Aplicação da tecnica de PCR (polymerase chain reaction) na pesquisa da hanseniase / ?

RESUMO

Embora com a introdução da poliquimioterapia, a prevalencia da hanseniase esteja diminuindo a nivel mundial, a doença ainda é considerada um problema de saude publica em muitos paises. No Brasl, a situação é de muita preocupação, pois o pais ocupa o segundo lugar no mundo em termos de numero de casos registrados. Com o objetivo de contribuir no controle e na erradicação desta endemia, aplicamos a tecnica de reação de polimerase em cadeia (PCR) diretamente em amostras clinicas de pacientes hansenianos, na tentativa de detecção da infecção subclínica, um dos mais importantes problemas para o controle epidemiologico da doença. Utilizando um sistema de amplificação especifico para M. leprae, foi possivel detectar em um primeiro rastreamento, a presença de bacilos em biopsia, linfa e sangue de 87% dos pacientes virgens de tratamento com uma positividade de 84% nos pacientes multibacilares e 100% nos paucibacilares, sugerindo a utilização do PCR como metodo de apoio para diagnostico. Diferentes protocolos para tratamento de amostras clinicas não invasivas tais como mucosa nasal e pêlo foram padronizados e apos a realização da PCR, detectamos a presença de bacilos em 87,5% dos pacientes paucibacilares. Concluimos que pêlo é uma amostra com alto potencial para detecção de infecção subclinica, uma vez que permite a detecção de M. leprae mesmo quando coletado de areas não lesadas da pele. Através da detecção de M. leprae em mucosa nasal e sangue de um individuo com suspeita clinica de hanseniase, demonstramos a utilização do PCR como metodo de suporte laboratorial a clinica em casos de dificil diagnostico. Mostramos ainda um diagnostico precoce de possivel recidiva em paciente paucibacilar apos longo tempo de tratamento, sugerindo a utilização da tecnica como metodo de apoio na diferenciação entre recidiva e reação reversa. Finalmente, avaliamos a eficacia da multidrogaterapia em individuos com 4 a 6 anos de alta terapeutica através da comparação entre avaliação clinica e laboratorial com PCR em sangue, linfa e pêlo, demonstrando a presença de DNA amplificavel em 54% dos individuos. Detectamos bacterias no sangue de 71% destes individuos sem sintomatologia clinica, sugerindo a existencia de bacterias viaveis. Embora a tecnica de PCR tenha apresentado alta sensibilidade e especificidade sugerindo a utilização para detecção sub-clinica da doença, a possibilidade de um carreamento passivo de bacilos em certas amostras e a falta de correlação entre PCR...