The ameliorative potential of probiotics and/or silymarin on thioacetamide induced hepatotoxicity in rats: histological and immunohistochemical study / El potencial de mejora de los probióticos y / o silimarina sobre la hepatotoxicidad inducida por tioacetamida en ratas: estudio histológico e inmunohistoquímico

ABSTRACT

Thioacetamide (TAA) is one of the common fungicidal agents that induce liver injury varying from inflammation, necrosis, and fibrosis to cirrhosis. Many recent studies reported the beneficial effect of probiotics and silymarin on hepatotoxicity regardless the causative agents. Therefore, the present study aimed to evaluate the ameliorative role of probiotics and/or silymarin on TAA induced hepatotoxicity in rats via histological, and immunohistochemical methods. Twenty five male albino rats were used for this experiment and were divided into five groups (n=5 rats/group); group I acts as negative control, group II was orally administrated distilled water for six weeks, then injected with TAA (200 mg/kg b.wt./ 5 ml physiological saline/ I.P.) twice a week for another six weeks, group III was treated with probiotics at a dose of 135 mg/ kg b.wt. orally in drinking water daily for six weeks, then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks, group IV was treated with silymarin at a dose of 200 mg/ kg b.wt orally 4 times per week for six weeks, then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks and group V was treated with combination of both probiotics and silymarin, at the same dosage in groups III and IV respectively then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks. Histologically, TAA induced hepatocytes degeneration, inflammatory cells infiltration, and pseudolobular parenchyma as well as, high apoptosis and low proliferation rates that were proved by immunohistochemical staining for caspase 3 and ki-67 respectively. Probiotics and/or silymarin improved the histological feature of hepatocytes, reduced apoptosis and stimulated proliferation. Based on these results, we concluded that the use of probiotics and silymarin combination ameliorates the hepatotoxic effect of TAA in rats more than the use of probiotics or silymarin alone.

RESUMEN

La tioacetamida (TAA) es uno de los agentes fungicidas más comunes que inducen lesiones hepáticas que varían desde inflamación, necrosis y fibrosis hasta cirrosis. Muchos estudios recientes informaron el efecto beneficioso de los probióticos y la silimarina sobre la hepatotoxicidad independientemente de los agentes causantes. Por lo tanto, el presente estudio tuvo como objetivo evaluar el papel paliativo de los probióticos y / o silimarina en la hepatotoxicidad inducida por TAA en ratas a través de métodos histológicos e inmunohistoquímicos. Para este experimento se usaron veinticinco ratas albinas y se dividieron en cinco grupos (n = 5 ratas / grupo); el grupo I se usó como control negativo; en el grupo II se administró por vía oral agua destilada durante seis semanas y luego se inyectó TAA (200 mg / kg b.wt./ 5 ml solución salina fisiológica / IP) dos veces por semana durante otras seis semanas; el grupo III se trató con probióticos, dosis diaria de 135 mg / kg b.wt. por vía oral en agua potable, durante seis semanas y luego fue inyectado con TAA (dosis del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas; el grupo IV se trató con silimarina, con una dosis de 200 mg / kg b.wt por vía oral 4 veces por semana durante seis semanas, luego se inyectó TAA (dosificación del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas; y el grupo V, se trató con una combinación de ambos probióticos y silimarina con la misma dosis que en los grupos III y IV, respectivamente, luego fueron inyectados con TAA (dosificación del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas. Histológicamente, la TAA indujo la degeneración de los hepatocitos, la infiltración de células inflamatorias y el parénquima pseudolobular, así como también una apoptosis alta y tasas de proliferación bajas que se probaron mediante tinción inmunohistoquímica para caspasa 3 y ki-67, respectivamente. Los probióticos y / o la silimarina mejoraron la característica histológica de los hepatocitos, redujeron la apoptosis y estimularon la proliferación. En base a estos resultados, concluimos que el uso de la combinación de probióticos y silimarina mejora el efecto hepatotóxico del TAA en ratas más que el uso de probióticos o silimarina individualmente.