Efeitos do probiótico Saccharomyces ceveriseae no tratamento da periodontite experimental em ratos submetidos à quimioterapia / Effects of the probiotic Saccharomyces Ceveriseae in the treatment of experimental periodontitis in rats undergoing chemotherapy

RESUMO

O presente estudo teve a finalidade de avaliar os efeitos do uso do probiótico (PRO) Saccharomyces ceveriseae coadjuvante à raspagem e alisamento radicular (RAR) no tratamento da periodontite experimental (PE) induzida em animais imunossuprimidos com o quimioterápico 5-Fluorouracil (5FU). Cento e oito animais foram submetidos à indução da PE por meio da instalação de um fio de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo ou direito. A imunossupressão foi obtida pela injeção intraperitoneal do 5FU aplicada em dois momentos no ato da instalação da ligadura e após 48 horas. Sete dias após instalação a ligadura foi removida e os animais separados aleatoriamente em seis grupos experimentais que receberam os seguintes tratamentos PE (n=18) - animais que não sofreram nenhum tratamento sistêmico ou local; SS (n=18) - animais que não sofreram tratamento local, apenas tratamento sistêmico com solução salina (SS); 5FU (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5FU que não sofreram nenhum tratamento local; 5FU-PRO (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5FU que receberam irrigação local com 0,6 ml de PRO; 5FURAR (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5FU que receberam RAR e; 5FURAR-PRO (n=18) - animais tratados sistemicamente com 5FU, que receberam tratamento com RAR e irrigação local com 0,6 ml de PRO. Seis animais de cada período foram submetidos à eutanásia aos 7, 15 e 30 dias após os tratamentos. Os espécimes contendo a área interessada foram obtidos e processados para a análise histopatológica, histométrica da perda óssea alveolar (POA), porcentagem de tecido ósseo (PTO), porcentagem de osso vital (POV) e porcentagem de osso não vital (PONV), e análise imunoistoquímica (TRAP, RANKL e OPG). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (α=5%). Os resultados histológicos demonstraram que nos espécimes tratados com 5FU houve agravamento da perda óssea na região de furca comparado com os animais sistemicamente saudáveis (grupos PE e SS); que o tratamento com PRO como monoterapia (grupo 5FU-PRO) promoveu redução do processo inflamatório, denotando estabilização da doença periodontal; que o tratamento com RAR (grupo 5FU-RAR) reduziu o volume do infiltrado inflamatório mostrando sinais de reparação e a associação PRO-RAR (grupo 5FU-RAR-PRO) evidenciou nítida reestruturação tecidual aos 15 dias e menor área de reabsorção óssea aos 30 dias. Observou-se na análise histométrica que a POA foi maior no grupo 5FU-PRO em relação ao grupo SS aos 30 dias (p<0,05); a PTO foi maior no grupo 5FU-RAR-PRO aos 30 dias em comparação aos grupos EP, SS, 5FU e 5FU-PRO (p<0,05) e a POV foi maior no grupo 5FU-RAR-PRO em comparação ao grupo 5FU aos 7 dias, e maior aos 30 dias em comparação a todos os grupos experimentais (p<0,05). Não houve diferença entre os grupos e períodos na imunomarcação das células TRAP positivas. A RANKL mostrou alto padrão de imunomarcação nos grupos PE, SS e 5FU em todos períodos, e aos 7 dias no grupo 5FU-PRO, 5FU-RAR e 5FURAR-PRO, moderado padrão de imunomarcação nos grupos 5FU, 5FU-PRO, 5FURAR, e 5FU-RAR-PRO, mantendo-se baixo padrão neste último grupo, no período de 30 dias. Houve baixo padrão de imunomarcação de OPG em todos os grupos e períodos, exceto no grupo 5FU-RAR-PRO que mostrou moderado padrão. Diante dos resultados obtidos pode ser concluído que o uso do quimioterápico 5FU agravou a PE; que o uso do Saccharomyces ceveriseae associado à RAR, minimizou os efeitos do quimioterápico nos tecidos periodontais reduzindo o processo inflamatório, e reduzindo a porcentagem de destruição de tecido ósseo na área de furca em animais imunossuprimidos(AU)

ABSTRACT

The present study aimed to evaluate the effects of using probiotic (PRO) Saccharomyces ceveriseae as an adjuvant of scaling and root planing (SRP) in the treatment of experimental periodontitis (EP) induced in immunosuppressed animals with chemotherapeutic 5-Fluorouracil (5FU). One hundred and eight animals were submitted to EP induction by installing a cotton thread around the lower left or right first molar. Immunosuppression was obtained by intraperitoneal injection of 5FU applied in two moments at the time of installing the ligature and after 48 hours. Seven days after installation, the ligature was removed and the animals were randomly separated into six experimental groups that received the following treatments EP (n = 18) - animals that did not receive any systemic or local treatment; SS (n = 18) - animals that did not receive local treatment, only systemic treatment with saline solution (SS); 5FU (n = 18) - animals treated systemically with 5FU that did not receive any local treatment; 5FUPRO (n = 18) - animals treated systemically with 5FU that received local irrigation with 0.6 ml of PRO; 5FU-SRP (n = 18) - animals treated systemically with 5FU that received RAR and; 5FU-SRP-PRO (n = 18) - animals treated systemically with 5FU, which received treatment with SRP and local irrigation with 0.6 ml of PRO. Six animals from each period were euthanized at 7, 15 and 30 days after treatments. The specimens containing the interested area were obtained and processed for histopathological, histometric analysis of alveolar bone loss (ABL), percentage of bone tissue (PBT), percentage of vital bone (PVB) and percentage of non-vital bone (PNVB), and immunohistochemical analysis (TRAP, RANKL and OPG). The data obtained were subjected to statistical analysis (α = 5%). The histological results showed that in the specimens treated with 5FU there was worsening of bone loss in the furcation region compared to healthy animals (EP and SS groups); that treatment with PRO as monotherapy (group 5FU-PRO) reduced the inflammatory process, denoting stabilization of periodontal disease; that treatment with SRP (5FU-SRP group) reduced the volume of the inflammatory infiltrate showing signs of repair and the PRO-SRP association (5FU-SRP-PRO group) showed a clear tissue restructuring at 15 days and a smaller area of bone resorption at 30 days. It was observed in the histometric analysis that ABL was higher in the 5FU-PRO group compared to SS group at 30 days (p <0.05); PTO was higher in 5FU-SRP-PRO group at 30 days compared to EP, SS, 5FU and 5FU-PRO groups (p <0.05) and PVB was higher in the 5FU-SRP-PRO group compared to 5FU group at 7 days, and greater at 30 days compared to all experimental groups (p <0.05). There was no difference between groups and periods in the immunostaining of TRAP positive cells. RANKL showed a high immunostaining pattern in the EP, SS and 5FU groups in all periods, and at 7 days in 5FU-PRO, 5FU-SRP and 5FU-SRP-PRO groups, a moderate immunostaining pattern in the 5FU, 5FU-PRO, 5FU-SRP and 5FU-SRP-PRO groups, maintaining a low standard in 5FU-SRP-PRO group, in the period of 30 days. There was a low pattern of OPG immunostaining in all groups and periods, except in 5FU-SRP-PRO group, which showed a moderate pattern. In view of the results obtained, it can be concluded that the use of 5FU chemotherapy has worsened the evolution of EP; that the use of Saccharomyces ceveriseae associated with RAR, minimized the effects of chemotherapy on periodontal tissues, reducing the inflammatory process, and reducing the percentage of bone tissue destruction in the furcation area in immunosuppressed animals(AU)