Efeito do tratamento térmico em microondas e do tempo de armazenamento em água sobre a citotoxicidade de resinas acrílicas para base e reembasamento de próteses / Effect of microwave post-polymerization heat-treatment and of the storage time on the cytotoxicity of denture base and reline acrylic resins

RESUMO

A proposta do presente estudo foi avaliar, por meio do teste quantitativo de incorporação de 3 H-timidina, o efeito do tratamento térmico em microondas sobre a citotoxicidade de três resinas termopolimerizáveis indicadas para confecção de bases de próteses, em função do tempo de armazenamento em água, e de três resinas autopolimerizáveis indicadas para reembasamento. A hipótese de que o tratamento térmico em microondas poderia diminuir a citotoxicidade de resinas acrílicas foi avaliada. Os materiais testados foram Lucitone 550 (a mufla foi imersa em água à temperatura de 730 C permanecendo por 90 minutos, em seguida, à temperatura foi elevada para 1000 C e a mufla mantida por mais 30 minutos), QC 20 (a mufla foi imersa em água em ebulição, o aquecimento foi mantido e a mufla permaneceu no recipiente por um período de 20 minutos contados a partir do momento em que a água atingiu novamente à temperatura de ebulição e Acron MC (a mufla foi levada ao forno de microondas durante 3 minutos à potência de 500 W) e os reembasadores Tokuyama Rebase II, Kooliner e New Truliner. Foram confeccionados, em condições assépticas, corpos-de-prova de cada resina em forma de discos medindo 10 mm de diâmetro e 1 mm de espessura. As amostras das resinas termopolimerizáveis foram armazenadas em água destilada por 0, 24 ou 48 horas a 37ºC. Para avaliar o efeito do tratamento térmico em microondas, os corpos-de-prova de todas as resinas foram divididos em dois grupos 1) sem tratamento térmico e 2) com tratamento térmico em microondas, com as amostras imersas em água, irradiadas durante 3 minutos à 500 W. Os extratos das resinas foram preparados colocando-se três corpos-de-prova de cada grupo experimental, após terem recebido o tratamento térmico, em tubos de ensaio com 9 ml de meio de cultura Eagle e incubados a 37ºC por 24 horas. Um tubo de ensaio, contendo apenas 9 ml de meio de cultura, foi armazenado sob as mesmas condições, servindo, assim, como grupo controle negativo. O possível efeito citotóxico das substâncias liberadas pelas resinas foi avaliado por meio do método de cultura de células. Para a realização do teste de citotoxicidade, 1,0 x 104 células/ml em meio de cultura Eagle foram colocadas em cada compartimento de uma placa com 96 orifícios e incubada em estufa com 5% de CO2 , a 37ºC por 24 horas. Após este período, o meio de cultura que alimentava as células foi descartado e, em cada orifício da placa, foram colocados 50 µl de meio de cultura novo e 50 µl do extrato contendo as substâncias liberadas pelos corpos-de-prova e incubada por 24 horas em estufa com 5% de CO2 , à temperatura de 37ºC. O teste de incorporação de 3 H-timidina foi utilizado para determinar a citotoxicidade dos materiais testados. Os dados foram submetidos à análise de variância em esquema fatorial incompleto de três fatores (tratamento térmico; material e tempo de armazenamento em água), incluindo ainda um grupo controle, ao nível de 5% de significância. A análise de variância foi complementada pelo teste de Tukey. Os resultados também foram avaliados de acordo com a ISO-standard 10993-5, a qual descreve os métodos in vitro para a análise da citotoxicidade. Os resultados deste estudo demonstraram que o tratamento térmico em microondas melhorou a biocompatibilidade apenas da resina Tokuyama Rebase II. Esse tratamento não diminuiu a citotoxicidade dos demais materiais. No tempo 0, a resina Tokuyama Rebase II sem tratamento e a resina Acron MC para ambos os grupos experimentais foram classificadas como discretamente citotóxicos. Os outros materiais foram graduados como não-citotóxicos. Após 24 horas de armazenamento em água, todos os materiais foram classificados como não-citotóxicos. Após 48 horas, a resina Acron MC sem tratamento e a resina QC 20 com ou sem tratamento térmico foram graduadas discretamente citotóxicos. A resina Lucitone 550 foi classificada como não-citotóxica para todos os grupos experimentais. Com base nos resultados, pôde-se concluir que o tratamento térmico em microondas diminuiu a citotoxicidade apenas da resina Tokuyama Rebase II

ABSTRACT

The aim of the current study was to evaluate the effect of microwave post-polymerization heat-treatments and water storage time on the cytotoxicity of denture base and reline acrylic resins. The hypothesis that post-polymerization treatment could decrease the cytotoxicity of acrylic base resins was tested in this study. The materials tested were Lucitone 550 (water-bath at a temperature of 73ºC for 90 minutes, followed by 30 minutes of heating at 100ºC), QC 20 (boil water, insert flask, return to boil, boil for 20 minutes) and Acron MC (microwavepolymerized, irradiated for 3 minutes at 500 W) and the hard chair-side reline resin Tokuyama Rebase II, Kooliner and New Truliner. Sample disks of the denture base resins were fabricated under aseptic conditions in mold 10 mm in diameter by 1 mm thick. The samples of the denture base acrylic resins were stored in distilled water for 0, 24 and 48 hours at 37ºC. To assess the biologic effect of the heat-treatment on the denture resins, samples fabricated were further divided into two groups 1) samples without heat-treatment; and 2) sample were treated in microwave, immersed in water, irradiated for 3 minutes at 500 W. Eluates of the materials were prepared by placing three disks into a sterile glass vial with 9 ml of Eagle's medium supplemented with antibiotics and fetal bovine serum. These were incubated for 24 hours at 37ºC. Medium without disks was also incubated and diluted as above to serve as the control. L929 mouse fibroblasts (1 x 104 cell/ml) were cultivated in Eagle's medium supplemented with antibiotics and fetal bovine serum in 96 well culture plates and incubated for 24 hours at 37ºC in an air atmosphere containing 5% CO2. After 24 hours of incubation, the culture medium was replaced by 50 µl of eluate and 50 µl of fresh medium were added to each well of the 96-well culture plate and incubated for more 24 hours at 37ºC in an air atmosphere containing 5% CO2. The 3 H-thymidine incorporation was used to determine the cytotoxicity of the materials tested. Statistical analysis of the data was performed by use of incomplete three-way analysis of variance (ANOVA) and Tukey's HSD tests (p<0.05). The results also were evaluated in accordance with ISO-standard 10993-5 (part 5 tests for cytotoxicity in vitro methods). The results of the study demonstrate that microwave post-polymerization heat-treatment only improved the biocompatibility of the Tokuyama Rebase II. The heattreatment did not decrease the cytotoxicity the other materials tested. Tokuyama Rebase II without heat-treatment and Acron MC for both experimental groups were gradually as slight cytotoxic to the group without water storage. The other resins were gradually as non-cytotoxic. After 24 hours of immersion in water, all materials were gradually as noncytotoxic. After water storage for 48 hours, the Acron MC without heat-treatment and QC 20 for both experimental groups were gradually as slight cytotoxic. The acrylic resin Lucitone 550 was gradually as no cytotoxic for all experimental groups. It has been concluded that the microwave post-polymerization heat-treatment only improved the biocompatibility of the Tokuyama Rebase II