Expressão gênica de BMPR1, BMPR2 e TGFBR1 liberados de discos de dentina humana tratados com diferentes soluções desmineralizantes e adesão das células da papila apical cultivadas / Gene expression of BMPR1, BMPR2 and TGFBR1 released from human dentin disks treated with different demineralizing solutions and adhesion of cultured apical papilla cells

RESUMO

O sucesso dos procedimentos endodônticos regenerativos depende da adequada descontaminação do espaço endodôntico, da presença de células mesenquimais indiferenciadas, da liberação de fatores de crescimento que atuam como moléculas sinalizadoras para atração, proliferação, diferenciação celular e da presença de um "scaffold" que propicia suporte para a organização e vascularização do tecido neoformado. Os protocolos de regeneração pulpar têm utilizado o EDTA (ácido etileno-diamino-tetracético) para remover o smear layer e liberar fatores de crescimento presentes na matriz dentinária. Poucos estudos analisaram se a utilização de soluções quelantes específicas para o cálcio ou menos agressivas, apresentam melhores resultados na liberação de fatores de crescimento e na adesão das células da papila apical à superfície dentinária. O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão gênica de BMPR1, BMPR2 e TGFBR1 liberados de discos de dentina humana previamente tratados com EDTA, EGTA e Ácido Cítrico e a adesão das células da papila apical à esses discos. Foram utilizadas células criopreservadas do biorrepositório de células do Laboratório de Biologia Básica do Departamento de Dentística da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo. Os discos de dentina foram obtidos da porção radicular interna de pré-molares e terceiros molares hígidos, humanos, que foram obtidos do Biobanco da FOUSP - Divisão de Dentes Humanos. Após a imersão por 1 minuro nas soluções desmineralizantes, os discos de detina foram transferidos para placas com 90 poços e as células foram plaqueadas. A adesão celular foi avaliada após 48 horas empregando-se a Microscopia Eletrônica de Varedura. Determinou-se a expressão gênica após os períodos de 07 e 21 dias de cultivo celular. A análise estatística foi realizada por meio da análise de variância a 1 critério (ANOVA) seguida de pós teste de Tukey, com nível de significância de 5%. Aos 21 dias o tratamento da dentina com EGTA resultou em significativo aumento da BMPR1, comparado com PBS. Nenhuma condição experimental alterou a expressão de BMPR2. A expressão da TGBR1 aos 21 dias foi significativamente aumentada pelo tratamento prévio dos discos com EGTA. Embora não tenha ocorrido distribuição uniforme de células ao longo dos discos, foi observada adesão celular em todos os grupos experimentais. Conclui-se que o tipo de solução desmineralizante interfere na quantidade liberada dos fatores de crescimento BMPR1 e TGFBR1, presentes na dentina humana, não interferindo na adesão das células da papila apical na superfície dentinária.