Reação inflamatória primária associada ao tumor no carcinoma invasivo da vulva / Primary inflammatory reaction associated with the tumor in invasive vulvar carcinoma

RESUMO

O carcinoma escamoso de vulva (CEC) é uma neoplasia rara que corresponde a cerca de 3 a 5% dos tumores ginecológicos malignos. Seu surgimento é mais comum entre a sétima e oitava década de vida, entretando, nos últimos anos observou-se um aumento em sua incidência em mulheres jovens, possivelmente decorrente do crescimento do número de infecções por HPV. Duas vertentes dividem o carcinoma de vulva em vias distintas uma relacionada à presença de infecção por HPV e a outra, associada a mutações no gene p53 e processos inflamatórios crônicos, sendo ambas precedidas por lesões precursoras (lesões intraepiteliais vulvares ­ VINs). O sistema imunológico atua com finalidade garantir a homeostase, entretanto, o contexto de inflamação e infecção costumam estar associadas ao desenvolvimento e progressão do câncer. A análise do microambiente imune do tumoral e seu impacto no resultado clínico podem prover informações preciosas para uma melhor compreensão dos mecanismos celulares envolvidos e evidenciar marcadores com valores preditivos de resposta terapêutica e/ou diagnóstica. Objetivo: Ampliar a caracterização dos componentes celulares do infiltrado inflamatório da primeira linha de defesa (imunidade inata) associados ao tumor em carcinoma vulvar, relacionar esses componentes ao status de infecção pelo HPV. Métodos: Quarenta e quatro amostras de tecido fixados em formalina e incluídas em parafina foram selecionadas de forma retrospectiva dos arquivos do Departamento de Anatomia Patológica do A.C.Camargo Cancer Center no período de 1990 a 2015. Para a identificação dos marcadores imunológicos, foram realizados experimentos de imunohistoquímica e, posteriormente, esses marcadores foram quantificados através do programa APERIO®. Resultados: Com base nos padrões de infiltração de células imunológicas, a maior expressão ocorreu na região peritumoral nas duas vias de CEC vulvar (HPV independente e HPV associado) para os marcadores CD68, granzima B, perforina, S100, CD1a e PD-L1 (p<0,05). A expressão de perforina foi maior em CEC HPV independente nas regiões peri- (p=0,004) e intratumoral (p=0,021). Em CEC HPV independente, a expressão intensa de S100 na região peritumoral foi associada a ausência de metástase linfonodal (p=0,008); a expressão forte de S100 na região intratumoral foi associada a ausência de invasão vascular (p=0,007) e ausência de metástase linfonodal (p=0,043). Na via de CEC HPV associado, a expressão intensa de perforina esteve relacionada a menor profundidade de invasão nas regiões peri- (p=0,013) e intratumoral (p=0,022). As expressões dos marcadores de células inflamatória apresentaram associação com sobrevida global e livre de doença para as vias do CEC de vulva. Em CEC HPV independente, a expressão intensa de CD1a na região intratumoral, correlacionou-se ao menor tempo de sobrevida livre de doença (p=0,045). Na via de CEC HPV associado, o aumento da expressão de CD56 foi associada ao menor tempo de sobrevida global (p=0,043); as expressões aumentadas de CD1a e PD-L1 na região peritumoral se correlacionaram a maior tempo de sobrevida livre de doença (p=0,008 e p=0,021, respectivamente). Conclusão: Esse é um estudo que caracteriza o infiltrado inflamatório tumoral correspondente a primeira linha de defesa (imunidade inata) do organismo nas duas vias do carcinoma escamoso de vulva. Nossos dados sugerem que o principal papel da imunidade inata em ambas as vias de CEC vulvar seja como mecanismo de defesa, na tentativa de impedir a progressão tumoral

ABSTRACT

INTRODUCTION: Vulva squamous carcinoma (VSCC) is a rare neoplasm that corresponds around 3 to 5% of malignant gynecological tumors. Its incidence is more common between the seventh and eighth decade of life, however, recently it has increased in young women, possibly due to an increasing number of HPV infections. Two strands divide vulvar carcinoma into different way one related to the presence of HPV infection and on the other hand, associated with mutations in p53 gene and chronic inflammatory processes, both of them are preceded by precursor lesions (vulvar intraepithelial lesions - VINs). The immune system acts to guarantee homeostasis, however, the context of inflammation and infection is usually associated with the development and progression of cancer. The analysis of the tumor microimmune environment and its impact on the clinical outcome can provide valuable information for a better understanding of the cellular mechanisms involved and evidence markers with predictive values of therapeutic and / or diagnostic response. AIMS: To expand the characterization of the cellular components of the inflammatory infiltrate of the first line of defense (innate immunity) associated with the tumor in vulvar carcinoma, relating these components to the status of HPV infection. METHODS: Forty-four tissue formalin fixed paraffin embedded samples were retrospectively selected from the archives of the Department of Anatomic Pathology of A.C.Camargo Cancer Center from 1990 to 2015. For the identification of immunological markers, experiments were carried out immunohistochemistry and, later, these markers were quantified using the APERIO® program. RESULTS: Based on the infiltration patterns of immune cells, the greatest expression occurred in the peritumoral region in both vulvar CPB pathways (independent HPV and dependent HPV) for the markers CD68, granzyme B, perforin, S100, CD1a and PD-L1 (p < 0.05). Perforin expression was higher in independent VSCC HPV in the peri- (p = 0.004) and intratumoral (p = 0.021) regions. In an independent VSCC HPV, the intense expression of S100 in the peritumoral region was associated with the absence of lymph node metastasis (p = 0.008); the strong expression of S100 in the intratumoral region was associated with the absence of vascular invasion (p = 0.007) and absence of lymph node metastasis (p = 0.043). In the VSCC HPV-dependent pathway, the intense expression of perforin was related to a lesser depth of invasion in the peri- (p = 0.013) and intratumoral (p = 0.022) regions. The expressions of the inflammatory cell markers were associated with global and disease-free survival for the VSCC pathways. In an independent VSCC HPV, the intense expression of CD1a in the intratumoral region, it was correlated with the shorter disease-free survival (p = 0.045). In the VSCC HPV-dependent pathway, increased CD56 expression was associated with shorter overall survival time (p = 0.043); the increased expressions of CD1a and PD-L1 in the peritumoral region correlated with longer disease-free survival (p = 0.008 and p = 0.021, respectively). CONCLUSIONS: Conclusion: This is a study that characterizes the inflammatory tumor infiltrate corresponding to the first line of defense (innate immunity) of the organism in the two pathways of squamous carcinoma of the vulva. Our data suggest that the main role of innate immunity in both pathways of VSCC is a mechanism defense, in an attempt to prevent tumor progression