Montagem e padronizaçäo do radioimunoensaio do ACTH plasmático / Mounting and standardization of radioimmunoassay of plasmatic ACTH

RESUMO

Esta investigaçäo compreendeu a padronizaçäo da extraçäo e do radioimunoensaio do ACTH plasmático, ainda näo realizados no Brasil. A extraçäo foi feita com ácido silícico ativado com posterior deadsorçäo com ácido clorídrico/acetona. O RiE utilizou um anticorpo central contra a seqüência 11-24 do ACTH e o padräo de marcaçäo e das curvas padröes foi o ACTH (1-39) humano sintético. Os resultados permitiram as seguintes conclusöes: a. na extraçäo do ACTH do plasma através do ácido silícico, a maior perda ocorreu na fase de adsorçäo e pouco nas outras fases, sendo que em 22 extraçöes consecutivas a recuperaçäo final foi em média 60,7%; b. as curvas padröes extraídas foram paralelas às curvas em tampäo, e os extratos näo modificaram os blanks ou o zero, indicando ausência de interferências inespecíficas da extraçäo do RiE; c. O RiE ralizado com pré-incubaçäo de 67 horas apresentou uma sensibilidade média de 3,3 pg/tubo (7,7 pg/ml plasma). Os coeficientes de variaçäo intra-ensaio estiveram entre 6,3 e 12,3%, e o interensaio foi de 18,3%. A replicaçäo, no intervalo de 13 a 4.260 pg/ml, apresentou um coeficiente de correlaçäo de 0,99. No conjunto, concluímos que o RiE do ACTH padronizado neste trabalho é confiável, podendo ser utilizado em diagnóstico e pesquisa