Association between insulin-like growth factor-I, thyroxine and follicle stimulating hormone on the survival and in vitro development of caprine preantral follicles / Associação entre fator de crescimento semelhante à insulina-I, tiroxina ehormônio folículo estimulante sobre a sobrevivência e o desenvolvimentoin vitro de folículos pré-antrais caprinos

RESUMO

O objetivo deste estudo foi investigar a influência da interação entre o Hormônio Folículo Estimulante obtido da pituitária Humana (hFSH; 10 ng/mL), Fator de Crescimento Semelhante a Insulina Tipo 1 (IGF-I; 100 ng/mL) e Tiroxina (T4 ; 10, 20 ng/mL) na sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais cultivados in vitro. Fragmentos do córtex ovariano coletados a partir de 17 cabras adultas não gestantes foram submetidos a diferentes tratamentos que incluíam meio α-MEM+, IGF-I, hFSH, T4 e em seguida foram processados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados demonstraram uma redução no percentual de folículos normais, após um e sete dias de cultivo nos meios α-MEM+ (controle cultivado), T4 (10)/IGF-I, T4 (20)/IGF-I/hFSH e nos meios α-MEM+, IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, quando comparados ao controle não cultivado. Entretanto, o meio contendo T4 (20)/hFSH apresentou taxa de sobrevivência folicular superior aos demais tratamentos, quando cultivado por sete dias. Observou-se, ainda, que o diâmetro folicular quando cultivado neste meio não se alterou, quando comparado ao controle (não cultivado). As análises ultraestruturais confirmaram a integridade de folículos cultivados em meio contendo T4 (20)/hFSH. Em conclusão, o meio com T4 (20)/hFSH apresentou os melhores resultados, quando se avaliou sobrevivência, crescimento e aspectos ultraestruturais de folículos pré-antrais de caprinos cultivados in vitro.

ABSTRACT

The aim of this study was to investigate the influence of the interaction between follicle stimulating hormone obtained from Human Pituitary (hFSH; 10 ng/mL), Insulin-like Growth Factor Type 1 (IGF-I; 100 ng/mL) and thyroxine (T4 ; 10, 20 ng/mL) on survival, activation and growth of preantral follicles (PAF) cultured in vitro. Fragments of ovarian cortex collected from 17 nonpregnant adult goats underwent different treatments that included α-MEM+ medium, IGF-I, hFSH, T4 and were processed for classic histology and transmission electron microscopy. The results showed a reduction in the percentage of normal follicles, after one and seven days of culture in media α-MEM+ (cultured control), T4 (10)/IGF-I, T4 (20)/IGF-I/hFSH and in media α-MEM+, IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, T4 (20)/IGF-I/hFSH, when compared to the non-cultured control. However, the medium containing T4 (20)/hFSH showed a follicular survival rate higher than the other treatments, when cultured for seven days. It was also observed that the follicular diameter did not change when cultured in this medium, when compared to the control (non-cultured). The ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles cultured in a medium containing T4 (20)/hFSH. In conclusion, the medium containing T4 (20)/hFSH showed the best results, when evaluating the survival, growth and ultrastructural aspects of caprine preantral follicles cultured in vitro.