In vitro and in vivo biocompatibility of reoss® in powder and putty configurations

ABSTRACT

Article This study evaluated comparatively two configurations (powder and putty) of a composite biomaterial based on PLGA (Poly(lactide-co-glycolide)/nanoescale hydroxyapatite (ReOss®, Intra-Lock International) through microscopic morphology, in vitro cytotoxicity, biocompatibility and in vivo response as a bone substitute. SEM and EDS characterized the biomaterials before/after grafting. Cytocompatibility was assessed with murine pre-osteoblasts. Osteoconductivity and biocompatibility were evaluated in White New Zealand rabbits. Both configurations were implanted in the calvaria of eighteen animals in non-critical size defects, with blood clot as the control group. After 30, 60 and 90 days, the animals were euthanized and the fragments containing the biomaterials and controls were harvested. Bone blocks were embedded in paraffin (n=15) aiming at histological and histomorphometric analysis, and in resin (n=3) aiming at SEM and EDS. Before implantation, the putty configuration showed both a porous and a fibrous morphological phase. Powder revealed porous particles with variable granulometry. EDS showed calcium, carbon, and oxygen in putty configuration, while powder also showed phosphorus. After implantation EDS revealed calcium, carbon, and oxygen in both configurations. The materials were considered cytotoxic by the XTT test. Histological analysis showed new bone formation and no inflammatory reaction at implant sites. However, the histomorphometric analysis indicated that the amount of newly formed bone was not statistically different between experimental groups. Although both materials presented in vitro cytotoxicity, they were biocompatible and osteoconductive. The configuration of ReOss® affected morphological characteristics and the in vitro cytocompatibility but did not impact on the in vivo biological response, as measured by the present model.

RESUMO

Resumo Este estudo avaliou comparativamente duas configurações (pó e massa) de um biomaterial composto com base de PLGA (Poli(láctico-co-glicólico)/hidroxiapatita em nanoescala (ReOss®, Intra-Lock International) através da morfologia microscópica, citotoxicidade in vitro, biocompatibilidade e resposta in vivo como substituto ósseo. MEV e EDS caracterizaram os biomateriais antes/após o enxerto. A citocompatibilidade foi avaliada em pré-osteoblastos murinos. A osteocondutividade e a biocompatibilidade foram avaliadas em coelhos Branco da Nova Zelândia. Ambas as configurações foram implantadas na calvária de dezoito animais em defeitos não-críticos, com coágulo sanguíneo como grupo controle. Após 30, 60 e 90 dias, os animais foram eutanasiados e os fragmentos contendo os biomateriais e controles coletados. Blocos ósseos foram embebidos em parafina (n=15) destinados às análises histológica e histomorfométrica, e em resina (n=3) destinadas à MEV e EDS. Antes da implantação, a configuração massa mostrou ambas fases morfológicas porosa e fibrosa. O pó revelou partículas porosas com granulometria variável. EDS mostrou cálcio, carbono e oxigênio na configuração massa, enquanto o pó mostrou também fósforo. Após a implantação a EDS revelou cálcio, carbono e oxigênio em ambas configurações. Os materiais foram considerados citotóxicos pelo teste XTT. A análise histológica mostrou nova formação óssea e nenhuma reação inflamatória nos sítios de implante. Entretanto, a análise histomorfométrica indicou que a quantidade de osso neoformado não foi estatisticamente diferente entre os grupos experimentais. Embora ambos os materiais tenham apresentado citotoxicidade in vitro, foram biocompatíveis e osteocondutores. A configuração do ReOss® afetou as características morfológicas e a citocompatibilidade in vitro, porém não impactou a resposta biológica in vivo, como medido pelo presente modelo.