Alterações do gene BCL2 em subgrupos de linfoma difuso de células grandes B definidos pela expressão imunohistoquímica e pelo perfil imunogenético

RESUMO

O limfoma difuso de células grandes B é um grupo heterogêneo de neoplasias no que diz respeito às carcterísticas clínicas, morfológicas e às alteações moleculares subjacentes. O objetivo deste trabalho foi a carcterização imuno-histoquímica (IHQ) e molecular de LDCGB primários diagnósticados e tratados em uma única instituição visando o estudo da incidência de alterações genéticas associadas ao gene BCLem subgrupos classificados de acordo com a origem celular. Foram estudados 117 casos de LDCGB provenientes do Instituto nacional de Câncer, Rio de Janeiro. A expressão de CD10, BCL6, BCL2, MUM1/IRF4 e CD138, foi avaliada por IHQ em lâminas de tissue microarray. A presença de variação intraclonal (VI)foi avaliada através da análise do padrão de hipermutação somática ongoing do gene IGH. Alterações do gene BCL2 foram estudadas por hibridização in situ fluorescente (FISH) e por métodos baseados na reação em cadeia da polimerase (PCR). O grupo inclui 57 homens e 60 mulheres, com idade mediana de 56 anos (16-90 anos) e classificados majoritariamente no grupo IPI de baixo risco (71%). De acordo com o algoritmo de três marcadores IHQ, 38% dos LDCGB foram classificados como tipo centro germinal (CG)e 62% como tipo não-CG. Não foram encontradas diferenças nas prinicpais caracterísiticas clínico-laboratorias ente estes pacientes. Todos os LCDGB estudados exibiram mutações no gene IGH indicando origem em células B CG ou pós-CG, sendo que a VI foi demonstrada em 3/6 dos LDCGB e CG e em apenas 2/9 caos não-CG. A t(14;18) foi detectada em casos nodais (15%) e associada a casos CG (p<0,001). Sinais extras do BCL2 foram detectados em 23 casos (26,5%), associados a LDCGB não-CG (p=0,005) 18 casos (18%)com cromossomos 18 adcionais, 5 casos (6%) com amplificação 18q21 e 2 casos com ambas alterações (2%). Cromossomos 18 adicionais foram mais frequentes em casos não-CG MUM1+ (p=0,02). Apenas casos não-CG exibiram amplificação 18q21 (9%, p=0,04). Os métodos de PCR para detecção t(14;18) foram concordantes com os métodos de FISH (87%). A expressão IHQ de BCL2 foi demonstrada em 50% dos casos, porém sem diferenças entre os casos CG e não-CG. Os casos BCL2+ incluíram 10 casos com a t(14;18), 5 casos com amplificação 18q21 e 9 casos com cromossomos 18 adicionais. No entanto não foi observada uma assoicação significativa entre a expressão protética e estas alterações indicando que outros mecanismos podem ser os responsáveis pela desregulação da expressão de BCL2 nos LCDB.