Detección de la enfermedad meningocócica por reacción en cadena de la polimerasa / Polymerase chain reaction for the diagnosis of meningococcal disease

ABSTRACT

We submit the contribution of molecular techniques to the diagnosis of pediatric meningococcal disease from January 2001 to December 2005. Culture isolation and serogroup of Neisseria meningitidis was performed using traditional serology and biochemical methods. With regard to molecular techniques, we first used a traditional PCR with amplification of insertion sequence IS1106. On a second phase, it was substituted for Real Time PCR with detection of gene CtrA. Results: During the studied period, 148 meningococcal disease cases were diagnosed (63 female and 85 male), median age 4.7 years. Forty-eight patients were studied only by culture and N. meningitidis was isolated only in 22 cases (45.8%). The rest of the cases were studied by culture and PC R, microbiological confirmation being obtained in 78 cases (78%) five only by culture, 38 only by PCR and 35 by culture and PCR. Culture sensitivity in patients who had previously been treated with antibiotics was 13.5%, whereas PCR sensitivity was 67.5%. In patients with fulminant disease (septic shock in the first eight hours after the beginning of the disease), sensitivity was 73.3% for PCR and 33.3% for culture

RESUMEN

Presentamos la contribución de las técnicas moleculares en el diagnóstico de la enfermedad meningocócica pediátrica durante el período enero de 2001 hasta diciembre de 2005. El aislamiento por cultivo y la identificación serológica de subgrupos de Neisseria meningitidis se realizó según metodos bioquímicos y serológicos tradicionales. Como técnicas moleculares, inicialmente se utilizó una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) tradicional con amplificación de la secuencia de inserción IS1106, que posteriormente fue sustituida por una PCR en tiempo real con detección del gen CtrA. Resultados: Durante el período de estudio se declararon 148 casos de enfermedad meningocócica (63 niñas y 85 niños), con edad promedio de 4.7 años. Cuarenta y ocho pacientes se estudiaron sólo por cultivo y de éstos se obtuvo el aislamiento de N. meningitidis en 22 casos (45.8%), el resto se estudiaron por cultivo y PCR y se obtuvo una confirmación microbiológica en 78 casos (78%) 5 sólo por cultivo, 38 sólo por PCR y 35 por cultivo y PCR. La sensibilidad del cultivo en pacientes pretratados fue del 13.5% mientras que la de la PCR fue del 67.5%. En los pacientes con presentación fulminante de la enfermedad (shock séptico en las primeras 8 horas de inicio de la enfermedad), la sensibilidad de la PCR fue de 73.3% y la del cultivo 33.3%