Introducción del genotipaje molecular de los antigenos plaquetarios / Introduction of molecular genotypingof plateles antigens

RESUMEN

Introducción: Los antígenos plaquetarios humanos (HPA) se expresan en 6 glucoproteínas plaquetarias diferentes. Se ha descrito que estos antígenos pueden estimular la producción de aloanticuerpos una vez expuestos a plaquetas humanas con diferentes HPA, lo que provoca complicaciones clínicas como la trombocitopenia neonatal aloinmune y la púrpura postransfusional. Métodos: Se realizó el estudio a 11 muestras de pacientes en espera de trasplante renal de genotipo de los antígenos HPA-1,2,3 a/b mediante PCR multiplex, mientras que para el estudio de genotipo de los antígenos HPA-5a/b se utilizó la técnica de PCR con secuencia específica de primer. Los productos de ADN amplificados fueron visualizados mediante electroforesis en gel de agarosa y electroforesis capilar. Resultados: El análisis de los fragmentos de ADN amplificados revelaron resultados similares por ambos métodos. Para los antígenos HPA-1,-2, el 63 por ciento de las muestras fueron homocigóticas para el fenotipo (a) mientras que se observó heterocigocidad en todos los casos para el genotipo HPA-3. En el sistema HPA-5, el 54 por ciento fueron homocigóticas para el fenotipo (a) y el 46 por ciento, heterocigóticas. Para el genotipo del HPA-15, el 4 por ciento fueron homocigóticas para el fenotipo (b) mientras que el 96 por ciento resultaron ser heterocigóticas. Conclusiones: Estos resultados muestran similitudes para los genotipos HPA 1, 2,3 a/b, HPA 5a/b y HPA15 a/brespecto a lo planteado en la literatura(AU)

ABSTRACT

Introduction: Human platelet antigens (HPA) are expressed in 6 different platelet glycoproteins. It has been described that these antigens can stimulate the production of alloantibodies once exposed to human platelets with different HPA, which causes clinical complications such as neonatal alloimmune thrombocytopenia and postransfusional purpura. Methods: The study was performed on 11 samples of patients awaiting kidney transplantation of genotype of the HPA-1,2,3 a/b antigens by multiplex PCR, while for the genotype study of the HPA-5a/b antigens was used the PCR technique with primer-specificsequence. The amplified DNA products were visualized by agarose gel electrophoresis and by capillary electrophoresis. Results: The analysis of DNA fragments amplified by agarose electrophoresis and capillary electrophoresis revealed similar results in both methods. For the HPA-1, -2 antigens, 63 percent of the samples were homozygous for phenotype (a) while heterozygosity was observed in all cases for the HPA-3 genotype. In the HPA-5 system, 54 percent were homozygous for the phenotype (a) and 46 percent were heterozygous. For the genotype of HPA-15, 4 percent were homozygous for phenotype (b) while 96 percent proved heterozygous. Conclusions: These results show similarities for the genotypes HPA 1, 2.3 a/b, HPA 5a/b and HPA15 a/bwith respect to report in literature(AU)