Análise in vitro da capacidade de soluções contendo fluoreto e/ou trimetafosfato na remineralização da dentina e na inibição da atividade de metaloproteinases da matriz dentinária / In vitro analysis of the capacity of solutions containing fluoride and/or trimetaphosphate in the remineralization of dentin and in the inhibition of the activity of dentin matrix metalloproteinases

RESUMO

Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar o potencial anti-proteolítico contra MMP-2 e MMP-9 e a capacidade de induzir a remineralização da dentina, através de soluções contendo diferentes concentrações de TMP (na sua forma cíclica), diferentes concentrações de F e associação TMP/F. Métodos: Blocos de dentina radicular (6mmx4mmx2mm, n = 130) foram selecionados e divididos aleatoriamente em 13 grupos/soluções experimentais (n = 10) 1) Placebo (sem F/TMP); 2) 0,3% TMP hidrolisado; 3) 1% TMP hidrolisado; 4) 3% TMP hidrolisado; 5) 0,3% TMP; 6) 1% TMP; 7) 3% TMP; 8) 250 ppm F; 9 500 ppm F; 10) 1100 ppm F; 11) 250 ppm F associado a 0,3% TMP; 12) 500 ppm F associado a 1% TMP e 13) 1100 ppm F associado a 3% TMP. A avaliação do potencial anti-proteolítico das soluções experimentais contra as metaloproteinases da matriz dentinária (- 2 e -9) foi realizado por meio da análise zimográfica. Para as análises mecânicas, três áreas foram determinadas para cada espécime 1- controle (sem tratamento); 2- desmineralizado (cárie artificial); 3- tratado (desmineralizado e submetido a ciclagem de pH por 7 dias, e tratado por 1 min com as soluções experimentais). Os espécimes de dentina foram analisados quanto à porcentagem de recuperação de dureza superficial (%SHR), em dureza transversal (%CSHR) e por microtomografia computadorizada (IMC). Para os dados de dureza e Micro-CT, os resultados foram analisados por ANOVA de medidas repetidas seguida do teste de Student-Newman-Keuls (p <0,05). Resultados: A análise zimográfica mostrou que 1100 ppm F + 3% de TMP promoveu inibição completa da atividade gelatinolítica (MMP-2; MMP-9). Os grupos com TMP não hidrolisados apresentaram efeito remineralizador (% SHR e % CSHR) superior aos grupos hidrolisados. O grupo 1100F + TMP promoveu a maior %SHR e %CSHR entre todos os grupos (p <0,001), sendo respectivamente 15,4 e 10,5%, superior ao grupo 1100F. Os grupos contendo 1100F e 1100F + 3%TMP apresentaram maior concentração mineral. Conclusão: Com base nos resultados, 3% TMP atua como um agente antiproteolítico contra metaloproteinases da matriz dentinária. Além disso, quando suplementado com 1100F, 3% TMP potencializa a remineralização, aumentando significativamente as propriedades mecânicas da dentina tratada. Os tratamentos com TMP não hidrolisado e associado ao F maior que as soluções fluoretadas sem o TMP. Significância clínica Dessa forma, uma potencial estratégia preventiva e terapêutica pode ser considerada na clínica odontológica, principalmente na terapia da cárie radicular, como também para método preventivo de lesões iniciais de cárie dentinária ou no pré-tratamento da dentina, utilizando-os como agentes cross-linker em procedimentos restauradores(AU)

ABSTRACT

Objective: The aim of this study was to investigate the anti-proteolytic potential against MMP-2 and MMP-9 and the ability to induce dentin remineralization, through solutions containing different concentrations of TMP (in its cyclic form), different concentrations of F and TMP / F association. Methods: Root dentin blocks (6mmx4mmx2mm, n = 130) were selected and randomly divided into 13 groups / experimental solutions (n = 10) 1) Placebo (without F / TMP); 2) 0.3% hydrolyzed TMP; 3) 1% hydrolyzed TMP; 4) 3% hydrolyzed TMP; 5) 0.3% TMP; 6) 1% TMP; 7) 3% TMP; 8) 250 ppm F; 9,500 ppm F; 10) 1100 ppm F; 11) 250 ppm F associated with 0.3% TMP; 12) 500 ppm F associated with 1% TMP and 13) 1100 ppm F associated with 3% TMP. The evaluation of the antiproteolytic potential of experimental solutions against dentin matrix metalloproteinases (- 2 and -9) was carried out by means of zymographic analysis. For mechanical analysis, three areas were determined for each specimen 1- control (without treatment); 2- demineralized (artificial caries); 3- treated (demineralized and subjected to pH cycling for 7 days, and treated for 1 min with the experimental solutions). The dentin specimens were analyzed for the percentage of recovery of superficial hardness (% SHR), in crosssectional hardness (% CSHR) and by computed microtomography (∆IMC). For the hardness and Micro-CT data, the results were analyzed by repeated measures ANOVA followed by the Student-Newman-Keuls test (p <0.05). Results: The zymographic analysis showed that 1100 ppm F + 3% TMP promoted complete inhibition of gelatinolytic activity (MMP-2; MMP-9). The groups with non-hydrolyzed TMP showed a remineralizing effect (% SHR and % CSHR) superior to the hydrolyzed groups. The 1100F + TMP group promoted the highest % SHR and % CSHR among all groups (p <0.001), being 15.4 and 10.5%, respectively, higher than the 1100F group. The groups containing 1100F and 1100F + 3% TMP showed higher mineral concentration. Conclusion: Based on the results, 3% TMP acts as an antiproteolytic agent against dentinal matrix metalloproteinases. In addition, when supplemented with 1100F, 3% TMP enhances remineralization, significantly increasing the mechanical properties of the treated dentin. Treatments with non-hydrolyzed TMP and associated with F greater than fluoridated solutions without TMP. Clinical significance: Thus, a potential preventive and therapeutic strategy can be considered in the dental clinic, mainly in the treatment of root caries, as well as for the preventive method of initial lesions of dental caries or in the pretreatment of dentin, using them as agents cross-linker in restorative procedures(AU)