Padronizaçao para a dosagem de hemoglobina extracelular pelo metodo da cianometemoglobina / Cianomethemoglobin method padronization for supernatant hemoglobin determination

RESUMO

A concentraçao de hemoglobina (Hb) extracelular e um indice adequado para a avaliaçao da hemolise intravascular em estados hemoliticos diversos,bem como para a monitoraçao da integridade celular durante a preservaçao de eritrocitos in vitro. O metodo da cianometemoglobina e reconhecido como excelente quanto a exatidao e reprodutibilidade, e esta perfeitamente padronizado para determinar as concentraçoes de hemoglobina presentes no sague total. Entretanto, a dosagem de microquantidades de hemoglobina no meio extracelular, por este metodo, depende de uma padronizaçao no que diz respeito a diluiçoes a serem empregadas e a faixa de sensibilidade. Neste trabalho, demonstrou-se a linearidade do metodo na faixa de sensibilidade de 1 a 60 mg/dl de hemoglobina, nas condiçoes de ensaio, e indicou-se diluiçoes adequadas para a medida de hemoglobina extracelular em funçao (i) do grau dehemolise observado visualmente, (ii) da obtençaode observancias na faixa de sensibilidade do metodo. Na aplicaçao do metodo, determinou-se a hemoglobina extracelular em amostras de eritrocitos preservados a 4C em ADSOL, uma soluçao aditiva empregada rotineiramente em Banco de Sangue. De acordo com o esperado, a hemolise aumentou gradativamente durante 12 semanas de preservaçao e os valores obtidos variavam entre 0,008g/dl e 1,625g/dl de hemoglobina extracelular,neste periodo.