Análise da expressão imunoistoquímica da nucleofosmina, Ki67 e p53 como fatores prognósticos em câncer de pênis / Evaluation of prognostic value of the immunohistochemistry expression of the nucleophosmine, p53 and Ki67 in patients with penile carcinoma

RESUMO

O carcinoma epidermóide do pênis tem incidência significativa em países em desenvolvimento como o Brasil. O tratamento dos tumores invasivos consiste na ressecção da lesão primária e linfadenectomia bilateral, procedimento associado a alta taxa de morbidade. O estudo de fatores prognósticos do tumor primário pode ajudar na seleção dos pacientes candidatos às linfadenectomias. A expressão imunoistoquímica do ki-67, do p53 e da nucleofosmina (NPM) se associam a pior prognóstico em diversas neoplasias. Estudamos retrospectivamente 112 pacientes portadores de carcinoma epidermóide do pênis, submetidos a cirurgia do tumor primário no Departamento de Cirurgia Pélvica do AC Camargo Cancer Center. Os blocos de parafina foram revisados e submetidos a coloração imunoistoquímica para NPM, ki-67 e p53. A leitura foi realizada no dispositivo Aperio®. A imunorreatividade da NPM, Ki67 e p53 foi relacionada a fatores clínicos e patológicos idade, estado civil, raça, tempo de evolução da doença, antecedentes venéreos, estadiamento clínico, espessura do tumor, grau de diferenciação, embolização linfovascular, estadiamento patológico, tipo de invasão. Analisamos quais fatores influenciaram o risco de metástases linfonodais e sobrevida global (SG) e livre de doença (SLD). Os testes estatísticos de associação utilizados foram o Qui-quadrado, teste de Fischer, a regressão logística múltipla. Na análise de sobrevida utilizamos o Kaplan e Meier, o Log-rank e o modelo de riscos proporcionais de cox. A imunorreatividade do p53 estava alta em 42,3% dos casos e se associou a maior ocorrência de recidivas, mas não a outras variáveis. A imunorreatividade do Ki67 estava alta em 89,1% dos casos e não se associou a nenhuma variável. A NPM apresentou imunoexpressão baixa em 50% dos casos e se associou a maiores estadios clínicos T e N e invasão de corpo cavernoso. A imunorreatividade do p53, da NPM e do Ki67 não se associaram a metástases linfonodais. A ocorrência de metástases linfonodais foi influenciada pelo estadiamento clínico N (p=0,001), grau de diferenciação (p=0,007), invasão vascular (p=0,004), invasão perineural (p<0,001), infiltração de corpos cavernosos (p=0,004), infiltração da uretra (p=0,013) e espessura tumoral (p=0,008). No modelo multivariado, estadiamento clínico N (RR=5,5); IC [1,4-20,8], infiltração de corpos cavernosos (RR=3,9); IC [1,2-12,3] e invasão perineural (RR=4,9); IC [1,5-16,2] foram fatores independentes de risco de metástases linfonodais. A SG ao final de 120 meses foi de 47,3% e foi influenciada por raça (p=0,009), recidivas (p=0,018), grau moderado e alto (p=0,031), infiltração de corpos cavernosos (p=0,037), invasão vascular (p=0,02), invasão perineural (p=0,030), espessura tumoral >5 mm (p=0,015) e metástases linfonodais (p=0,003). A imunoexpressão da NPM, do Ki67 e do p53 não influenciou a SG. Na análise multivariada, a invasão vascular (RR=1,9; IC [1,0-3,6]) se associou a menor SG. A SLD foi influenciada por infiltração de corpo cavernoso (p<0,001), infiltração da uretra (p=0,032), infiltração vascular (p<0,001), metástases linfonodais (p<0,001) e alta imunoexpressão do p53 (p=0,008). A imunorreatividade do Ki67 e da NPM não influenciaram a SLD. Na análise multivariada apenas a invasão de corpo cavernoso (RR=4,0; IC [1,4-11,3]) e a ocorrência de metástases linfonodais (RR=4,2;IC[1,4-13,1]) se associaram a menor SLD. Os resultados permitem concluir que a alta expressão do p53 se associou a pior SLD na análise univariada e a perda de expressão da NPM se associou a maiores estadios clínico e patológico

ABSTRACT

Penile carcinoma still has relevant incidence in developing countries like Brazil. The gold standard for the treatment of invasive lesions remains amputation followed by bilateral lymphadenectomy, procedures associated with high morbidity. The identification of prognostic factors could help to select the best candidates to lymphadenectomies. The immunoreactivity of p53, nucleophosmin (NPM) and ki67 has been associated with the prognosis of many tumors. A retrospective study of 112 patients with penile carcinoma submitted to amputation and lymphadenectomy at the Division of Urology of A.C.Camargo Cancer Center was undertaken to evaluate the prognostic value of immunoreactivity of p53, NPM and Ki67 in the primary tumor. The immunoreactivity of these proteins were correlated with the followed factors age, race, marital status, time to diagnosis, venereal history, clinical stage, tumor thickness, histological grade, lymphovascular embolization, corpora cavernosa and urethra infiltration, pattern of invasion, lymph node metastasis, overall survival (OS) and disease free survival (DFS). The association among variables was done by the chi-square test and the survival analysis were performed with the Kaplan & Meier technique and the multi-factorial analysis by the Cox regression technique. The p53 immunoreactivity was high in 42,3% of the cases and was associated with high recurrence rates, but not with other variables. Ki67 immunoreactivity was high in 89,1% of the cases and was not associated with any variable. NPM immunostaining was considered low in 50% of the cases and was associated with higher clinical stages N and T and corpora cavernosa invasion, but not with other variables. There was no association between NPM, p53 and Ki67 immunostaining and lymph node metastasis. Clinical stage N (p=0,001), grade of differentiation (p=0,007), vascular invasion (p=0,004), perineural invasion (p<0,001), corpora cavernosa infiltration (p=0,004), urethral infiltration (p=0,013) and tumor thickness (p=0,008) were significant for the incidence of lymph node metastasis. The multivariate analysis revealed that clinical stage N (RR=5,5; CI [1,4-20,8]), corpora cavernosa infiltration (RR=3,9; CI [1,2-12,3]) and perineural invasion (RR=4,9; CI [1,5-16,2]) were significant for the incidence of lymph node metastasis. The OS at the end of 120 months was 47,3% and was influenced by race (p=0,009), recurrences (p=0,018), moderate or high pathologic grade (p=0,031), corpora cavernosa infiltration (p=0,037), lymphovascular embolization (p=0,02), perineural invasion (p=0,030), tumor thickness (p=0,015) and lymph node metastasis (p=0,03). There was no association between p53, NPM and Ki67 immunoreactivity and OS. Multivariate analysis revealed that vascular invasion (RR=1,9; CI [1,0-3,6]) influenced OS. DFS was influenced by corpora cavernosa infiltration (p<0,001), urethra infiltration (p=0,032), lymphovascular embolization (p<0,001), lymph node metastasis (p<0,001) and p53 immunostaining (p=0,008). NPM and Ki67 immunoreactivity did not influence DFS. Multivariate analysis revealed that corpora cavernosa infiltration (RR=4,0; CI [1,4-11,3]) and lymph node metastasis (RR=4,2; CI [1,4-13,1]) influenced DFS. These results showed that higher p53 expression was associated with a worst DFS at univariate analysis and the low NPM imunoexpression was associated with higher clinical and pathological stages