Desenvolvimento e multiplicação in vitro de embriões obtidos por embriogênese somática direta de Coffea arabica L. CV. Acaiá Cerrado / Development and multiplication in vitro of embryo obtained by direct somatic embryogenesis of Coffea arabica L. CV. Acaiá Cerrado

RESUMO

Um importante método de multiplicação in vitro de plantas de Coffea é a embriogênese somática, que consiste no desenvolvimento de embrióides a partir de células haplóides ou somáticas possibilitando a micropropagação acelerada de clones superiores e a manutenção de híbridos interespecíficos. Entretanto, há poucos relatos da obtenção de embriogênese direta na espécie Coffea arabica. Objetivou-se com este trabalho estabelecer protocolo para desenvolvimento in vitro de embriões somáticos e produção de mudas de C. arabica cultivar Acaiá Cerrado. Avaliaram-se a influência de sacarose (0; 30; 60; 90 e 120 g L-1) x BAP (0; 2; 4 e 8 mg L-1) em embriões somáticos. No desenvolvimento das plântulas, testaram-se ANA (0; 0,25; 0,5 e 1mg L-1) x GA3 (0; 2,5; 5,0; 10 e 20 mg L-1) em brotações, com tamanho médio de 1 a 1,5 cm, oriundas de embriões somáticos in vitro. Durante a etapa de indução de embriões, o experimento foi conduzido em sala de crescimento em condições de escuro e, na etapa de desenvolvimento dos embriões e plântulas, os explantes foram submetidos à irradiância em torno de 32 µM m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas, à temperatura de 25 ± 1 ºC. Na aclimatização, avaliou-se o efeito da presença e ausência de raízes em plântulas de cafeeiro oriundas de embriogênese somática direta. A adição de 90 g L-1 de sacarose e 2 mg L-1 de BAP ao meio de cultura proporciona melhor crescimento in vitro de embriões de cafeeiro. Utilizando-se 0,5 mg L-1 de ANA e 14,2 mg L-1 de GA3 obtém-se maior comprimento da parte aérea de brotações de C. arabica L. cv. Acaiá Cerrado. Conclui-se que é possível a obtenção de plântulas micropropagadas de C. arabica L. cultivar Acaiá Cerrado pela embriogênese somática direta. O enraizamento de brotações de cafeeiro cultivar Acaiá Cerrado ocorre simultaneamente ao processo de aclimatização.

ABSTRACT

An important method of in vitro plant's multiplication of Coffea is somatic embryogenesis, which consists in developing embryoid from haploid or diploid somatic cells, without the fusion of gametes allowing the accelerated micropropagation and maintenance of superior clones interspecific hybrids. However there are few reports of direct embryogenesis in Coffea arabica. The objective of this work to establish protocol for in vitro development of somatic embryos and seedlings of C. arabica Acaiá Cerrado. The influence of sucrose (0, 30, 60, 90 and 120 g L-1) x BAP (0, 2, 4 and 8 mg L-1) on somatic embryos from embryogenic were evaluated. In seedling development, NAA (0, 0.25, 0.5 and 1 mg L-1) x GA3 (0, 2.5, 5.0, 10 and 20 mg L-1) in shoots were tested, with average size of 1 to 1.5 cm, derived from somatic embryos in vitro. During the development stage of embryos and embryonic seedling induction, the experiment was conducted in a growth chamber under conditions of darkness and the stage of development of embryos and seedlings, the explants were subjected to irradiation around 32 mM m- 2 s-1 and a photoperiod of 16 hours at a temperature of 25 ± 1 º C. In acclimatization, the effect of the presence and absence of roots in coffee seedlings originating from direct somatic embryogenesis were evaluated. The addition of 90 g L-1 sucrose and 2 mg L-1 BAP to the culture medium provides a better in vitro growth of embryos from coffee. Using 0.5 mg L-1 NAA and 14.2 mg L-1 GA3 obtains greater shoot length of shoots of C. arabica L. cv. Acaiá Cerrado. It was concluded that it is possible to obtain plantlets C. arabica L. Acaiá Cerrado by direct somatic embryogenesis. The rooting of shoots of coffee Acaiá Cerrado occurs simultaneously with the process of acclimatization.