Susceptibilidad de candida spp a fluconazol, voriconazol y caspofungina por el método de difusión con disco / Susceptibility of candida spp to fluconazol, voriconazol and caspofungina by the method of diffusion with disc

RESUMEN

En las dos últimas décadas, el aumento de la prevalencia de las candidosis ha sido constante. En nuestro país existe un incremento notable y progresivo de especies distintas a Candida albicans asociado a candidemias, lo que señala la necesidad de identificar las levaduras del genero Candida a nivel de especie, así como la realización de las pruebas de susceptibilidad a los antifúngicos. El objetivo de este trabajo fue determinar la susceptibilidad de Candida spp., a Fluconazol (FZ), Voriconazol (VZ) y Caspofungina (CS) por el método de difusión con discos. Se recolectaron 80 aislados de Candida spp., provenientes de pacientes con candidemia hospitalizados en las UCI de 9 centros hospitalarios del área metropolitana de Caracas (junio 2006 a abril 2008). Los aislados se identificaron por métodos automatizados Vitek-2 YBC® y Walkway MicroScan®, verificando la identificación por métodos convencionales, Chromagar-Candida y morfología en agar harina de maíz. La prueba de difusión con disco se realizó según el documento CLSI M44-A, utilizando discos comerciales de FZ (25µg), VZ (1µg) y discos de CS (5µg) de preparación artesanal. La lectura se realizó a las 24 h de incubación a 35°C, se midió en milímetros el diámetro de la zona de inhibición que producía una reducción significativa ≥ 50% y el criterio de interpretación fue FZ (S≥19mm, S-DD15-18mm, R≤14mm), VZ (S≥17mm, S-DD14-16 mm, R≤13mm), CS (S≥11mm, R≤10mm). Todas las especies de Candida resultaron susceptibles a los 3 antifúngicos ensayados a excepción de un aislado de C.krusei resistente a FZ. Los valores mínimo, máximo y media geométrica de la susceptibilidad en mm fueron FZ (25/38/30), VZ (26/39/31) y CS (16/21/18). El método de disco difusión es una alternativa útil, rápida y de fácil ejecución para ser implementado en laboratorios de micología y así ofrecer una orientación en el tratamiento antifúngico adecuado y oportuno en candidosis invasora.

ABSTRACT

During the last two decades, the increase of prevalence of candidosis has been constant. In our country there has been a notable and progressive increment of different species of Candida albicans associated with candidemis, which indicate the need to identify the yeasts of the Candida gender at the specie level, as well as the execution of the susceptibility testing on the antifungal. The purpose of this work was to determine the susceptibility of Candida spp., to Fluconazole (FZ), Voriconazole (VZ) and Caspofungin (CS) by the method of diffusion with disc. There were collected 80 isolates of Candida spp., sampled from patients with candidemia hospitalized at the ICU of 9 hospital centers of the metropolitan area of Caracas (June 2006 to April 2008). The isolates were identified by automated methods, Vitek-2 YBC® and Walkway MicroScan®, and then the identification was verified by a conventional method, Chromagar-Candida and the morphology in corn meal agar. The test of diffusion with disc was performed as per document CLSI M44-A, using commercially available disc of FZ (25µg), VZ (1µg) and discs of CS (5µg) of in-house preparation. The readings were made at 24 h of incubation, at 35°C, thereby measuring in millimeters the diameter of the inhibition zone that generated a significant reduction ≥ 50%, being the criteria of interpretation: FZ (S≥19mm, S-DD15-18mm, R≤14mm), VZ (S≥17mm, S-DD14-16 mm, R≤13mm), CS (S≥11mm, R≤10mm). All species of Candida were susceptible against the 3 antifungal assayed with the exception of an isolate of C.krusei which was resistant to FZ. The minimum, maximum and geometric media values for the susceptibility in mm were FZ (25/38/30), VZ (26/39/31) and CS (16/21/18). The method of diffusion with disc is a useful, quick, and easy to execute and implement alternative by mycology laboratories, in order to offer an orientation regarding the proper and opportune antifungal treatment of invasive candidosis.