Immune challenges upregulate the expression of cannabinoid receptors in cultured human odontoblasts and gingival fibroblasts / Los desafíos inmunológicos regulan la expresión de los receptores cannabinoides en cultivos de odontoblastos y fibroblastos gingivales humanos

ABSTRACT

ABSTRACT Odontoblasts and gingival fibroblasts play essential roles in the physiological and pathological processes of dental tissue. Cannabinoid receptors (CB1 and CB2) are involved in analgesia by modulating the función of calcium channels that inhibit the synthesis of some neurotransmitters. A better understanding of the physiology of these receptors would provide the possibility of using them as therapeutic targets in controlling dental pain. The aim of this study was to evaluate the presence and activity of cannabinoid receptors in human odontoblast-like cells (OLC) and human gingival fibroblasts (HGF). CB1 and CB2 transcription was analyzed by real-time PCR, proteins were detected by immunofluorescence, and functional cannabinoid receptors were evaluated by measuring intracellular calcium concentration after stimulation with cannabidiol (CBD) and pre-treatment with a CB1 antagonist, a CB2 inverse agonist and a TRPV1 antagonist. Transcripts for CB1 and CB2 were found in both odontoblasts and gingival fibroblasts. Cannabidiol induced an increase in [Ca2+]i in both cells types, but surprisingly, pre-treatment with selective cannabinoid antagonists attenuated this effect, suggesting a functional communication between specific cannabinoid receptors and other CBD target receptors. In conclusion, human odontoblasts and gingival fibroblasts express functional CB1 and CB2 cannabinoid receptors, which could be modulated to improve the treatment of pain or dental sensitivity.

RESUMEN

RESUMEN Los odontoblastos y los fibroblastos gingivales desempeñan funciones esenciales en los procesos fisiológicos y patológicos de los tejidos dentales. Los receptores cannabinoides (CB1 y CB2) participan en la analgesia mediante la modulación de la función de canales de calcio que inhiben la síntesis de algunos neurotransmisores. Un mejor conocimiento de su fisiología abre la posibilidad de utilizar estos receptores como dianas terapéuticas en el control del dolor dental. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar la presencia y la actividad de los receptores cannabinoides en células humanas similares a los odontoblastos (OLC) y en fibroblastos gingivales humanos (HGF). Se analizó la transcripción de CB1 y CB2 por PCR en tiempo real, la detección de las proteínas por inmunofluorescencia y se evaluaron los receptores cannabinoides funcionales midiendo las concentraciones de calcio intracelular, tras la estimulación con cannabidiol (CBD) y el pretratamiento con un antagonista de CB1, un agonista inverso de CB2 y un antagonista de TRPV1. Se encontraron mensajeros para CB1 y CB2 tanto en odontoblastos como en fibroblastos gingivales. El cannabidiol indujo un aumento de la [Ca2+]i en ambos tipos de células, pero sorprendentemente el pretratamiento con antagonistas cannabinoides selectivos atenuó este efecto, lo que sugiere una comunicación funcional entre receptores cannabinoides específicos y otros receptores diana del CBD. En conclusión, los odontoblastos humanos y los fibroblastos gingivales expresan receptores cannabinoides CB1 y CB2 funcionales, que podrían ser modulados para mejorar el tratamiento del dolor o la sensibilidad dental.