Genes codificadores para enterotoxinas de aislamientos de estafilococos coagulasa negativos y coagulasa positivos a partir de muestras de mastitis bovina / Coding genes for enterotoxins of isolated coagulase-negative and coagulase-positive staphylococci from bovine mastitis samples / Genes codificadores de enterotoxinas em isolados de estafilococos coagulase positivo em amostras com mastite bovina

RESUMEN

Introducción. La mastitis bovina es la inflamación de glándulas mamarias y tejidos secretores. El género Staphylococcus es el agente causal más importante, por su capacidad de producir diferentes factores de virulencia. Las enterotoxinas estafilocócicas son un grupo importante de toxinas que permiten al microorganismo invadir células y tejido huésped, son diseminadas por medio de productos alimenticios y son responsables de graves intoxicaciones alimentarias en el mundo. Objetivo. Determinar la presencia de genes codificadores para las enterotoxinas estafilocócicas (Staphylococcal Enterotoxins, SE) SEA, SEB, SEC, SED y SEE, en cepas de Staphylococcus spp. asociadas con mastitis bovina. Materiales y métodos. Se trata de un estudio cuantitativo, descriptivo y transversal. Se identificaron especies por medio de la amplificación de la región r16S. Los genes SEA, SEE, SEC, SED y SEE se detectaron mediante la amplificación por PCR convencional, usando iniciadores específicos para cada gen, y se evidenciaron los amplicones con electroforesis. Resultados. Hubo predominio del grupo Staphylococcus coagulasa positivo (65,2 %) sobre el grupo coagulasa negativo (37,5 %). Staphylococcus aureus fue la cepa más frecuente (88,5 %). El gen SEA (1,7 %) se detectó en S. sciuri, el gen SEB (3,6 %), en S. pasteuri y S. warneri, y el gen SEC (3,6 %), en S. sciuri y S. saprophyticus SEC. No se detectaron los genes SED y SEE en ninguna de las cepas evaluadas Conclusiones. Los resultados apoyan que la mastitis bovina también es causada por Staphylococcus coagulasa negativo, lo cual indica la posibilidad de que este grupo adquiera atributos genéticos, como enterotoxinas y factores de virulencia, por transferencia horizontal.

ABSTRACT

Introduction: Bovine mastitis is an inflammation of mammary glands and secretory tissues. Staphylococcus gender is the main causal agent, due to its capacity to produce different virulence factors. Staphylococcal enterotoxins are a main group of toxins which permit the microorganism to spread in cells and guest tissue, which are disseminated through food products, being responsible of serious food poisoning cases around the world. Objective: To determine the presence of coding genes for staphylococcal enterotoxins (SE); SEA, SEB, SEC, SED and SEE, in Staphylococcus spp. strains related to bovine mastitis. Materials and methods: Quantitative study, descriptive and cross-sectional. It was made an identification of species through. They were identified 57 Staphylococcus spp. strains at specie level by amplification of r16S region. The detection of SEA, SEE, SEC, SED, y SEE genes was made through conventional PCR, using specific primers for each gene, they were evinced amplicons through electrophoresis. Results: It was evinced predominance of coagulase-positive Staphylococcus group (65.2%), being Staphylococcus aureus the strain with the highest presence (88.5%), whereas coagulase-negative Staphylococcus group was 37.5%. SEA gene was detected in S. sciuri (1.7%); SEB in S. pasteuri and S. warneri (3.6%); SEC was identified in S. sciuri and S. saprophyticus (3.6%); they were not detected SED y SEE genes in any of the researched strains. Conclusions: The results support that the development of bovine mastitis is also caused by coagulase-negative Staphylococcus, indicating the possibility that this group acquires genetic attributes as enterotoxins and virulence factors by horizontal gene transfer.

RESUMO

Introdução. A mastite bovina é a inflamação das glândulas mamárias e dos tecidos secretórios. O gênero Staphylococcus é o agente causador mais importante, devido à sua capacidade de produzir diferentes fatores de virulência. As enterotoxinas estafilocócicas são um importante grupo de toxinas que permitem que o microorganismo invada as células e tecidos do hospede, são disseminadas através de produtos alimentícios e são responsáveis por intoxicações alimentares graves no mundo. Objetivo. Determinar a presença de genes que codificam enterotoxinas estafilocócicas (Staphylococcal Enterotoxins, SE) SEA, SEB, SEC, SED e SEE, em cepas de Staphylococcus spp. associada à mastite bovina. Materiais e métodos. Estudo quantitativo, descritivo e transversal. As espécies foram identificadas por amplificação da região r16S. Os genes SEA, SEE, SEC e SED foram detectados por amplificação PCR convencional utilizando primers específicos para cada gene, e os amplicons foram evidenciados com eletroforese. Resultados. Houve predomínio do grupo Staphylococcus coagulase positivo (65,2%) sobre o grupo negativo da coagulase (37,5%). Staphylococcus aureus foi a cepa mais frequente (88,5%). O gene SEA (1.7%) foi detectado em S. sciuri, o gene SEB (3.6%) em S. pasteuri e S. warneri, SEC (3.6%) em S. sciuri e SEC em S. saprophyticus. Os genes SED e SEE não foram detectados em nenhuma das cepas avaliadas. Conclusões. Os resultados confirmam que a mastite bovina também é causada por Staphylococcus coagulase-negativo, o que indica a possibilidade de que este grupo adquira atributos genéticos, como enterotoxinas e fatores de virulência, por transferência horizontal.