Influência de diferentes tratamentos físico-químicos na adesão e viabilidade de fibroblastos de ligamento periodontal à superfície radicular simulando dentes avulsionados / Influence of different physical-chemical treatment on periodontal ligament fibroblast adhesion to root surface of simulated avulsed teeth

RESUMO

O reimplante tardio de dentes avulsionados é uma realidade dentro dos consultórios odontológicos. Na tentativa de se restabelecer a arquitetura e a função do ligamento periodontal, além de se evitar a anquilose, evitando ou modulando a reabsorção porsubstituição, a superfície radicular dos dentes avulsionados pode ser tratada com diversas substâncias, dentre elas o EDTA (ácido etilenodiamino tetra-acético) a 17%, sempre visando uma menor chance de ocorrer reabsorção inflamatória e por substituição. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia do tratamento de discos da superfície vestibular de raízes de dentes bovinos, com EDTA 17%, com Emdogain® , com ácido hialurônico e com colágeno, através de testes de viabilidade celular, quantificação das citocinas IL-1ß, IL-6, IL-8, IL-10 eTNF-α por ensaio ELISA, além da ilustração por microscopia eletrônica de varredura da adesão dos fibroblastos sobre os discos de dentina. Foram cortados 155 discos de dentina, com 4,5 mm de diâmetro, da face vestibular da superfície radicular de dentes bovinos, previamente raspados ou não com cureta periodontal. Os discos foram regularizados, limpos e autoclavados. Os espécimes foram tratados com assubstâncias preconizadas e colocados em placas de 96 poços onde foramsemeadas células de culturas primárias de fibroblastos humanos de ligamentoperiodontal, que ficaram em contato com os discos por 48 horas. A sobrevivência e a viabilidade celular na superfície dos discos foram avaliadas através do ensaio de XTT. A microscopia eletrônica de varredura foi utilizada para verificar a adesão de fibroblastos à superfície dos discos. A detecção e quantificação das citocinas foram realizadas pelo teste ELISA. Os dados foram submetidos à análise estatística pelo teste ANOVA e Tukey (p < 0,05). Os resultados obtidos mostraram que o uso de EDTA 17% por 5 minutos sem agitação foi mais eficaz que os outros protocolos (p < 0,05) e aliado ao ácido hialurônico...

ABSTRACT

The delayed reimplantation of avulsed teeth is a reality in dental offices. In an attempt to restore architecture and function of the periodontal ligament,avoiding ankylosis, preventing or modulating the replacement resorption, avulsed teeth root surface may be treated with various substances including EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) to 17%, always seeking a lower chance ofoccurring inflammatory or replacement resorption. Thus, the aim of this study was to evaluate the effectiveness of the treatment of discs cutted of the vestibular surface of bovine teeth roots with EDTA 17% with Emdogain® with hyaluronic acid and collagen through cell viability tests, quantification of cytokines IL -1ß, IL-6, IL-8, IL-10 andTNF-α by ELISA assay and, in addition, it was taken Illustrations by scanningelectron microscopy of the accession of fibroblasts on the dentin disks. 155 dentin discs with 4,5 mm in diameter will be cut from the vestibular surface of the root surface of bovine teeth, previously scraped or not with periodontal curette. The discs were regularized, cleaned and autoclaved. The specimens were treated with the substances advocated and placed in 96 well plates are seeded in which primary cell cultures of human periodontal ligament fibroblasts that were in contact with the discsfor 48 hours. The survival and cell viability on the surface of the disks are evaluated by XTT assay. The scanning electron microscopy was used to verify adherence of fibroblasts to the surface of the discs. Detection and quantification of cytokines were done by ELISA assay. The data were statistically analyzed by ANOVA and Tukey (p < 0.05). The results showed that the use of 17% EDTA for 5 minutes without stirringwas more effective than the other protocols (p <0.05) and combined with hyaluronic acid was less cytotoxic promoting better cell viability. It was not possible to ensure the fibroblasts display in scanning electron microscopy. As for the ELISA assay, there was...