Desarrollo embriofetal del iris: inmunotinción del morfógeno Shh / Embryo-fetal development of iris: immunohistochemestry of morphogen Shh

RESUMEN

RESUMEN Para que se desarrolle el iris, se requiere una especificación de la capa periférica de la copa óptica a un destino no neuronal y además la migración de células mesenquimales perioculares. Nuestro objetivo fue reconocer los cambios histológicos de los derivados periféricos de la copa óptica y mesénquima periocular, como también reconocer la presencia del morfógeno Sonic hedgehog (Shh) en las capas que constituyen el esbozo de iris. Se utilizaron 15 ratones hembras (Mus musculus) adultas jóvenes gestantes. Se realizó eutanasia con tiopental sódico. Los embriones y fetos de 12, 14,5 y 17 días post-coital (dpc) fueron procesados con técnica histológica e inmunohistoquímica con anticuerpo anti-Shh (scbt, H-160, conejo) con dilución 1100 en PBS. A los 12 dpc, se observa una cópa óptica que presenta capas retinianas interna y externa, y el iris no se observa. Entre el cristalino y el ectodermo superficial se identifican 4 capas de células mesenquimales. A los 14,5 dpc, el iris contiene dos capas epiteliales (interna y externa) que se continúan con las capas neural y pigmentaria de la retina. Se observan 8 capas de células mesenquimales. A los 17 dpc, la capa epitelial interna del iris presenta un segmento más elongado con inmunotinción positiva a Shh y otra parte que constituye un epitelio de células cilíndricas simples negativas a este anticuerpo. La capa epitelial externa presenta el mismo epitelio inmunonegativo. Las capas de la retina también son positivas, como también la periferia del cristalino. No esta formado el iris ni tampoco el cuerpo ciliar. La inmunopositividad en el cristalino, en el primer segmento de la capa interna del esbozo del iris y en la capa ganglionar retinal a los 17 dpc, se relaciona con la diferenciación tardía del iris y con los ojos cerrados de las crías al nacimiento.

ABSTRACT

SUMMARY: In order for the iris to develop, a specification of the peripheral layer of the optic cup to a non-neuronal target is required, as well as the migration of periocular mesenchymal cells. Our aim was to recognize the histological changes of peripheral derivatives of the optic cup and periocular mesenchyme, as well as recognize the presence of the morphogen Sonic hedgehog (Shh) in the layers constituting the outline of the iris. 15 female mice (Mus musculus) pregnant young adults were used. Euthanasia was performed with sodium thiopental. Embryos and fetuses of 12, 14.5 and 17 days post-coital (dpc) were processed with histological and immunohistochemical technique with anti-Shh antibody (scbt, H 160, rabbit) with dilution 1100 in PBS. At 12 dpc, an optic cup showing internal and external retinal layers is observed, and the iris is not observed. Between the lens and the superficial ectoderm, 4 layers of mesenchymal cells are identified. At 14.5 dpc, the iris contains two epithelial layers (internal and external) that are continued with the neural and pigmentary layers of the retina. 8 layers of mesenchymal cells are observed. At 17 dpc, the inner epithelial layer of the iris presents a more elongated segment with positive immunostaining to Shh and another part that constitutes an epithelium of simple cylindrical cells negative to this antibody. The outer epithelial layer presents the same immunonegative epithelium. The layers of the retina are also positive, as well as the periphery of the lens. The iris is not formed nor is the ciliary body.The immunopositivity in the lens, in the first segment of the inner layer of the iris outline and in the retinal ganglion layer at 17 dpc, is related to the late differentiation of the iris and the closed eyes of the offspring at birth.