Impacto funcional de la inhibición farmacológica de Tmem176b en diferentes subpoblaciones de células dendríticas / Functional impact of pharmacological inhibition of Tmem176b on different subpopulations of dendritic cells

RESUMEN

Nuestro grupo ha reportado que la proteína Tmem176b es un canal/transportador iónico intracelular fuertemente expresado en células dendríticas (DCs), que bloquea la respuesta inmune anti-tumoral. Identificamos al compuesto BayK8644 como un inhibidor de Tmem176b. BayK8644 promueve el control tumoral en protocolos profilácticos, pero no en tumores establecidos a través de la activación del inflamasoma y células T CD8+. Entendimos que era necesario profundizar en los mecanismos inmunológicos implicados, con el fin de obtener información que nos permitiera mejorar la respuesta terapéutica. Dada la relevancia de las DCs en la respuesta anti-tumoral y la fuerte expresión de Tmem176b en esos leucocitos, nos planteamos como objetivo general estudiar el impacto de la inhibición de Tmem176b en diferentes sub-poblaciones de DCs (cDC1 y cDC2). Aquí hemos demostrado que la inhibición de Tmem176b con BayK8644 resulta en el bloqueo de una de las funciones más específicas de las cDC1, la presentación cruzada de antígenos. Mostramos que la encapsulación de BayK8644 en NP (NP-BayK8644) previene la inhibición de la presentación cruzada de antígenos mientras mantiene la capacidad de activación del inflamasoma. El tratamiento con NP-BayK8644 de animales que poseen tumores establecidos controló el crecimiento tumoral de una manera dependiente de Tmem176b. El control tumoral se asoció con una mayor infiltración tumoral por células T CD8+ totales y específicas de tumor. Por tanto, la formulación de BayK8644 en NP mejoró la eficacia antitumoral del compuesto libre al evitar la inhibición de la presentación cruzada de antígenos al tiempo que desencadena la activación del inflamasoma. Por otra parte, caracterizamos mecanismos inmunológicos desencadenados por cDC2 luego de la deleción génica y el bloqueo farmacológico de Tmem176b. Mostramos en un modelo in vitro y ex vivo que las DC2 de animales portadores de tumores Tmem176b-/- o WT tratados con BayK8644 promovió la diferenciación de células Th17 de una manera dependiente del inflamasoma. Experimentos de transferencia celular adoptiva mostraron que las células Th17 mejoran los efectos anti-tumorales del bloqueo de PD-1, sugiriendo que el eje cDC2/Th17 podría jugar un papel relevante en la terapia anti-PD1. En suma, caracterizamos el impacto de la inhibición de Tmem176b en diferentes subpoblaciones de DCs. Ese conocimiento aportó elementos para desarrollar formulaciones que mejoren el efecto anti-tumoral del BayK8644. Además describimos mecanismos desencadenados al inhibir a Tmem176b que potenciarían respuestas inmunes durante la terapia oncológica basada en el bloqueo de PD-1