Polissacarídeos sulfatados isolados das clorofíceas Caulerpa racemosae Caulerpa cupressoides – extração, fracionamento e atividadeanticoagulante / Sulfated polysaccharides isolated from Caulerpa racemosa and Caulerpa cupressoides (Chlorophyceaes) – extraction, fractionation and anticoagulant activity

RESUMO

A incidência de doenças cardiovasculares e os efeitos adversos da heparinoterapiatêm motivado a busca por novos agentes terapêuticos e os polissacarídeos sulfatados (PS) de algasmarinhas têm sido reportados como fontes alternativas para tal. Objetivou-se avaliar o potencialanticoagulante dos PS totais (PST) isolados e fracionados das clorofíceas Caulerpa racemosa eCaulerpa cupressoides. Inicialmente, os PST foram extraídos com papaína em tampão acetato desódio 0,1 M (pH 5,0) contendo cisteína 5 mM e EDTA 5 mM, seguidos de fracionamento emcoluna de troca iônica de DEAE-celulose com gradiente de NaCl. As frações obtidas foramanalisadas por eletroforese em gel de agarose a 0,5% e a atividade anticoagulante, mensurada pelotempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), usando-se plasma humano normal ecomparada a uma curva-padrão de heparina (193 UI mg-1). Verificaram-se semelhantes perfiscromatográficos entre os PS de ambas as espécies, porém com padrões de mobilidades distintasquando as frações foram comparadas por eletroforese. Os PS modificaram o TTPA, cujasatividades anticoagulantes foram de apenas 21,23 e 24,36 UI mg-1, quando eluídos com 0,75 M desal para C. racemosa e C. cupressoides, respectivamente. Portanto, PS anticoagulantes isolados dasclorofíceas C. racemosa e C. cupressoides resultaram em efeitos anticoagulantes inferiores aos daheparina. Estudos comparativos dessas moléculas também são sugeridos como ferramentasauxiliares na identificação de algas do mesmo gênero.

ABSTRACT

The incidence of cardiovascular diseases and adverse effects from heparintherapy have led to asearch for new therapeutic agents, and the sulfated polysaccharides (SP) of seaweeds have beenreported as alternative sources. The aim of this work was to evaluate the anticoagulant potentialof total SP (TSP) isolated and fractionated from Caulerpa racemosa and Caulerpa cupressoides(Chlorophyceaes). Initially, the TSP were extracted with papain in 0.1 M sodium acetate buffer(pH 5.0) containing 5 mM cysteine and 5 mM EDTA, followed by fractionation on ionexchange DEAE-cellulose column with NaCl gradient. The obtained fractions were analyzed by0.5% agarose gel electrophoresis and the anticoagulant activity measured by the activated partialthromboplastin time (APTT) using normal human plasma, and compared to a standard heparincurve (193 IU mg-1). Similar chromatographic profiles of SP were shown on both species, butwith distinct mobility patterns, when the SP fractions were compared by electrophoresis. SPeluted with 0.75 M of NaCl modified the APTT, whose anticoagulant activities were only 21.23and 24.36 IU mg-1 for C. racemosa and C. cupressoides, respectively. Therefore, anticoagulant SPisolated from chlorophyceaes showed effects inferior to heparin, and comparative studies of thesemolecules are also suggested as auxiliary tools in the identification of algae of the same genus.