit erythrocyte. The hemolysin lysed cultured cell and killed mouse. Rapid death of mouse was observed with rather small doses of the toxin. Intravenous injection of 20 mg of the purified toxin killed mice within 25 sec. The hemolysin also had a lethal effect on intraperitoneal injection into mice although less than on intravenous injection. Purified hemolysin injected rabbits had large morphological change in jejunum. In electron micrograph of thin sections of the human erythrocytes, cells were threated with the hemolysin at 37 C for 5 min., significant changes were not observed. But after 10 min., hemolysis was observed and after 60 min., complete degradation of human erythrocyte was observed.