Study of the antifungal potential of (r)-(+)-citronellal and its association with therapeutic agents used in the treatment of vulvovaginal candidiasis / Estudo do potencial antifúngico do (r)-(+)-citronelal e sua associação com agentes terapêuticos utilizados no tratamento da candidíase vulvovaginal

ABSTRACT

Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a common fungal infection that affects healthy women of all ages. At least 75% of women will develop one or more infections once during their lifetime, with 6 to 9% of those individuals developing recurrent infections. In view of this context, this study sought to evaluate the antifungal potential of the isolated (R)-(+)-citronellal [(R)-(+)-CT] and associated to therapeutic agents of clinical importance. The enantiomer was solubilized in tween 80 and dimethylsulfoxide (DMSO). Posteriorly diluted in sterile distilled water up to the concentration of 2048µg/mL. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the product was determined by microdilution in RPMI-1640 obtaining dilutions of 1024-4µg/mL. The minimum fungicidal concentration (MFC) was determined by the Sabouraud dextrose agar (SDA) depletion technique from aliquots of 1µL of the MIC, MIC × 2 and MIC × 4. The MIC and the MFC values of (R)-(+)-CT for 90% of the C. albicans strains were 16 and 32µg/mL respectively. In the susceptibility test, C. albicans presented a high resistance to fluconazole and to itraconazole, 12 (92.30%) of the strains. However, for ketoconazole and miconazole the resistance was of 4 (30.76%) and 3 (23.07%) of the strains respectively. In the combination testing of the (R)-(+)-CT with ketoconazole and miconazole, the resistance was completely reverted. For fluconazole and itraconazole, the resistance was reverted in 9 (75%) and 7 (58.33%) of the strains respectively. The (R)-(+)-CT presented fungicide activity with MFC of MIC × 2. When in combination with ketoconazole, fluconazole, itraconazole and miconazole increased the inhibition zones of these antifungal drugs, reducing the resistance against C. albicans.

RESUMO

Candidíase vulvovaginal (CVV) é uma infecção fúngica comum que afeta mulheres saudáveis de todas as idades. Pelo menos 75% das mulheres irão desenvolver uma ou mais infecções uma vez durante a vida, com 6 a 9% dos indivíduos desenvolvendo infecções recorrentes. Diante deste contexto, buscou-se avaliar neste estudo o potencial antifúngico do (R)-(+)-citronelal [(R)-(+)-CT] isolado e associado a agentes terapêuticos de importância clínica. O enantiômero foi solubilizado em tween 80 e dimetilsulfóxido (DMSO). Posteriormente diluiu-se em água destilada estéril até a concentração de 2048µg/mL. A concentração inibitória mínima (CIM) do produto foi determinada por microdiluição em meio RPMI-1640 obtendo diluições de 4-1024µg/mL. A concentração fungicida mínima (CFM) foi determinada pela técnica de esgotamento em agar Sabouraud dextrose (ASD) a partir de alíquotas de 1mL da CIM, CIM × 2 e CIM × 4. A CIM e a CFM do (R)-(+)-CT para 90% das cepas de C. albicans foram 16 e 32µg/mL respectivamente. No ensaio de suscetibilidade, C. albicans apresentou alta resistência ao fluconazol e ao itraconazol, 12 (92.30%) das cepas. No em tanto, para o cetoconazol e o miconazol a resistência foi de 4 (30.76%) e 3 (23.07%) das cepas respectivamente. No ensaio de combinação do (R)-(+)-CT com cetoconazol e miconazol, a resistência foi completamente revertida. Para o fluconazol e o itraconazol, a resistências foi revertida em 9 (75%) e 7 (58.33%) das cepas respectivamente. O (R)-(+)-CT apresentou atividade fungicida com CFM igual à CIM × 2. Quando em combinação com cetoconazol, fluconazol, itraconazol e miconazol ampliou as zonas de inibição desses antifúngicos, diminuindo a resistência contra C. albicans.