Propriedade antifúngica de resina para base de prótese modificada com nanopartículas de prata / Antifungal properties of a denture base resin modified with silver nanoparticles

RESUMO

Apesar do uso de drogas antifúngicas no tratamento da estomatite protética, freqüentemente a infecção é persistente e a resistência microbiana tem sido observada nos biofilmes de Candida albicans. Dessa forma, existe a necessidade de se desenvolver outros agentes antimicrobianos tais como as nanopartículas de prata (AgNPs). Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de uma solução preparada de AgNPs sobre C. albicans em suspensão. Além disso, os efeitos da incorporação de diferentes concentrações da solução de AgNPs em uma resina acrílica para base de prótese e o armazenamento por períodos de até 180 dias no ângulo de contato, adesão e formação de biofilme foram avaliados. A solução de AgNPs foi sintetizada por meio de redução química utilizando borohidreto de sódio (NaBH4) como agente redutor e polivinil álcool (PVA) como estabilizante, e foi caracterizada utilizando espectroscopia UV-visível (UV-vis), espectrometria de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e espalhamento de luz dinâmico (DLS). A susceptibilidade antimicrobiana da solução de AgNPs de diferentes concentrações (de 1000 a 20 ppm) foi avaliada em C. albicans suspensão (ATCC 90028). A solução de AgNPs foi também misturada com o pó da resina para produzir resinas acrílicas com AgNPs incorporadas nas concentrações finais de 1000, 750, 500, 250 e 30 ppm. Resina sem AgNPs foi utilizada como controle. Amostras em forma de discos (13 × 2 mm) de cada concentração (n=72) foram preparadas e armazenadas em PBS estéril por 0, 7, 90 e 180 dias (n=18). Após esses períodos, os ângulos de contato foram mensurados em um goniômetro. A seguir, 9 amostras de cada concentração foram utilizadas para o teste de aderência de C. albicans (90 minutos de incubação), e 9 para o teste de formação de biofilme (48 horas de incubação). Os efeitos da solução de AgNPs e das amostras de resina acrílica para base de prótese na C. albicans foram avaliados utilizando o método de redução do XTT. O método de redução química descrito neste estudo possibilitou a obtenção de uma solução de AgNPs com, aproximadamente, 9 nm, que demonstrou alta Propriedade antifúngica de resina para base de prótese modificada com nanopartícula de prata atividade antifúngica contra C. albicans, em todas as concentrações avaliadas. Após a incorporação da solução de AgNPs à resina acrílica para base de prótese, não houve efeito significativo contra C. albicans, em todas as concentrações avaliadas. A incorporação da solução de AgNPs à resina acrílica proporcionou redução dos valores médios de ângulo de contato; entretanto, não houve efeito significativo na aderência ou na formação de biofilme de C. albicans. Houve aumento dos valores de ângulo de contato e de absorbância obtidos nos testes de adesão e formação de biofilme após o armazenamento dos corpos-de-prova por períodos de 90 e 180 dias

ABSTRACT

Despite the use of antifungal drugs to treat denture stomatitis, infection is often persistent and antifungal resistance has been observed in C. albicans biofilms. Therefore, there is a need to develop alternative antimicrobial agents such as silver nanoparticles (AgNPs). Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of a prepared AgNPs aqueous solution against C. albicans suspension. Additionally, the effects of incorporation of different concentrations of the AgNPs solution into a denture base acrylic resin and storage for up to 180 days on the contact angle, C. albicans adhesion and biofilm formation were evaluated. The AgNPs solution was synthesized by chemical reduction using sodium borohydride as reducing agent and polyvinyl alcohol as stabilizer, and was characterized by UV-visible spectroscopy, Fourier transform infrared spectroscopy and Dynamic Light Scattering. The antimicrobial susceptibility of AgNPs solution of different concentrations (from 1000 to 20 ppm) was performed against C. albicans suspension (ATCC 90028). The AgNPs solution was also mixed with the acrylic powder to produce silver-incorporated acrylic resins at the final concentrations of 1000, 750, 500, 250 and 30 ppm. Resin without AgNPs was used as control. Disk-shaped samples (13 × 2 mm) of each concentration (n=72) were prepared and stored in sterile PBS for 0, 7, 90 and 180 days (n=18). After the storage periods, the contact angles were measured in a goniometer. Then, 9 samples of each concentration were used for the C. albicans adherence assay (90 minutes of incubation), and 9 for the biofilm formation assay (48 hours of incubation). The effects of the AgNPs solution and the denture base acrylic resin samples on C. albicans were evaluated using the XTT reduction assay. The AgNPs solution, with nanoparticles of, aproximately 9 nm, demonstrated high antimicrobial activity in all tested concentrations. After the AgNPs were incorporated into the denture base acrylic resin, no effect was observed against C. albicans. The incorporation of the AgNPs reduced the contact angles of the denture base acrylic resin; however no effect on the C. albicans adherence and biofilm formation was observed. There was significant increase in the mean contact angles and mean absorbance values obtained in the C. albicans adherence and biofilm formation assays, after the specimens were stored for 90 and 180 days