Avaliação da expressão de CD44, SOX2 e STAT3 e no câncer de mama localmente avançado e metastático / Evaluation of the expression of CD44, SOX2 and STAT3 in locally advanced and metastatic breast cancer

RESUMO

Introdução: O câncer de mama (CM) está associado ao aumento contínuo na incidência, com altas taxas de mortalidade em vários países. Existem quatro imunofenotipos de CM, luminal A, Luminal B, triplo negativo e HER2+. Algumas proteínas que estão presentes nas células tumorais e no microambiente tumoral fazem parte do processo da tumorigênese e metástases. A molécula de CD44 é considerada um importante marcador de resposta inflamatória e está presente em todos os leucócitos e na superfície de células tronco tumorais, estando envolvido com invasão tumoral e metástase. Alguns autores demonstraram que o signal transduce randactivator of transcription 3 (STAT3) e sex determining region Y related group box 2 (SOX2) estão relacionados com a regulação da divisão celular de células somáticas e com a tumorigênese e a metástase no CM. Objetivo: Avaliar a expressão de CD44+, SOX2 e STAT3 no sangue de pacientes com câncer de mama localmente avançado e metastático. Métodos: É um estudo de coorte transversal realizado no Hospital de Câncer de Pernambuco (HCP) e no Laboratório de Pesquisa Translacional do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP) no período de março de 2017 a abril de 2018. Participaram deste estudo, 65 pacientes do sexo feminino com diagnóstico de câncer de mama e idade entre 28 a 64 anos. Destas, 51 mulheres tinham tumor de mama em estádio III (localmente avançado) e 14 com doença metastática (estágio IV). Como grupo controle, foram 24 mulheres clinicamente saudáveis com idade entre 18 anos a 65 anos. As análises da expressão de CD44+, SOX2 e STAT3 foi realizada por citometria de fluxo. Resultados: foram observados níveis elevados de células CD44+, CD24neg e CD44+/CD24neg CD44+/CD24negSOX2+ no sangue das pacientes com tumores de mama LB, HER2+ e Triplo negativos comparados aos controles (p<0,0001). Níveis baixos CD44+/CD24negSTAT3+ no sangue das pacientes comparado aos controles. Foram observados níveis elevados de células CD44+/CD24neg e CD44+/CD24negSTAT3+ no com CM localmente avançado comparado a CM metastático (p<0,05). As pacientes com CM triplo negativo apresentaram níveis elevados de linfócitos TCD3+SOX2+ comparado aos grupos com subtipos LB e HER2+ (p<0,05). O grupo de pacientes CM HER2+ apresentou baixos níveis de TCD3+SOX2+ comparado aos controles e LA (p<0,05). Níveis elevados de linfócitos TCD3 totais p=0,0007 e baixos de TCD3+SOX2+ p=0,02 no CM localmente avançado comparado a doença metastática. Níveis elevados de linfócitos TCD3+SOX2+ em pacientes linfonodos negativos quando comparado aos grupos N1 (p=0,004) e N2 (p<0,0001). Foram observados níveis elevados de células CD24neg e CD44+/CD24negSTAT3+ e de linfócitos TCD3+, e baixos níveis de TCD3+STAT3+ no CMTM localmente avançado comparado ao metastático. Conclusão: Os níveis das moléculas CD44, CD24, SOX2+ e STAT3+ no sangue mostraram ser alterados nas pacientes com CM em estágios mais avançados independente do imunofenótipo

ABSTRACT

Introduction: Breast cancer (BC) is associated with a continuous increase in incidence, with high mortality rates in several countries. There are four immunophenotypes of BC, luminal A, Luminal B, triple negative (TNBC), and HER2 +. Some proteins that are present in tumor cells, and the tumor microenvironment are part of the process of tumorigenesis and metastases. The CD44 molecule is considered an important marker of the inflammatory response. It is present in all leukocytes and on the surface of tumor stem cells, being involved with tumor invasion and metastasis. Some authors have demonstrated that the signal transducer and activator of transcription 3 (STAT3) and sex determining region Y related group box 2 (SOX2) are related to the regulation of somatic cell division and tumorigenesis and metastasis in BC. Objective: To evaluate the expression of CD44 +, SOX2, and STAT3 in the blood of patients with locally advanced and metastatic breast cancer. Methods: A cross-sectional study was carried out at the Pernambuco Cancer Hospital (HCP) and at the Translational Research Laboratory of the Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP) from March 2017 to April 2018. 65 female patients diagnosed with breast cancer participated in this study, aged between 28 and 64 years. Of these, 51 women had stage III (locally advanced) breast tumor, and 14 with metastatic disease (stage IV). As a control group, there were 24 clinically healthy women aged 18 to 65 years. The analysis of CD44 +, SOX2, and STAT3 expression was performed by flow cytometry. Results: elevated levels of CD44 +, CD24neg and CD44+/CD24neg, CD44+/CD24neg SOX2+ cells were observed in the blood of patients with LB, HER2+ and TNBC compared to controls (p<0.0001). Low CD44+/CD24negSTAT3+ levels in patients' blood compared to controls. Elevated levels of CD44+/CD24neg and CD44+/CD24negSTAT3 + cells were observed in locally advanced compared to metastatic BC (p <0.05). Patients with TNBC had elevated TCD3+SOX2+ lymphocytes compared to groups with subtypes LB and HER2+ (p <0.05). HER2+ patient had low levels of TCD3+ SOX2+ compared to controls and LA (p <0.05). High levels of total TCD3 (p= 0.0007) and low levels of TCD3 + SOX2 + (p = 0.02) in locally advanced BC compared to metastatic disease. Elevated levels of TCD3+SOX2+ in negative lymph node patients compared to groups N1 (p = 0.004) and N2 (p <0.0001). High levels of CD44+/CD24negSTAT3+ cells and TCD3+ were observed, and low levels of TCD3+ STAT3+ in locally advanced TNBC compared to metastatic. Conclusion: the levels of CD44, CD24, SOX2 +, and STAT3 + molecules in the blood were altered in breast cancer more advanced independent immunophenotype