Inovações metodológicas para o diagnóstico sorológico da leishmaniose visceral canina

RESUMO

A soropositividade para Leishmania tem sido considerada o padrão de referência para indicar a eutanásia de cães, como recomendado pelo programa de controle da leishmaniosevisceral. Entretanto, as técnicas utilizadas atualmente, RIFI e ELISA, apresentam limitações, considerando principalmente a especificidade em detectar a leishmaniose visceral canina(LVC). Adicionalmente, após a disponibilização comercial da vacina Leishmune Marca Registrada muitas questões de ordem prática tem se tornado urgentes, devido à soroconversão imunomediada pós vacinal, que tem um impacto direto na interpretação da sorologia positiva anti-LVC. Neste estudo, foram estabelecidos procedimentos metodológicos, baseados na citometria de fluxo, para pesquisa de anticorpos anti-formas fixadas de L. chagasi (AAPFIgM,IgA, IgG, IgG1, IgG2 e IgE). Foi avaliado o desempenho das técnicas em amostras de soros de cães não infectados (NI, n=15), infectados com L. chagasi (INF, n=29) e vacinados com Leishmune Marca Registrada (VAC, n=21) para o diagnóstico diferencial da LVC. Utilizando PPFP=20% como ponto de corte para segregar resultados negativos e positivos, a AAPF-IgG apresentou excelente desempenho quando aplicada nas diluições do soro 12.048 e 18.192, sendo portanto qualificada como técnica aplicável ao diagnóstico sorológico da LVC. A AAPF-IgG foi validada para o diagnóstico sorológico da LVC quando aplicada em um maior número de amostras de cães NI (n=25), INF (n=62) e VAC (n=64). Além disso, foi avaliado o desempenho da AAPF-IgG em comparação ‘com a RIFI e ELISA e Kalazar Detect Marca Registrada para discriminar a soro reatividade de NI, INF e VAC.