Potencial antimicrobiano e antibiofilme do extrato hidroetanólico da folha de Spondias mombin L e de suas frações frente a microrganismos superinfectantes do meio ambiente bucal / Antimicrobial and antibiofilm potential of the hydroethanolic extract of Spondias mombin L leaf and its fractions against superinfecting microorganisms in the oral environment

RESUMO

O controle químico do biofilme bucal atua como método auxiliar do controle mecânico para fins de manutenção e/ou restabelecimento da saúde bucal, agindo também nos demais microrganismos que não são residentes locais da microbiota bucal. Nesse contexto, a literatura já relata que muitos microrganismos superinfectantes podem estar presentes no biofilme bucal e assim, contribuir para a ocorrência de infecções sistêmicas mais graves. Assim sendo, os fitoterápicos têm demonstrado uma ampla variedade de atividades biológicas, em especial a atividade antimicrobiana. Diante disso, o presente estudo buscou avaliar a ação antimicrobiana e antibiofilme do extrato hidroetanólico da folha de Spondias mombin L. (cajá) e de suas frações de flavonóides, taninos e ácidos fenólicos, frente aos microrganismos superinfectantes (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli e Enterococcus faecalis) do ambiente bucal. Para isso, foram investigadas a Concentração Inibitória Mínima (CIM) pela Técnica de Disco-Difusão e pela Técnica da Microdiluição em Caldo, a Concentração Inibitória Mínima de Aderência (CIMA), a Cinética Bactericida e a Atividade Antibiofilme do extrato hidroetanólico da folha Spondias mombin L. e de suas frações sobre a formação de biofilme e em biofilmes pré-formados, utilizando como controle o digluconato de clorexidina a 0,12%, em triplicata. Além da interpretação descritiva, foram aplicados no presente estudo as análises estatísticas do Teste de Tukey e Two-Way ANOVA. Os resultados demonstraram que: para a CIM pela Técnica de Disco-Difusão, o extrato hidroetanólico da folha Spondias mombin L. foi estatisticamente superior ao digluconato de clorexidina 0,12% (p<0,05) para as concentrações de 500µg/mL e250µg/mLe foi estatisticamente superior também às frações estudadas (p<0,05); para a CIM pela Técnica da Microdiluição em Caldo, foi observado que o extrato hidroetanólico da folha Spondias mombin L. foi superior às frações estudadas e semelhante ao grupo controle; para a CIMA, tanto o extrato hidroetanólico da folha de Spondias mombin L., quanto as frações estudadas e o grupo controle exibiram atividade antiaderente; para a Cinética Bactericida, foi verificado que o extrato hidroetanólico, as frações estudadas e o grupo controle possuem atividade bactericida iniciando nas primeiras duas horas de contato com o microrganismo e para a Atividade Antibiofilme, foi observado que, sobre a formação de biofilme e em biofilmes pré-formados, em diferentes concentrações, o extrato hidroetanólico da folha Spondias mombin L. foi estatisticamente superior ao grupo controle (p<0,05), sendo também estatisticamente superior às frações estudadas (p<0,05). Dessa forma, pode-se concluir que o extrato hidroetanólico da folha Spondias mombin L., em diferentes concentrações, se apresentou estatisticamente superior que o digluconato de clorexidina 0,12%, exibindo assim, ação antimicrobiana e atividade antibiofilme. As frações do extrato, porém, exibiram ação antimicrobiana e atividade antibiofilme inferiores ao extrato hidroetanólico e ao digluconato de clorexidina 0,12% (AU).

ABSTRACT

The chemical control of oral biofilm acts as an auxiliary method of mechanical control for the maintenance and/or restoration of oral health, also acting on other microorganisms that are not local residents of the oral microbiota. In this context, the literature already reports that many superinfecting microorganisms can be present in the oral biofilm and thus contribute to the occurrence of more serious systemic infections. Therefore, herbal medicines have demonstrated a wide variety of biological activities, especially antimicrobial activity. Therefore, this study aimed to evaluate the antimicrobial and antibiofilm action of the hydroethanolic extract of the leaf of Spondias mombin L. (cajá) and its fractions of flavonoids, tannins and phenolic acids, against superinfecting microorganisms (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli and Enterococcus faecalis) from the oral environment. For this purpose, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) by the Disc-Diffusion Technique and the Broth Microdilution Technique, the Minimum Inhibitory Concentration of Adhesion (MICA), the Bactericidal Kinetics and the Antibiofilm Activity of the hydroethanolic extract of the Spondias mombin L. leaf were investigated and its fractions on biofilm formation and in preformed biofilms, using 0.12% chlorhexidine gluconate as a control, in triplicate. In addition to descriptive interpretation, statistical analyzes of the Tukey Test and Two-Way ANOVA were applied in this study. The results showed that: for MIC by the Disc-Diffusion Technique, the hydroethanolic extract of the Spondias mombin L. leaf was statistically superior to 0.12% chlorhexidine gluconate (p<0.05) for the concentrations of 500µg/mL and 250µg/mL and it was also statistically superior to the studied fractions (p<0.05); for the MIC by the Broth Microdilution Technique, it was observed that the hydroethanolic extract of the Spondias mombin L. leaf was superior to the studied fractions and similar to the control group; for MICA, both the hydroethanolic extract of the leaf of Spondias mombin L., the studied fractions and the control group exhibited antiadherent activity; for Bactericidal Kinetics, it was verified that the hydroethanolic extract, the studied fractions and the control group have bactericidal activity starting in the first two hours of contact with the microorganism and for the Antibiofilm Activity, it was observed that, on the formation of biofilm and in biofilms preformed, at different concentrations, the hydroethanolic extract of the Spondias mombin L. leaf was statistically superior to the control group (p<0.05), being also statistically superior to the studied fractions (p<0.05). Thus, it can be concluded that the hydroethanolic extract of the Spondias mombin L. leaf, at different concentrations, was statistically superior to 0.12% chlorhexidine gluconate, thus exhibiting antimicrobial action and antibiofilm activity. The extract fractions, however, exhibited lower antimicrobial and antibiofilm activity than hydroethanolic extract and 0.12% chlorhexidine gluconate (AU).