Liquid-base cytology: a new method for oestral cycle study in wistar's rats

ABSTRACT

OBJECTIVES: The objective of this study was the standardization of a collection technique and staining in liquid-base that allies the pratical and cytological wealth, making possible a larger reproductibility and microscopic easiness. METHODS: Female wistar rats (n=20) were submitted to the daily vaginal collection in saline and fastened washed (ether/alcohol) and stained in suspension with a solution of Evans Blue 0.025%. The sample was pondered by centrifugation and observed under lens of 40 x. RESULTS: The stained smears allowed clear differentiation of the phases of hormonal cycle (diestrus, proestrus, estrus and metestrus); besides the differentiation of the cellular types in relation to its maturation degree having as parameters the cellular size, nucleus / cytoplasm relationship (NCR) and ink reaction. The study demonstrated the existence of three basic cellular patterns cells with low NCR, accentuated cyanophily and small size; cells with increment in NCR, cyanophilic loss and larger volume cytoplasmatic and without nuclei keratinization cells in squamous aspect. CONCLUSION: The staining of the material allowed, besides the cytological classification, the quantification possibility that would result in a perfected accompaniment of the cycle estrous.

RESUMO

OBJETIVOS: O objetivo deste estudo foi à padronização de uma técnica de coleta e coloração em meio líquido que alie a praticidade e a riqueza citológica, possibilitando uma maior reprodutividade e facilidade microscópica. MÉTODOS: Ratas wistar (n=20) foram submetidas à coleta vaginal diária em salina e o lavado fixado (éter/álcool) e corado em suspensão com solução de azul de Evans 0,025%. A amostra foi concentrada por centrifugação e observado sob objetiva de 40 x. RESULTADOS: Os esfregaços corados permitiram nítida diferenciação das fases do ciclo hormonal (diestro, proestro, estro e metaestro); além da diferenciação dos tipos celulares em relação ao seu grau de maturação tendo como parâmetros o tamanho celular, relação núcleo / citoplasma (RNC) e reação tintorial. O estudo demonstrou a existência de três padrões celulares básicos células com baixa RNC, acentuada cianofília e pequeno tamanho; células com acréscimo na RNC, perda de cianofilia e maior volume citoplasmático e células queratinizadas anucleadas em aspecto de escama. CONCLUSÃO: A coloração do material permitiu, além da classificação citológica, a possibilidade de quantificação o que resultaria em um acompanhamento mais acurado do ciclo estral.